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Pirh2 shRNA增强肺腺癌细胞A549对顺铂敏感性的研究
1
作者
苏远
朱莉萍
+3 位作者
金阳
张晓菊
周琼
白明
《华中科技大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第2期170-173,177,共5页
目的观察短发夹状RNA沉默泛素连接酶pirh2(P53 induced RING-H2 protein)基因表达后,肺腺癌细胞A549对顺铂敏感性及肺耐药蛋白(lung resistance-related protein,LRP)表达的变化。方法构建靶向pirh2基因的短发夹状RNA(psiRNA-Pirh2)及...
目的观察短发夹状RNA沉默泛素连接酶pirh2(P53 induced RING-H2 protein)基因表达后,肺腺癌细胞A549对顺铂敏感性及肺耐药蛋白(lung resistance-related protein,LRP)表达的变化。方法构建靶向pirh2基因的短发夹状RNA(psiRNA-Pirh2)及阴性对照RNA(psiRNA-Con),并转染A549细胞,实时定量PCR和免疫印迹法检测A549细胞中pirh2基因和蛋白的表达变化。设立顺铂组(5μg/ml)、psiRNA-Pirh2转染组和顺铂(5μg/ml)+psiRNA-Pirh2组,CCK-8法检测A549细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,免疫印迹法检测肺耐药蛋白的表达,以正常A549细胞为对照。结果psiRNA-Pirh2特异性抑制了A549细胞pirh2 mRNA和蛋白质的表达(均P<0.05)。顺铂及psiRNA-Pirh2组A549细胞增殖能力分别为正常对照组的(46.82±6.14)%和(37.45±6.83)%,均P<0.05,但均高于二者联合组[(28.24±6.49)%],且联合组细胞凋亡率最高,达(19.8±5.1)%,S期细胞最少,为(15.5±1.6)%(P<0.05)。顺铂处理组A549细胞LRP表达较正常对照组增强(P<0.05),但联用psiRNA-Pirh2后,LRP蛋白水平有所下降(P<0.05)。结论靶向pirh2的shRNA可特异性降低A549细胞中pirh2的表达,抑制A549细胞增殖,使其阻滞在G2/M期,诱导凋亡,下调肺耐药蛋白的表达并增强其对顺铂的化疗敏感性。
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关键词
RNA干涉
PIRH2
泛素
肺肿瘤
顺铂
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职称材料
题名
Pirh2 shRNA增强肺腺癌细胞A549对顺铂敏感性的研究
1
作者
苏远
朱莉萍
金阳
张晓菊
周琼
白明
机构
华中科技大学同济医学院
附属协和医院
呼吸
科
华中科技大学同济医学院基础医学院卫生部呼吸系疾病重点实验室
出处
《华中科技大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第2期170-173,177,共5页
文摘
目的观察短发夹状RNA沉默泛素连接酶pirh2(P53 induced RING-H2 protein)基因表达后,肺腺癌细胞A549对顺铂敏感性及肺耐药蛋白(lung resistance-related protein,LRP)表达的变化。方法构建靶向pirh2基因的短发夹状RNA(psiRNA-Pirh2)及阴性对照RNA(psiRNA-Con),并转染A549细胞,实时定量PCR和免疫印迹法检测A549细胞中pirh2基因和蛋白的表达变化。设立顺铂组(5μg/ml)、psiRNA-Pirh2转染组和顺铂(5μg/ml)+psiRNA-Pirh2组,CCK-8法检测A549细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,免疫印迹法检测肺耐药蛋白的表达,以正常A549细胞为对照。结果psiRNA-Pirh2特异性抑制了A549细胞pirh2 mRNA和蛋白质的表达(均P<0.05)。顺铂及psiRNA-Pirh2组A549细胞增殖能力分别为正常对照组的(46.82±6.14)%和(37.45±6.83)%,均P<0.05,但均高于二者联合组[(28.24±6.49)%],且联合组细胞凋亡率最高,达(19.8±5.1)%,S期细胞最少,为(15.5±1.6)%(P<0.05)。顺铂处理组A549细胞LRP表达较正常对照组增强(P<0.05),但联用psiRNA-Pirh2后,LRP蛋白水平有所下降(P<0.05)。结论靶向pirh2的shRNA可特异性降低A549细胞中pirh2的表达,抑制A549细胞增殖,使其阻滞在G2/M期,诱导凋亡,下调肺耐药蛋白的表达并增强其对顺铂的化疗敏感性。
关键词
RNA干涉
PIRH2
泛素
肺肿瘤
顺铂
Keywords
RNA interference
Pirh2
ubiquitin
lung neoplasm
cisplatin
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
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1
Pirh2 shRNA增强肺腺癌细胞A549对顺铂敏感性的研究
苏远
朱莉萍
金阳
张晓菊
周琼
白明
《华中科技大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2008
0
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