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虾青素通过抗氧化作用缓解奥沙利铂诱发的神经病理性痛
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作者 陈冲 田俊杰 +6 位作者 周瓒 高瑞娟 唐雪纯 高逸璇 马克涛 李丽 司军强 《西安交通大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第4期606-615,共10页
目的探讨虾青素(astaxanthin,AST)通过抗氧化途径减轻奥沙利铂(oxaliplatin,OXA)诱发的神经病理性疼痛(oxaliplatin-induced neuropathic pain,OINP)的作用机制,为临床干预提供理论依据。方法动物实验:SD大鼠分为5组(n=6),Control组、OX... 目的探讨虾青素(astaxanthin,AST)通过抗氧化途径减轻奥沙利铂(oxaliplatin,OXA)诱发的神经病理性疼痛(oxaliplatin-induced neuropathic pain,OINP)的作用机制,为临床干预提供理论依据。方法动物实验:SD大鼠分为5组(n=6),Control组、OXA组(4 mg/kg)、OXA+橄榄油(Oil)组、OXA+AST(5 mg/kg)组、OXA+AST(10 mg/kg)组。对各组大鼠在不同时间点(0、7、14、21 d)进行机械痛、冷痛行为学检测;TBA法、WST-1法分别检测DRG组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;Western blotting技术检测Nrf2、HO-1的表达情况。细胞实验:Neuro-2a细胞系分为Control组和OXA(50μmol/L)组、AST(10μmol/L)组、OXA(50μmol/L)+AST(10μmol/L)组;予以神经生长因子(nerve growth factor,NGF)50 ng/mL诱导细胞生长,倒置显微镜下观察各组细胞形态学变化;DCFH-DA荧光探针、Mito SOXTM-red检测neuro-2a细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量及线粒体超氧化物的影响;JC-1检测neuro-2a细胞线粒体功能;Western blotting技术检测抗氧化相关蛋白(Nrf2、HO-1)。结果动物实验:①OXA组、OXA+Oil组机械痛、冷痛阈值降低(P<0.05);而AST能够提高OXA模型大鼠机械痛、冷痛阈值(P<0.05)。②TBA法、WST-1法、比色法结果显示OXA模型组大鼠背神经节组织SOD活性降低、MDA含量增加;AST可以提高SOD活性,降低MDA含量(P<0.05,P<0.01)。③Western blotting结果显示,OXA组Nrf2、HO-1表达升高(P>0.05);AST干预后Nrf2、HO-1的表达明显增加(P<0.05,P<0.01)。细胞实验:①NGF处理细胞,暴露于OXA后,倒置显微镜下观察具有神经突触的细胞数量减少,平均突触长度变短(P<0.05);予以AST干预后具有神经突触的细胞数量增加,平均神经突触长度增加(P<0.01,P<0.001)。②DCFH-DA荧光探针和Mito SOX TM-red结果显示,OXA组细胞内及线粒体内ROS荧光强度增加;AST干预后可降低细胞内及线粒体内ROS荧光强度(P<0.05,P<0.01);③JC-1结果显示,OXA组细胞线粒体膜电位下降(P<0.01);AST可减少OXA诱导的细胞线粒体膜电位的丧失(P<0.05);④Western blotting结果显示,OXA组抗氧化相关蛋白Nrf2、HO-1表达升高(P<0.05,P<0.01),AST可明显上调Nrf2、HO-1表达(P<0.05,P<0.01)。结论AST可以促进Nrf2、HO-1表达,增强SOD活性,减少脂质过氧化的发生,降低细胞内及线粒体内ROS的产生,改善线粒体功能,增强抗氧化能力,从而减轻奥沙利铂诱发的神经病理性痛。 展开更多
关键词 虾青素(AST) 奥沙利铂(OXA) 神经病理性痛 氧化应激
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血管紧张素Ⅱ上调连接子蛋白43(Cx43)促进人肺动脉平滑肌细胞的增殖和迁移 被引量:6
