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TGF-β1、EGFP双基因修饰骨髓间充质干细胞的体外实验研究
被引量：
2
1
作者
曹颖光
王戎
+1 位作者
宋珂
王华均
《口腔医学研究》
CAS
CSCD
2007年第1期28-31,共4页
目的:构建pTGF-β1-IRES2-EGFP双顺反子真核表达载体,检测其在骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达,为研究基因修饰细胞回植后的迁移转归及成骨作用提供实验基础。方法:构建p TGF-β1-IRES2-EGFP双顺反子真核表达载体,p TGF-β1-IRES2-EGFP...
目的:构建pTGF-β1-IRES2-EGFP双顺反子真核表达载体,检测其在骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达,为研究基因修饰细胞回植后的迁移转归及成骨作用提供实验基础。方法:构建p TGF-β1-IRES2-EGFP双顺反子真核表达载体,p TGF-β1-IRES2-EGFP与pIRES2-EGFP分别转染BMSCs,并设空白对照。荧光显微镜和细胞免疫组化分别检测GFP和TGF-β1的表达。结果:成功地构建含TGF-β1基因和EGFP基因的真核表达载体。G418筛选10-15 d后有抗性克隆形成。pTGF-β1-IRES2-EGFP转染组抗性克隆中,GFP表达的同时有TGF-β1的表达,而部分抗性克隆(约20%)中有TGF-β1表达的却无GFP表达。pIRES2-EGFP转染组的抗性克隆中有EGFP表达,但无TGF-β1表达。结论:利用IRES构建的含TGF-β1基因和GFP基因的双顺反子真核表达载体,能在部分BMSCs中同时获得表达,可以作为TGF-β1基因修饰BMSCs体内回植后追踪其成骨作用的方法。
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关键词
转化生长因子Β1
增强型绿色荧光蛋白
骨髓间充质干细胞
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职称材料
题名
TGF-β1、EGFP双基因修饰骨髓间充质干细胞的体外实验研究
被引量：
2
1
作者
曹颖光
王戎
宋珂
王华均
机构
华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔系
出处
《口腔医学研究》
CAS
CSCD
2007年第1期28-31,共4页
基金
武汉市科技攻关计划项目(编号:20036004)
文摘
目的:构建pTGF-β1-IRES2-EGFP双顺反子真核表达载体,检测其在骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达,为研究基因修饰细胞回植后的迁移转归及成骨作用提供实验基础。方法:构建p TGF-β1-IRES2-EGFP双顺反子真核表达载体,p TGF-β1-IRES2-EGFP与pIRES2-EGFP分别转染BMSCs,并设空白对照。荧光显微镜和细胞免疫组化分别检测GFP和TGF-β1的表达。结果:成功地构建含TGF-β1基因和EGFP基因的真核表达载体。G418筛选10-15 d后有抗性克隆形成。pTGF-β1-IRES2-EGFP转染组抗性克隆中,GFP表达的同时有TGF-β1的表达,而部分抗性克隆(约20%)中有TGF-β1表达的却无GFP表达。pIRES2-EGFP转染组的抗性克隆中有EGFP表达,但无TGF-β1表达。结论:利用IRES构建的含TGF-β1基因和GFP基因的双顺反子真核表达载体,能在部分BMSCs中同时获得表达,可以作为TGF-β1基因修饰BMSCs体内回植后追踪其成骨作用的方法。
关键词
转化生长因子Β1
增强型绿色荧光蛋白
骨髓间充质干细胞
Keywords
Transforming grouth factor -β1 Enhanced green fluorescent protein （EGFP） Bone mesenchymal stem cells
分类号
R318 [医药卫生—生物医学工程]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
TGF-β1、EGFP双基因修饰骨髓间充质干细胞的体外实验研究
曹颖光
王戎
宋珂
王华均
《口腔医学研究》
CAS
CSCD
2007
2
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