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Toll样受体在U937细胞的表达及其作用研究被引量：11: 1; 作者熊芳王兴兵 +5 位作者张佳华刘伟孙思刘黎琼王萍黄士昂《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第3期449-453,共5页; 本研究探讨急性髓系白血病的免疫治疗中以Toll样受体(TLRs)为靶点的可能性,研究人急性髓系白血病U937细胞TLR的表达及TLR8受体激动剂ssRNA40/LyoVec对其增殖、凋亡和细胞周期的影响。运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测U937细胞TLR1-9... 展开更多; 关键词 TOLL样受体 TLR8激动剂 U937细胞 ssRNA40/LyoVec; 在线阅读下载PDF 职称材料

慢性髓系白血病患者CD34^+ CD38^-细胞水平JunB和CDH13基因启动子区域的甲基化状态研究被引量：3: 2; 作者王晓娟李娟 +3 位作者傅冰洁郭林林张佳华黄士昂《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第6期1405-1408,共4页; 慢性髓系白血病(CML)是骨髓造血干细胞恶性增殖的克隆性疾病,在CML患者细胞水平由于JunB和CDH13基因启动子区甲基化而使这2个抑癌基因的表达受损。为了探讨正常人和CML患者CD34+ CD38-细胞水平JunB和CDH13(cadhe rin-13)基因启动子区域... 展开更多; 关键词 JUNB CDH13 DNA甲基化慢性髓系白血病 CD34^+CD38^-细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

EGFP标记的hVEGF_(165)重组腺病毒构建新方法及其相关特性的体外研究被引量：4: 3; 作者仲照东邹萍 +3 位作者黄士昂胡中波刘凌波卢运萍《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第3期238-242,共5页; 利用细菌内同源重组法快速构建增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)标记的人血管内皮细胞生长因子 16 5(hVEGF165)重组腺病毒载体 ,并对其相关特性进行体外研究。首先将hVEGF165cDNA亚克隆到含EGFP基因的腺病毒穿梭质粒 pAdTrack CMV中 ,然后与... 展开更多; 关键词绿色荧光蛋白血管内皮细胞生长因子重组腺病毒造血细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

WISp39基因对U937细胞增殖、凋亡和周期的影响: 4; 作者李玥莹刘黎琼 +5 位作者杨晶刘伟陈祥俊李小青杜雯黄士昂《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期733-737,共5页; 为了探讨一种新发现的p21调控蛋白WISp39对白血病细胞的增殖、凋亡和周期的影响,构建了WISp39的真核表达质粒pLenti6/V5-WISp39,并导入了人髓系白血病细胞系U937细胞,转染后用定量PCR检测了WISp39表达的变化,用CCK-8法测定细胞增殖活性... 展开更多; 关键词 WISp39 P21CIP1/WAF1 U937细胞细胞增殖细胞周期; 在线阅读下载PDF 职称材料

实时定量PCR技术与短时培养法检测尿样本HCMV的比较被引量：3: 5; 作者向稚丹方峰 +3 位作者甄宏徐翼刘隽聂兴草《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期434-436,443,共4页; 目的建立实时定量PCR系统定量检测尿样本中HCMV并与短时培养快速诊断半定量法比较。方法根据HCMVul123基因保守区设计特异性引物和taqman探针,以GAPDH为内参照校准所检测样本的细胞数,建立实时定量PCR检测系统,定量检测132份尿标本中HCM... 展开更多; 关键词实时定量PCR 短时培养法人巨细胞病毒尿样本; 在线阅读下载PDF 职称材料