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作者 贾奇花 黎玲 +4 位作者 宋文杰 曹囡 李丽 马克涛 司军强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期616-621,共6页
目的以人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)为研究对象,探讨连接子蛋白43(Cx43)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的细胞增殖、迁移的影响。方法体外培养的对数生长期HPASMC,分为对照组、AngⅡ处理组、AngⅡ联合二甲基亚砜(DMSO)处理组及AngⅡ联合坎地... 目的以人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)为研究对象,探讨连接子蛋白43(Cx43)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的细胞增殖、迁移的影响。方法体外培养的对数生长期HPASMC,分为对照组、AngⅡ处理组、AngⅡ联合二甲基亚砜(DMSO)处理组及AngⅡ联合坎地沙坦处理组。采用CCK-8法检测HPASMC增殖,TranswellTM小室检测HPASMC的迁移能力,划痕实验检测其迁移能力;Western blot法检测HPASMC的Cx43蛋白及其磷酸化、骨桥蛋白(OPN)、增殖细胞核抗原(PCNA)、SMAD家族成员2(SMAD2)、SMAD3的蛋白水平。结果与对照组相比,AngⅡ处理组OPN、PCNA蛋白表达增加,细胞增殖和迁移能力增强;与AngⅡ处理组相比,AngⅡ联合坎地沙坦处理组细胞的增殖和迁移能力降低。与对照组相比,AngⅡ处理组Cx43蛋白及其磷酸化水平均明显增加,SMAD2、SMAD3的蛋白表达增加,而AngⅡ联合坎地沙坦组各蛋白表达较AngⅡ组均明显降低。结论AngⅡ上调Cx43蛋白的表达促进HPASMC增殖和迁移,可能与激活SMAD2/3信号通路有关。 展开更多
关键词 血管紧张素Ⅱ(AngⅡ) 连接子蛋白43(Cx43) 细胞增殖 细胞迁移 人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)
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吡咯野百合碱诱导的A549细胞激活TGF-β1/SMAD2/SMAD3通路促进人肺动脉平滑肌细胞增殖和迁移 被引量:5
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作者 宋文杰 黎玲 +4 位作者 贾奇花 曹囡 李丽 马克涛 司军强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期527-534,共8页
目的探讨A549细胞对人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)增殖迁移的影响及其机制。方法A549细胞培养组分为对照组、二甲基甲酰胺(DMF)溶剂组、吡咯野百合碱(MCTP)组、MCTP联合转化生长因子β(TGF-β)受体阻断剂苯甲酰胺(SB431542)组。A549细胞和... 目的探讨A549细胞对人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)增殖迁移的影响及其机制。方法A549细胞培养组分为对照组、二甲基甲酰胺(DMF)溶剂组、吡咯野百合碱(MCTP)组、MCTP联合转化生长因子β(TGF-β)受体阻断剂苯甲酰胺(SB431542)组。A549细胞和HPASMC共培养组分为HPASMC对照组、A549细胞与HPASMC共培养组、MCTP刺激A549细胞与HPASMC共培养组、MCTP联合SB431542刺激A549细胞与HPASMC共培养组,IL-6刺激HPASMC阳性对照组。CCK-8法检测A549细胞的增殖活性,ELISA检测A549细胞培养上清液白细胞介素6(IL-6)的水平,反转录PCR检测A549细胞SMAD家族成员2(SMAD2)、SMAD3的mRNA水平,Western blot法检测各组A549细胞TGF-β1、SMAD2、SMAD3、磷酸化的SMAD2(p-SMAD2)、p-SMAD3蛋白水平,各共培养组HPASMC的骨桥蛋白(OPN)、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白水平。