目的探索在人胆囊癌GBC-SD细胞系中是否存在具有干细胞特性的SP细胞（side population cells）群。方法采用荧光激活细胞分选技术（FACS）分选出人胆囊癌SP细胞、非SP细胞。培养3～5周后再次进行FACS，用以检测SP细胞的分化情况。利用...目的探索在人胆囊癌GBC-SD细胞系中是否存在具有干细胞特性的SP细胞（side population cells）群。方法采用荧光激活细胞分选技术（FACS）分选出人胆囊癌SP细胞、非SP细胞。培养3～5周后再次进行FACS，用以检测SP细胞的分化情况。利用流式细胞术检测ABCG2蛋白在SP细胞的表达。结果SP细胞群在人胆囊癌GBC-SD细胞中占（0．64±0．08）％，分离出的SP细胞在培养3～5周后会产生SP细胞和非SP细胞，而非SP细胞则不具备此特性；并且ABCG2在胆囊癌SP细胞群中呈现出高表达状态[（89．56±3．86）％]，在非SP细胞中几乎不表达[（1．32±0．49）％]，两者之间的差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论人胆囊癌GBC-SD细胞系中存在着很少量的干细胞样SP细胞群，并且高表达ABCG2。展开更多
目的探讨增强miR-146b-3p表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法 Real time PCR检测miR-146b-3p在6种人胰腺癌细胞系(MIA PaCa-2、BxPC-3、AsPC-1、PANC-1、SW1990、PC-3)和手术切除的12对胰腺癌/癌旁组织中的表达。将Pre-miR-hsa-miR...目的探讨增强miR-146b-3p表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法 Real time PCR检测miR-146b-3p在6种人胰腺癌细胞系(MIA PaCa-2、BxPC-3、AsPC-1、PANC-1、SW1990、PC-3)和手术切除的12对胰腺癌/癌旁组织中的表达。将Pre-miR-hsa-miR-146b-3p Precursor转染MIA PaCa-2细胞,Real time PCR检测转染后miR-146b-3p的表达变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-8的表达变化。结果与正常胰腺组织相比,miR-146b-3p在6种胰腺癌细胞系中均呈低表达,以MIA PaCa-2细胞最为明显;12对胰腺组织中,癌组织miR-146b-3p表达水平均低于癌旁组织。同阴性对照组比较,转染前体组的MIA PaCa-2细胞,miR-146b-3p表达增强383.25倍,细胞增殖能力下降,细胞凋亡率增加,蛋白Bcl-2表达降低(50.0%),Bax表达升高(4.29倍)。结论 miR-146b-3p在胰腺癌细胞系和癌组织中低表达;上调胰腺癌细胞MIA PaCa-2中miR-146b-3p的表达,能够抑制增殖和诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2表达,上调Bax的表达有关。展开更多
文摘目的探索在人胆囊癌GBC-SD细胞系中是否存在具有干细胞特性的SP细胞（side population cells）群。方法采用荧光激活细胞分选技术（FACS）分选出人胆囊癌SP细胞、非SP细胞。培养3～5周后再次进行FACS，用以检测SP细胞的分化情况。利用流式细胞术检测ABCG2蛋白在SP细胞的表达。结果SP细胞群在人胆囊癌GBC-SD细胞中占（0．64±0．08）％，分离出的SP细胞在培养3～5周后会产生SP细胞和非SP细胞，而非SP细胞则不具备此特性；并且ABCG2在胆囊癌SP细胞群中呈现出高表达状态[（89．56±3．86）％]，在非SP细胞中几乎不表达[（1．32±0．49）％]，两者之间的差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论人胆囊癌GBC-SD细胞系中存在着很少量的干细胞样SP细胞群，并且高表达ABCG2。
文摘目的探讨增强miR-146b-3p表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法 Real time PCR检测miR-146b-3p在6种人胰腺癌细胞系(MIA PaCa-2、BxPC-3、AsPC-1、PANC-1、SW1990、PC-3)和手术切除的12对胰腺癌/癌旁组织中的表达。将Pre-miR-hsa-miR-146b-3p Precursor转染MIA PaCa-2细胞,Real time PCR检测转染后miR-146b-3p的表达变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-8的表达变化。结果与正常胰腺组织相比,miR-146b-3p在6种胰腺癌细胞系中均呈低表达,以MIA PaCa-2细胞最为明显;12对胰腺组织中,癌组织miR-146b-3p表达水平均低于癌旁组织。同阴性对照组比较,转染前体组的MIA PaCa-2细胞,miR-146b-3p表达增强383.25倍,细胞增殖能力下降,细胞凋亡率增加,蛋白Bcl-2表达降低(50.0%),Bax表达升高(4.29倍)。结论 miR-146b-3p在胰腺癌细胞系和癌组织中低表达;上调胰腺癌细胞MIA PaCa-2中miR-146b-3p的表达,能够抑制增殖和诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2表达,上调Bax的表达有关。
