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抗人ASGPR大亚基异构体蛋白H1b多克隆抗体的制备和鉴定
被引量：
3
1
作者
刘嘉
丁红晖
+5 位作者
杨燕
胡斌
余源
黄红平
陆蒙吉
杨东亮
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第10期917-919,共3页
目的:制备小鼠抗人ASGPR大亚基异构体蛋白H1b的多克隆抗体,并鉴定其特异性。方法:合成H1b特异性多肽,以匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏小鼠,制备小鼠抗人H1b蛋白的多克隆抗体;ELISA法检测抗体效价,通过Western blot...
目的:制备小鼠抗人ASGPR大亚基异构体蛋白H1b的多克隆抗体,并鉴定其特异性。方法:合成H1b特异性多肽,以匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏小鼠,制备小鼠抗人H1b蛋白的多克隆抗体;ELISA法检测抗体效价,通过Western blot和免疫组织化学检测,鉴定抗体的特异性与适用范围。结果:得到小鼠抗人H1b蛋白的多克隆抗体,效价达1∶105。纯化后的抗体用于Western blot可高特异性识别真核表达的H1b蛋白,并可用于免疫组织化学实验。结论:成功制备小鼠抗人H1b蛋白的多克隆抗体,该抗体具有较高的效价以及特异性,能区分ASG-PR大亚基的两种剪接异构体,从而为进一步研究H1b蛋白的生理功能及其在人类疾病中的意义提供了有利工具。
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关键词
去唾液酸糖蛋白受体
多克隆抗体
剪接异构体
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职称材料
幽门螺杆菌对食管癌细胞凋亡及表达COXⅡ、Bax、Caspase-3的影响
被引量：
3
2
作者
周密
谭俊
叶嗣颖
《中华中医药学刊》
CAS
2014年第2期378-381,共4页
目的:观察幽门螺杆菌(H.pylori,HP)作用于食管癌细胞(ECa-109)后细胞凋亡的情况以及细胞色素氧化酶Ⅱ(cytochrome oxidaseⅡ,COXⅡ)、Bax、Caspase-3 mRNA及其蛋白表达的变化,探讨H.pylori致癌的分子机制。方法:将H.pylori与ECa-109分...
目的:观察幽门螺杆菌(H.pylori,HP)作用于食管癌细胞(ECa-109)后细胞凋亡的情况以及细胞色素氧化酶Ⅱ(cytochrome oxidaseⅡ,COXⅡ)、Bax、Caspase-3 mRNA及其蛋白表达的变化,探讨H.pylori致癌的分子机制。方法:将H.pylori与ECa-109分别作用4、8、24 h,收集各组细胞,流式细胞术(FACS)检测凋亡情况;Real-Time PCR和Western blot法检测各时间点COXⅡ、Bax、Caspase-3 mRNA及其蛋白表达。结果:随着共培养时间的延长,COXⅡmRNA和蛋白的表达逐渐下降,而Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白的表达逐渐上升,ECa-109凋亡增加。结论:H.pylori可抑制食管癌细胞线粒体编码基因COXⅡmRNA的表达,从而影响线粒体功能;H.pylori在体外可通过线粒体途径上调Bax、Caspase-3表达,从而诱导ECa-109凋亡。
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关键词
幽门螺杆菌
食管癌上皮细胞
线粒体
细胞色素氧化酶Ⅱ
凋亡
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职称材料
银杏叶提取物对大鼠局灶性脑缺血后梗死体积和Bcl-2,Caspase-3表达的影响
被引量：
9
3
作者
姚晓璐
黄义久
姚炜
《实用医学杂志》
CAS
2005年第23期2616-2618,共3页
目的:探讨银杏叶提取物(ginkgobilobaextract,GBE)对脑缺血后梗死体积及神经元凋亡相关蛋白Bcl-2,Caspase-3表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为缺血对照组、小剂量GBE治疗组(小剂量组)、大剂量GBE治疗组(大剂量组)。采用大鼠大脑中动脉...