腺病毒介导的hVEGF_(165)基因转移促进小鼠骨髓移植后造血重建: 6; 作者仲照东游泳 +3 位作者刘凌波邹萍陈智超黄士昂《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期669-672,共4页; 本研究探讨内皮细胞生长因子对骨髓移植小鼠造血重建的影响。重组腺病毒AdEGFP/hVEGF165经尾静脉注射给同基因骨髓移植BALB/c小鼠;在移植后10、20和30天时检测hVEGF165在小鼠体内的表达,同时测定外周血白细胞、血小板、红细胞计数和骨... 展开更多; 关键词血管内皮细胞生长因子重组腺病毒基因转移骨髓移植造血恢复; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Toll样受体在U937细胞的表达及其作用研究被引量：11: 1; 作者熊芳王兴兵张佳华刘伟孙思刘黎琼王萍黄士昂; 机构华中科技大学同济医学院附属协和医院干细胞研究中心安徽医科大学附属安徽省立医院血液科; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第3期449-453,共5页; 基金国家杰出青年基金资助项目编号30225038; 文摘本研究探讨急性髓系白血病的免疫治疗中以Toll样受体(TLRs)为靶点的可能性,研究人急性髓系白血病U937细胞TLR的表达及TLR8受体激动剂ssRNA40/LyoVec对其增殖、凋亡和细胞周期的影响。运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测U937细胞TLR1-9mRNA的表达,用流式细胞术检测TLR8的表达。用不同浓度的TLR8激动剂ssRNA40/LyoVec作用于体外培养的U937细胞后,采用CCK-8法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。结果表明:U937细胞表达TLR1-9,TLR8激动剂ssRNA40/LyoVec作用于U937细胞明显地抑制了U937细胞生长,抑制率可达70%,且呈明显的量效关系;作用后处于G0/G1期细胞比例由(44.67±1.05)%增高到(54.08±1.19)%,但凋亡细胞的比例无明显变化。结论:TLR1-9可在U937细胞中表达,TLR8激动剂ssRNA40/LyoVec具有抗肿瘤细胞增殖的作用,使细胞阻滞在G0/G1期,但无明显的促凋亡作用。; 关键词 TOLL样受体 TLR8激动剂 U937细胞 ssRNA40/LyoVec; Keywords Toll-like receptor TLR 8 agonist U937 cell ssRNA40/LyoVec; 分类号 R733.71 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名慢性髓系白血病患者CD34^+ CD38^-细胞水平JunB和CDH13基因启动子区域的甲基化状态研究被引量：3: 2; 作者王晓娟李娟傅冰洁郭林林张佳华黄士昂; 机构华中科技大学同济医学院附属协和医院干细胞研究中心; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第6期1405-1408,共4页; 文摘慢性髓系白血病(CML)是骨髓造血干细胞恶性增殖的克隆性疾病,在CML患者细胞水平由于JunB和CDH13基因启动子区甲基化而使这2个抑癌基因的表达受损。为了探讨正常人和CML患者CD34+ CD38-细胞水平JunB和CDH13(cadhe rin-13)基因启动子区域甲基化状态及表达水平的差异,应用流式细胞仪分选出CD34+ CD38-细胞,采用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)检测5例正常人和8例CML患者骨髓CD34+ CD38-细胞JunB和CDH13基因启动子区域甲基化状态,用实时定量PCR(RT-PCR)检测JunB和CDH13基因的表达情况。结果表明:JUNB和CDH13基因在正常人骨髓CD34+ CD38-细胞中呈完全性非甲基化状态,CML患者骨髓CD34+ CD38-细胞中JunB和CDH13基因启动子区甲基化比例分别为87.5%(7/8)和50%(4/8),明显高于正常人(p<0.05)。CML患者骨髓CD34+ CD38-细胞中JunB和CDH13基因mRNA相对表达水平与正常人的相比明显降低(2-??CT分别为1/5.21和1/10.63)。结论:在CML患者骨髓CD34+ CD38-细胞中JunB和CDH13基因启动子区域都发生了高度的甲基化,它们的mRNA表达水平也明显降低,JunB和CDH13基因启动子区域甲基化在CML的发病机制中起到一定的作用,甲基化检测对CML的靶向治疗及新的治疗方法具有重要意义。