Transwell^TM小室和划痕实验检测各共培养组HPASMC的迁移能力。结果在A549细胞培养组中,与对照组相比,经MCTP刺激A549细胞的增殖能力减弱,IL-6分泌量增加,TGF-β1、SMAD2、SMAD3、p-SMAD2、p-SMAD3蛋白表达增加;与单用MCTP组相比,MCTP联合阻断剂SB431542组A549细胞的增殖能力增加,IL-6分泌量减少,TGF-β1、SMAD2、SMAD3、p-SMAD2、p-SMAD3蛋白表达减弱。在共培养体系中,与HPASMC组相比,A549细胞与HPASMC共培养组细胞的迁移变化不明显,PCNA、OPN蛋白表达无明显变化;与HPASMC组相比,经MCTP刺激后的A549细胞和HPASMC共培养组HPASMC细胞迁移能力增加,PCNA、OPN蛋白表达增加;与MCTP刺激后的A549细胞和HPASMC共培养组相比,MCTP联合阻断剂SB431542刺激A549细胞和HPASMC共培养组迁移能力减弱,PCNA、OPN蛋白表达减弱;与HPASMC组相比,IL-6阳性对照组HPASMC细胞迁移能力增加,PCNA、OPN蛋白表达增加。结论MCTP诱导的A549细胞激活HPASMC的TGF-β1/SMAD2/SMAD3通路增加HPASMC的IL-6分泌,促进HPASMC的增殖和迁移。 展开更多
关键词 A549细胞 人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC) 细胞增殖 细胞迁移 白细胞介素6(IL-6) 转化生长因子β1(TGF-β1)
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PAX6抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心脏成纤维细胞转分化 被引量:3
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作者 丛雯雯 冯晔囡 +4 位作者 王帅星 胡国民 肖晗 司军强 张幼怡 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期27-33,共7页
目的:探讨配对盒因子6(PAX6)在血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心脏成纤维细胞(CFs)转分化中的作用及其机制。方法:培养原代成年小鼠CFs,用Ang Ⅱ(10-6mol/L)建立CFs转分化模型,利用小鼠PAX6腺病毒载体感染小鼠CFs;实验分为Ad-GFP+Ctrl组(... 目的:探讨配对盒因子6(PAX6)在血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心脏成纤维细胞(CFs)转分化中的作用及其机制。方法:培养原代成年小鼠CFs,用Ang Ⅱ(10-6mol/L)建立CFs转分化模型,利用小鼠PAX6腺病毒载体感染小鼠CFs;实验分为Ad-GFP+Ctrl组(感染对照腺病毒)、Ad-GFP+Ang Ⅱ组(感染对照腺病毒再给予Ang Ⅱ处理)、Ad-PAX6+Ctrl组(感染过表达PAX6腺病毒)和Ad-PAX6+Ang Ⅱ组(感染过表达PAX6腺病毒再给予Ang Ⅱ处理)。倒置荧光显微镜下观察CFs感染后荧光表达情况;采用Western blot检测CFs中PAX6、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原(Col I)、纤连蛋白(FN)和转化生长因子β1(TGFβ1)的表达;固定细胞免疫荧光技术检测α-SMA、Col I和FN的表达与分布;qPCR检测PAX6和TGFβ1的mRNA表达。结果:(1)倒置荧光显微镜下观察腺病毒载体感染CFs成功,qPCR和Western blot证明CFs中PAX6过表达成功(P<0.01);(2)在Ang Ⅱ作用下,CFs中肌成纤维细胞标志物α-SMA显著升高,而过表达PAX6显著抑制Ang Ⅱ诱导的α-SMA表达(P<0.01);(3)过表达PAX6显著抑制CFs中Ang Ⅱ诱导的细胞外基质蛋白Col I和FN的表达与分泌(P<0.05);(4)在Ang Ⅱ处理后,TGFβ1的mRNA和蛋白表达显著升高,而过表达PAX6显著抑制Ang Ⅱ诱导的CFs中TGFβ1的mRNA和蛋白表达(P<0.05)。结论:PAX6通过抑制TGFβ1的表达从而抑制Ang Ⅱ诱导的CFs转分化及细胞外基质蛋白的表达与分泌。 展开更多
关键词 配对盒因子6 心脏成纤维细胞 血管紧张素Ⅱ 转化生长因子Β1 转分化