目的:探讨银杏叶提取物(ginkgobilobaextract,GBE)对脑缺血后梗死体积及神经元凋亡相关蛋白Bcl-2,Caspase-3表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为缺血对照组、小剂量GBE治疗组(小剂量组)、大剂量GBE治疗组(大剂量组)。采用大鼠大脑中动脉栓塞模型,应用光镜、TTC染色、免疫组织化学染色及TUNEL染色检测方法,在不同时间点观察各组大鼠脑梗死体积的变化以及Bcl-2,Caspase-3阳性细胞表达的不同和神经细胞凋亡的情况。结果:在不同时间点各给药组大鼠的脑梗死体积小于缺血对照组,差异有显著性(P<0.01);大剂量组脑梗死体积与小剂量组脑梗死体积相比差异亦有统计学意义(P<0.05)。各给药组大鼠Bcl-2阳性细胞表达数目均高于缺血对照组,而Caspase-3阳性细胞表达数目则低于缺血对照组(P<0.01);大剂量组阳性细胞表达数目与小剂量组阳性细胞表达数目相比差异亦有显著性(P<0.05)。结论:银杏叶提取物可减少脑梗死体积,在脑缺血损伤急性期可增加Bcl-2的表达而减少Caspase-3的表达。
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关键词
银杏素
细胞凋亡
原癌基因蛋白质C-BCL-2
半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
再灌注损伤
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职称材料
题名
抗人ASGPR大亚基异构体蛋白H1b多克隆抗体的制备和鉴定
被引量：
3
1
作者
刘嘉
丁红晖
杨燕
胡斌
余源
黄红平
陆蒙吉
杨东亮
机构
华中科技大学同济医学院
附属
同济
医院临床免疫研究室
华中科技大学同济医学院
附属
同济
医院实验
医学
研究中心
华中科技大学同济医学院微生物教研室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第10期917-919,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(30571646)
国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2006AA02Z128)
文摘
目的:制备小鼠抗人ASGPR大亚基异构体蛋白H1b的多克隆抗体,并鉴定其特异性。方法:合成H1b特异性多肽,以匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏小鼠,制备小鼠抗人H1b蛋白的多克隆抗体;ELISA法检测抗体效价,通过Western blot和免疫组织化学检测,鉴定抗体的特异性与适用范围。结果:得到小鼠抗人H1b蛋白的多克隆抗体,效价达1∶105。纯化后的抗体用于Western blot可高特异性识别真核表达的H1b蛋白,并可用于免疫组织化学实验。结论:成功制备小鼠抗人H1b蛋白的多克隆抗体,该抗体具有较高的效价以及特异性,能区分ASG-PR大亚基的两种剪接异构体,从而为进一步研究H1b蛋白的生理功能及其在人类疾病中的意义提供了有利工具。
关键词
去唾液酸糖蛋白受体
多克隆抗体
剪接异构体
Keywords
ASGPR
polyclonal antibody
splice variant
分类号
R392.33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
幽门螺杆菌对食管癌细胞凋亡及表达COXⅡ、Bax、Caspase-3的影响
被引量：
3
2
作者
周密
谭俊
叶嗣颖
机构
宁波
大学
医学院
微免
教研室
宁波市第二医院感染科
华中科技大学同济医学院微生物教研室
出处
《中华中医药学刊》
CAS
2014年第2期378-381,共4页
基金
宁波市自然基金项目(2008A610083)
文摘
目的:观察幽门螺杆菌(H.pylori,HP)作用于食管癌细胞(ECa-109)后细胞凋亡的情况以及细胞色素氧化酶Ⅱ(cytochrome oxidaseⅡ,COXⅡ)、Bax、Caspase-3 mRNA及其蛋白表达的变化,探讨H.pylori致癌的分子机制。方法:将H.pylori与ECa-109分别作用4、8、24 h,收集各组细胞,流式细胞术(FACS)检测凋亡情况;Real-Time PCR和Western blot法检测各时间点COXⅡ、Bax、Caspase-3 mRNA及其蛋白表达。结果:随着共培养时间的延长,COXⅡmRNA和蛋白的表达逐渐下降,而Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白的表达逐渐上升,ECa-109凋亡增加。结论:H.pylori可抑制食管癌细胞线粒体编码基因COXⅡmRNA的表达,从而影响线粒体功能;H.pylori在体外可通过线粒体途径上调Bax、Caspase-3表达,从而诱导ECa-109凋亡。
关键词
幽门螺杆菌
食管癌上皮细胞
线粒体
细胞色素氧化酶Ⅱ
凋亡
Keywords
Helicobacter pylori
esophageal carcinoma cell
mitochondria
COX Ⅱ
apoptosis
分类号
R322.43 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
银杏叶提取物对大鼠局灶性脑缺血后梗死体积和Bcl-2,Caspase-3表达的影响
被引量：
9
3
作者
姚晓璐
黄义久
姚炜
机构
武汉市第一医院急诊科
华中科技大学同济医学院微生物教研室
出处
《实用医学杂志》
CAS
2005年第23期2616-2618,共3页
文摘
目的:探讨银杏叶提取物(ginkgobilobaextract,GBE)对脑缺血后梗死体积及神经元凋亡相关蛋白Bcl-2,Caspase-3表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为缺血对照组、小剂量GBE治疗组(小剂量组)、大剂量GBE治疗组(大剂量组)。采用大鼠大脑中动脉栓塞模型,应用光镜、TTC染色、免疫组织化学染色及TUNEL染色检测方法,在不同时间点观察各组大鼠脑梗死体积的变化以及Bcl-2,Caspase-3阳性细胞表达的不同和神经细胞凋亡的情况。结果:在不同时间点各给药组大鼠的脑梗死体积小于缺血对照组,差异有显著性(P<0.01);大剂量组脑梗死体积与小剂量组脑梗死体积相比差异亦有统计学意义(P<0.05)。各给药组大鼠Bcl-2阳性细胞表达数目均高于缺血对照组,而Caspase-3阳性细胞表达数目则低于缺血对照组(P<0.01);大剂量组阳性细胞表达数目与小剂量组阳性细胞表达数目相比差异亦有显著性(P<0.05)。结论:银杏叶提取物可减少脑梗死体积,在脑缺血损伤急性期可增加Bcl-2的表达而减少Caspase-3的表达。
关键词
银杏素
细胞凋亡
原癌基因蛋白质C-BCL-2
半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
再灌注损伤
Keywords
Ginkgetin
Apoptosis
Proto-oncogene proteins c-bcl-2
Caspases
Reperfusion injury
分类号
R285 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
作者
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被引量
操作
1
抗人ASGPR大亚基异构体蛋白H1b多克隆抗体的制备和鉴定
刘嘉
丁红晖
杨燕
胡斌
余源
黄红平
陆蒙吉
杨东亮
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
3
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职称材料
2
幽门螺杆菌对食管癌细胞凋亡及表达COXⅡ、Bax、Caspase-3的影响
周密
谭俊
叶嗣颖
《中华中医药学刊》
CAS
2014
3
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职称材料
3
银杏叶提取物对大鼠局灶性脑缺血后梗死体积和Bcl-2,Caspase-3表达的影响
姚晓璐
黄义久
姚炜
《实用医学杂志》
CAS
2005
9
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