; 关键词 JUNB CDH13 DNA甲基化慢性髓系白血病 CD34^+CD38^-细胞; Keywords JunB CDH13 DNA methylation CML CD34 ＋ CD38- cell; 分类号 R733.72 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名EGFP标记的hVEGF_(165)重组腺病毒构建新方法及其相关特性的体外研究被引量：4: 3; 作者仲照东邹萍黄士昂胡中波刘凌波卢运萍; 机构华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所华中科技大学同济医学院附属协和医院干细胞研究中心华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科肿瘤治疗中心; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第3期238-242,共5页; 基金海外青年学者合作研究基金资助编号 3 992 80 10; 文摘利用细菌内同源重组法快速构建增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)标记的人血管内皮细胞生长因子 16 5(hVEGF165)重组腺病毒载体 ,并对其相关特性进行体外研究。首先将hVEGF165cDNA亚克隆到含EGFP基因的腺病毒穿梭质粒 pAdTrack CMV中 ,然后与腺病毒骨架质粒pAdEasy 1共同电击转化大肠杆菌BJ5183 ,同源重组获得重组腺病毒质粒 pAd EGFP/hVEGF165,鉴定后通过脂质体法转染HEK2 93细胞 ,产生重组腺病毒Ad EGFP/hVEGF165。通过体外试验观察病毒的形态、均一性和安全性 ,靶细胞的感染效率及hVEGF165的表达情况。结果显示 ,通过细菌内质粒间同源重组法在短期内成功地构建了复制缺陷型重组腺病毒载体Ad EGFP/hVEGF165;借助于EGFP的表达 ,直接在荧光显微镜下观测到靶细胞的感染效率和外源基因的表达。经纯化的病毒颗粒在电镜下成分均一 ,滴度可达 2× 10 12 pfu/ml。病毒感染Hela细胞后经多次传代未见细胞病变。以感染复数 (MOI) =10 0感染hUVEC可获得最大增殖刺激作用。同样浓度感染小鼠骨髓单个核细胞效率达 2 7.3% ,培养上清中hVEGF165蛋白含量达 1385± 332 pg/ 10 6cells。结论 :细菌内同源重组法构建腺病毒载体具有高效、省时、省力的特点 ,辅以EGFP为标记基因可以直观检测靶细胞感染和外源基因的表达情况。; 关键词绿色荧光蛋白血管内皮细胞生长因子重组腺病毒造血细胞; Keywords EGFP VEGF recombinant adenovirus hae matopoietic cell; 分类号 R331.2 [医药卫生—人体生理学] Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名WISp39基因对U937细胞增殖、凋亡和周期的影响: 4; 作者李玥莹刘黎琼杨晶刘伟陈祥俊李小青杜雯黄士昂; 机构华中科技大学同济医学院附属协和医院干细胞研究中心; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期733-737,共5页; 基金国家杰出青年基金资助项目编号30225038; 文摘为了探讨一种新发现的p21调控蛋白WISp39对白血病细胞的增殖、凋亡和周期的影响,构建了WISp39的真核表达质粒pLenti6/V5-WISp39,并导入了人髓系白血病细胞系U937细胞,转染后用定量PCR检测了WISp39表达的变化,用CCK-8法测定细胞增殖活性,流式细胞术(FACS)检测细胞凋亡和周期的变化。结果显示:pLen-ti6/V5-WISp39转染48小时后,实验组中WISp39mRNA表达上升了(5.5±1.2)倍,同时U937细胞的增殖明显受到抑制,抑制率为37.6%;进一步的分析表明,在实验时间内,WISp39表达的升高不能明显诱导U937细胞的凋亡,但G0/G1期细胞比例由(40.59±0.7)%上升到(49.79±1.1)%。结论:WISp39对于U937无明显的诱导凋亡作用,但通过对细胞周期的影响,使停滞在G/G期的细胞增多,从而抑制了U937增殖。; 关键词 WISp39 P21CIP1/WAF1 U937细胞细胞增殖细胞周期; Keywords WISp39 p21CIP1/WAF1 U937 cells proliferation cell cycle; 分类号 R329.28 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名实时定量PCR技术与短时培养法检测尿样本HCMV的比较被引量：3: 5; 作者向稚丹方峰甄宏徐翼刘隽聂兴草; 机构华中科技大学同济医学院同济医院儿科病毒研究室华中科技大学同济医学院协和医院干细胞研究中心; 出处《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期434-436,443,共4页; 文摘目的建立实时定量PCR系统定量检测尿样本中HCMV并与短时培养快速诊断半定量法比较。