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鸡贫血病毒vp3基因的克隆及其体外凋亡诱导效应的研究 被引量:4
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作者 王宇哲 申志发 +2 位作者 田俊 宗义强 屈伸 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期300-303,共4页
用 PCR方法扩增了鸡贫血病毒标准株的 vp3基因 ,并将其克隆于真核表达载体 pc DNA3上 ,构建了重组体pc DNA- vp3。经酶切鉴定及测序分析表明 ,该片段和预期相符。在体外利用 L ipofect AMINETM介导的基因转染 ,将 pc D-NA- vp3、 pc DNA... 用 PCR方法扩增了鸡贫血病毒标准株的 vp3基因 ,并将其克隆于真核表达载体 pc DNA3上 ,构建了重组体pc DNA- vp3。经酶切鉴定及测序分析表明 ,该片段和预期相符。在体外利用 L ipofect AMINETM介导的基因转染 ,将 pc D-NA- vp3、 pc DNA3分别转入肝癌细胞系 Hep G2和二倍体肝细胞系 L- 0 2中 ,转染后的 RT- PCR结果证实 vp3基因在细胞中得到了表达。同时利用筛选稳定表达细胞株的技术和原位细胞凋亡检测法 ,证明了鸡贫血病毒是以凋亡的方式诱导细胞死亡 ,并且只诱导癌细胞的凋亡 ,而不诱导正常或二倍体细胞死亡。表明鸡贫血病毒 展开更多
关键词 鸡盆血病毒 基因克隆 细胞凋亡 VP3基因 体外凋亡 诱导效应
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家兔极低密度脂蛋白受体的组织分布研究 被引量:2
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作者 过健俐 郭伟 +2 位作者 姜立 张莉 屈伸 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期413-415,共3页
极低密度脂蛋白受体 ( VL DL R)在介导甘油三酯代谢的过程中起重要作用。目前已经知道 ,VL DL R分为两种类型 :其一带有 O-连结的糖链区 ( 型 ) ,另一种则不带有该区域 ( 型 )。采用 RT- PCR技术获得家兔 VL DL 受体的 c DNA,PCR扩增... 极低密度脂蛋白受体 ( VL DL R)在介导甘油三酯代谢的过程中起重要作用。目前已经知道 ,VL DL R分为两种类型 :其一带有 O-连结的糖链区 ( 型 ) ,另一种则不带有该区域 ( 型 )。采用 RT- PCR技术获得家兔 VL DL 受体的 c DNA,PCR扩增后经电泳鉴定显示 :在选取的全部六种组织中均有 型受体分布 ,并且在脂肪、肝脏、脾脏三种组织中还同时伴有 型受体的分布。该结果支持受体与组织能量代谢密切相关这一观点 ,并提示 型受体可能具有除参与脂代谢之外的其它不为人知的重要功能。 展开更多
关键词 极低密度脂蛋白受体 逆转录PCR 组织分布 聚合酶链反应 动脉粥样硬化
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哌啶衍生物的合成及其灭钉螺效果的研究
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作者 黄晓江 郑智 李桂玲 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期291-293,共3页
目的 设计哌啶衍生物乙酸 β 哌啶乙酯和十二酸 β 哌啶乙酯的合成路线并研究其灭钉螺效果。 方法 以哌啶环为母体通过酯化反应引入不同的酰基合成哌啶衍生物 ,采用完全浸泡法研究合成产物的灭钉螺效果。结果 在不同浓度下乙酸 β... 目的 设计哌啶衍生物乙酸 β 哌啶乙酯和十二酸 β 哌啶乙酯的合成路线并研究其灭钉螺效果。 方法 以哌啶环为母体通过酯化反应引入不同的酰基合成哌啶衍生物 ,采用完全浸泡法研究合成产物的灭钉螺效果。结果 在不同浓度下乙酸 β 哌啶乙酯和十二酸 β 哌啶乙酯的 2 4h灭螺率与氯硝柳胺相当 ,而前两者对螺体的刺激小 ,钉螺的 2 4h开厣率高于氯硝柳胺 (P <0 0 5 )。结论 乙酸 β 哌啶乙酯和十二酸 β 哌啶乙酯有一定的灭螺作用 ,而且有利于钉螺开厣。 展开更多
关键词 钉螺 哌啶衍生物 乙酸-β-哌啶乙酯 十二酸-β-哌啶乙酯
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实时荧光PCR检测癌基因MDM_2在急性白血病中的表达 被引量:3
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作者 付康 吴蒙 +3 位作者 吴健民 周志明 夏淑贞 吕文利 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期405-408,共4页
目的 应用实时荧光PCR技术 ,检测癌基因MDM2 在急性粒细胞白血病 (AML)中的表达并分析其与AML发生、分型及疗效的关系。方法 以SybrGreenⅠ为荧光指示剂 ,β actin作内参照 ,建立检测MDM2 mRNA表达的实时荧光PCR反应体系。PCR反应完... 目的 应用实时荧光PCR技术 ,检测癌基因MDM2 在急性粒细胞白血病 (AML)中的表达并分析其与AML发生、分型及疗效的关系。方法 以SybrGreenⅠ为荧光指示剂 ,β actin作内参照 ,建立检测MDM2 mRNA表达的实时荧光PCR反应体系。PCR反应完毕作熔解曲线分析。分析MDM2 mRNA的表达与AML的发病、FAB分型及疗效的关系。结果 ①通过对实验参数的优化 ,适宜的反应条件为退火温度 5 1℃ ,Mg2 + 浓度 3mmol/L ,牛血清白蛋白 (BSA)浓度 0 1mg/ml,循环次数 4 5次。批内、批间变异系数分别为 8 81%和 15 39%。②AML组MDM2 mRNA的表达明显高于正常对照组 (P <0 0 1) ;AML各亚型M1、M2 与M3 组MDM2 mRNA表达量组间差异无显著性意义(P >0 0 5 ) ;完全缓解组、部分缓解组、未缓解组 3组之间MDM2 mRNA表达差异有显著性意义 (P <0 0 1) ,且呈逐渐上升趋势。结论 采用SybrGreenⅠ的Lightcycler实时荧光PCR方法检测MDM2 mRNA快速、简便、稳定性好。MDM2 mRNA的表达与AML的发生及临床疗效有重要关系。 展开更多
关键词 实时荧光 PCR检测 癌基因 MDM2 急性白血病 基因表达 急性粒细胞性
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用氢电子受体氯化碘硝基四唑测定皮肤组织活力 被引量:2
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作者 陈苗 刘莉 +5 位作者 韩娜 吴泳 李义勇 林志红 夏淑珍 王方明 《同济医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第4期310-312,共3页
对氢化碘硝基四唑 (INT)用于大鼠及人体皮肤组织活力测定的可行性及方法学进行了研究。分组测定了不同 INT浓度、 EDTA浓度、浸出剂、浸出时间对检测结果的影响 ,对反应条件进行了优化。证实本法可在有氧条件下 ,反应与浸出同时进行 ,... 对氢化碘硝基四唑 (INT)用于大鼠及人体皮肤组织活力测定的可行性及方法学进行了研究。分组测定了不同 INT浓度、 EDTA浓度、浸出剂、浸出时间对检测结果的影响 ,对反应条件进行了优化。证实本法可在有氧条件下 ,反应与浸出同时进行 ,操作简便 ,时间较短 ,灵敏度较高 ,所需皮片量少 。 展开更多
关键词 皮肤组织活力 INT测定法 氢化碘硝基四唑
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