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人重组Fas配体体外诱导细胞周期特异性凋亡模型的建立
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作者 何小军 肖田 +7 位作者 王尊 葛军娜 黄丹 徐惠婷 李小兰 肖徽 陶德定 龚建平 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期385-388,共4页
目的运用人重组Fas配体(rhFasL),体外诱导稳定而又典型的Fas介导的细胞周期特异性凋亡模型,为针对其细胞凋亡过程中的细胞周期机制研究、肿瘤的生物学治疗和自身免疫性疾病的防治等提供科学的研究平台。方法以白血病细胞系(Molt-4和Jur... 目的运用人重组Fas配体(rhFasL),体外诱导稳定而又典型的Fas介导的细胞周期特异性凋亡模型,为针对其细胞凋亡过程中的细胞周期机制研究、肿瘤的生物学治疗和自身免疫性疾病的防治等提供科学的研究平台。方法以白血病细胞系(Molt-4和Jurkat细胞系)和进入细胞周期的外周血淋巴细胞为载体,用人重组Fas配体诱导细胞6~36h后,用亚G1峰法、传统的AnnexinⅤ/PI和改良后的API法进行标记并用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果改良后的API法显示人重组Fas配体诱导的细胞凋亡具有细胞周期特异性及始动位点;传统的AnnexinⅤ/PI显示在将细胞凋亡控制在10%~20%并以早期细胞凋亡为主时诱导的模型最典型;亚G1峰法只能检测晚期细胞凋亡和进行DNA直方图分析。结论人重组Fas配体体外诱导的细胞凋亡具有细胞周期特异性并始动于G1期,联合应用传统的Annex-in-Ⅴ/PI及改良后的API法能为建立稳定而又典型的体外Fas介导的细胞周期特异性凋亡模型提供技术支撑。 展开更多
关键词 人重组Fas配体 细胞周期 细胞凋亡 流式细胞术
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心肌素基因在结直肠癌中的抑癌作用
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作者 严涵鹏 吴齐 +1 位作者 邵胜利 冯永东 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期14-20,共7页
目的研究心肌素(myocardin, MYOCD)基因对结直肠癌(colorectal cancer, CRC)细胞增殖、迁移侵袭能力的影响及机制。方法 TCGA数据库、荧光实时定量PCR与Western blot检测结直肠癌组织与正常组织中的MYOCD基因表达差异;构建高表达MYOCD... 目的研究心肌素(myocardin, MYOCD)基因对结直肠癌(colorectal cancer, CRC)细胞增殖、迁移侵袭能力的影响及机制。方法 TCGA数据库、荧光实时定量PCR与Western blot检测结直肠癌组织与正常组织中的MYOCD基因表达差异;构建高表达MYOCD结直肠癌细胞系,CCK-8实验检测细胞增殖能力,Transwell迁移实验、Transwell侵袭实验、划痕实验检测CRC细胞迁移、侵袭能力,运用生物信息学方法研究MYOCD对CRC组织干细胞特性的影响,并用克隆形成实验进一步验证。结果 CRC组织中MYOCD与正常组织相比呈低表达状态,MYOCD的过表达可抑制CRC细胞的增殖,但对CRC细胞的迁移与侵袭无明显影响,生物信息学分析提示MYOCD可抑制CRC细胞的干细胞特性,细胞实验进一步证明过表达MYOCD可抑制CRC细胞的CD133表达,并明显抑制CRC细胞克隆形成能力。结论MYOCD基因可抑制CRC细胞的增殖但对细胞迁移、侵袭能力无明显影响,该过程可能是通过抑制CRC的干细胞特性实现。 展开更多
关键词 结直肠癌 MYOCD基因 增殖 侵袭转移 癌症干细胞
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