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幽门螺杆菌内置佐剂UreB和HpaA双价重组疫苗对实验感染小鼠的免疫保护作用 被引量:5
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作者 毛亚飞 严杰 徐颺 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2005年第5期405-411,共7页
目的:了解内置重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(rLTB)佐剂、幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)尿素酶B亚单位(rUreB)和黏附素(rHpaA)双价基因工程疫苗对Hp SS1株感染BALB/c小鼠的保护作用及其机制.方法:采用NTA-Ni亲和层析法分别收集... 目的:了解内置重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(rLTB)佐剂、幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)尿素酶B亚单位(rUreB)和黏附素(rHpaA)双价基因工程疫苗对Hp SS1株感染BALB/c小鼠的保护作用及其机制.方法:采用NTA-Ni亲和层析法分别收集rUreB、rHpaA、rLTB-rUreB-rHpaA、重组大肠杆菌不耐热肠毒素A亚单位突变体(rLTKA63)、rLTB和霍乱肠毒素B亚单位(rCTB).用Western blot检测各重组蛋白抗原的免疫反应性.用GM1-ELISA检测rLTB、rCTB、rLTB-rUreB-rHpaA的佐剂活性.建立Hp SS1株感染BALB/c小鼠模型,检测不同组合抗原和佐剂的免疫保护效果.采用分离培养和镀银染色法检查感染小鼠胃窦组织中的Hp.建立ELISA,检测免疫小鼠特异性胃液S-IgA和血清IgA.结果:rUreB、rHpaA和rLTB-rUreB-rHpaA可被兔抗Hp全菌抗体识别,并与牛GM1结合.单用rUreB或rHpaA 免疫小鼠,其保护率低于70%;若与rLTB或rCTB合用,其保护率可增至75.0%~83.3%.在不同抗原及佐剂组合中,rLTB-rUreB-rHpaA保护率达100%,其次为rHpaA+rUreB+rCTB+rLTKA63(91.7%)和rUreB+rHpaA+rLTB(90.9%).rLTB和rCTB均有明显的诱生免疫小鼠特异性血清IgA和胃液S-IgA作用,但前者诱生S-IgA的能力强于后者.特异性血清IgA,尤其是胃液S-IgA的阳性率与小鼠免疫保护率基本吻合,rLTB-rUreB-rHpaA免疫小鼠rUreB 和rHpaA 特异性S-IgA阳性率分别高达100%和91.7%.结论:rUreB和rHpaA有良好的免疫反应性和抗原性,rLTB和rCTB有黏膜免疫佐剂活性.内置佐剂UreB和HpaA双价重组疫苗对小鼠高保护率与使用高剂量rLTB、抗原分子量增大和局部高水平特异性S-IgA抗体有关. 展开更多
关键词 螺杆菌 幽门/免疫学 IGA 重组 遗传 免疫疗法 螺杆菌感染/预防和控制 IGA 分泌/分析 尿素酶/生物合成 细胞黏附
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初治涂阳肺结核患者治疗前后结核分枝杆菌毒力变化的探讨 被引量:9
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作者 李丽 马记磊 +8 位作者 任易 谢红 田丹 南晶 俞琦 田茂鹏 景玉凯 范雄林 王卫华 《中国防痨杂志》 CAS 2016年第11期973-977,共5页
目的分析初治涂阳肺结核患者经抗结核药物治疗前后结核分枝杆菌(MTB)的毒力变化情况。方法收集2014--2015年入选“武汉市初治涂阳肺结核免费隔离治疗项目”的患者中初治涂阳肺结核且经抗结核治疗2周后痰涂片仍未转阴者(未转阴组)治... 目的分析初治涂阳肺结核患者经抗结核药物治疗前后结核分枝杆菌(MTB)的毒力变化情况。方法收集2014--2015年入选“武汉市初治涂阳肺结核免费隔离治疗项目”的患者中初治涂阳肺结核且经抗结核治疗2周后痰涂片仍未转阴者(未转阴组)治疗前、治疗1周后及治疗2周后分离的MTB(15株);初治涂阳肺结核经抗结核药物治疗后2周内痰涂片转阴患者(转阴组)治疗前分离的MTB(4株);耐多药结核病患者(对照组)治疗前分离的MTB(1株)。将上述不同类别患者不同时间点痰培养分离的MTB菌株于体外分别感染巨噬细胞3h和96h后,应用流式细胞术检测巨噬细胞早期凋亡水平,同时计数菌落数量,分析其变化情况。结果未转阴组治疗前、治疗1周后、治疗2周后分离的MTB菌株感染巨噬细胞3h后,诱导巨噬细胞早期凋亡率分别为(2.95±1.13)%、(4.21±1.92)%、(3.73±1.36)%,差异无统计学意义(F=3.38,P=0.086);感染巨噬细胞96h后,诱导巨噬细胞早期凋亡率分别为(4.25±0.48)oA、(5.69±2.03)%、(5.06±1.25)%,差异无统计学意义(F=1.69,P=0.245)。未转阴组、转阴组及对照组患者治疗前痰培养分离的MTB菌株感染巨噬细胞3h后诱导巨噬细胞早期凋亡率分别为(2.95±1.13)%、(4.05±1.87)%、(4.38±0.29)%,差异无统计学意义(F=1.94,P=0.380);感染巨噬细胞96h后,诱导巨噬细胞早期凋亡率分别为(4.25±0.48)%、(4.11±0.26)oA、(5.39±0.24)%,差异有统计学意义(F=11.97,P=0.003)。各组不同治疗时间所分离的MTB菌株感染巨噬细胞后菌落数量差异无统计学意义。结论初治涂阳肺结核经抗结核治疗后2周痰涂片仍未转阴患者所携带的MTB菌株毒力在治疗前后没有变化。 展开更多
关键词 结核 分枝杆菌 结核 毒力 评价研究
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