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大黄素阻断SMAD2/3信号通路抑制人肺动脉平滑肌细胞增殖和迁移 被引量:1
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作者 曹囡 刘旭东 +4 位作者 唐雪纯 高瑞娟 马克涛 李丽 司军强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期707-713,共7页
目的探讨大黄素对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)增殖、迁移的影响。方法体外培养HPASMC,取对数生长期的细胞,分为对照组、TGF-β1处理组、TGF-β1联合大黄素处理组。采用CCK-8法检测HPASMC活性,Transwell^(... 目的探讨大黄素对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)增殖、迁移的影响。方法体外培养HPASMC,取对数生长期的细胞,分为对照组、TGF-β1处理组、TGF-β1联合大黄素处理组。采用CCK-8法检测HPASMC活性,Transwell^(TM)小室实验和划痕实验检测HPASMC迁移能力;免疫荧光实验检测骨桥蛋白(OPN)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,Western blot法检测HPASMC的OPN、PCNA的蛋白水平及SMAD家族成员2(SMAD2)和SMAD3的磷酸化水平。结果与对照组相比,TGF-β1处理组的OPN、PCNA蛋白表达增加,HPASMC增殖和迁移能力增强,SMAD2、SMAD3的磷酸化增强。与TGF-β1组相比,TGF-β1联合大黄素处理组HPASMC的增殖和迁移能力降低,OPN、PCNA蛋白表达减少,SMAD2、SMAD3蛋白磷酸化明显降低。结论大黄素可抑制HPASMC中TGF-β1上调OPN、PCNA蛋白的表达,抑制TGF-β1诱导的PASMC增殖和迁移,可能与抑制SMAD2/3信号通路有关。 展开更多
关键词 大黄素 细胞增殖 细胞迁移 人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)
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辣椒素抑制自发性高血压大鼠脑基底动脉平滑肌细胞的增殖和迁移
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作者 唐雪纯 刘旭东 +6 位作者 高瑞娟 曹囡 张景荣 孔良靖元 马克涛 李丽 司军强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期807-812,共6页
目的研究辣椒素(CAP)是否可以改善自发性高血压大鼠(SHR)脑基底动脉平滑肌细胞(BASMC)的增殖迁移。方法体外培养SHR及Wistar京都(WKY)大鼠原代BASMC,随机均分为对照组(WKY组)、SHR组、CAP处理的SHR组。通过CCK-8法选取CAP处理浓度;Trans... 目的研究辣椒素(CAP)是否可以改善自发性高血压大鼠(SHR)脑基底动脉平滑肌细胞(BASMC)的增殖迁移。方法体外培养SHR及Wistar京都(WKY)大鼠原代BASMC,随机均分为对照组(WKY组)、SHR组、CAP处理的SHR组。通过CCK-8法选取CAP处理浓度;Transwell^(TM)小室实验和划痕实验检测各组BASMC的迁移能力;免疫荧光细胞化学染色检测BASMC中的骨桥蛋白(OPN)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达和分布;Western blot法检测BASMC的OPN、PCNA蛋白水平。结果与WKY组相比,SHR组BASMC增殖和迁移能力增强,经CAP处理后,细胞增殖和迁移能力降低;OPN表达在BASMC胞质和胞核,PCNA主要表达在胞核,与WKY组相比,SHR组OPN、PCNA表达及蛋白水平增强,经CAP处理后,其OPN、PCNA表达及蛋白水平明显降低。结论CAP可降低SHR来源的BASMC的增殖和迁移。 展开更多
关键词 辣椒素(CAP) 细胞增殖 细胞迁移 脑基底动脉平滑肌细胞(BASMC)
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