方法根据HCMVul123基因保守区设计特异性引物和taqman探针,以GAPDH为内参照校准所检测样本的细胞数,建立实时定量PCR检测系统,定量检测132份尿标本中HCMV拷贝数与短时培养结果比较,并同时分析19例接受更昔洛韦治疗前后尿排毒量的变化。结果132份尿标本实时定量PCR结果:短时培养(-)组HCMVDNA为(83±155)拷贝/5×105细胞(n=16例),(+)组为(571±231)拷贝/5×105细胞(n=26例),(++)组为(792±303)拷贝/5×105细胞(n=35例),(+++)组为(1126±416)拷贝/5×105细胞(n=16例),(++++)组为(2201±1043)拷贝/5×105细胞(n=9例);19例38份更昔洛韦治疗前后尿样本中3例治疗前后短时培养结果无改变,而实时定量结果明显改变。结论实时定量PCR法比短时培养法更适于评价抗病毒疗效,而短时培养法判断HCMV是否为活动感染优于实时定量PCR法。; 关键词实时定量PCR 短时培养法人巨细胞病毒尿样本; Keywords real-time PCR rapid culture HCMV urine specimen; 分类号 R446.5 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名腺病毒介导的hVEGF_(165)基因转移促进小鼠骨髓移植后造血重建: 6; 作者仲照东游泳刘凌波邹萍陈智超黄士昂; 机构华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所华中科技大学同济医学院附属协和医院干细胞研究中心; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期669-672,共4页; 基金国家自然基金委海外青年学者研究基金资助项目编号39928010; 文摘本研究探讨内皮细胞生长因子对骨髓移植小鼠造血重建的影响。重组腺病毒AdEGFP/hVEGF165经尾静脉注射给同基因骨髓移植BALB/c小鼠;在移植后10、20和30天时检测hVEGF165在小鼠体内的表达,同时测定外周血白细胞、血小板、红细胞计数和骨髓单个核细胞数;对分离移植后30天的骨髓单个核细胞进行脾集落形成试验。结果显示:重组腺病毒成功介导了hVEGF165在骨髓移植小鼠各脏器和血浆中的长期表达;移植后各时间点,接受hVEGF165治疗组小鼠外周血白细胞、血小板、红细胞计数及骨髓单个核细胞数虽然低于正常对照组,但高于其它实验组(P<0.05);移植后30天时hVEGF165治疗组小鼠骨髓单个核细胞形成的脾集落数(21.4±2.67)恢复正常水平(19.50±2.46)(P>0.05),较其它实验组显著增加(P<0.05)。结论:腺病毒介导的VEGF基因转移具有促进骨髓移植小鼠造血功能重建的作用。; 关键词血管内皮细胞生长因子重组腺病毒基因转移骨髓移植造血恢复; Keywords VEGF recombinant adenovirus gene transfer bone marrow transplantation hematopoietic recovery; 分类号 R331.2 [医药卫生—人体生理学] Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	Toll样受体在U937细胞的表达及其作用研究	熊芳王兴兵张佳华刘伟孙思刘黎琼王萍黄士昂	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2007	11	在线阅读下载PDF 职称材料
2	慢性髓系白血病患者CD34^+ CD38^-细胞水平JunB和CDH13基因启动子区域的甲基化状态研究	王晓娟李娟傅冰洁郭林林张佳华黄士昂	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2009	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	EGFP标记的hVEGF_(165)重组腺病毒构建新方法及其相关特性的体外研究	仲照东邹萍黄士昂胡中波刘凌波卢运萍	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2003	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	WISp39基因对U937细胞增殖、凋亡和周期的影响	李玥莹刘黎琼杨晶刘伟陈祥俊李小青杜雯黄士昂	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	实时定量PCR技术与短时培养法检测尿样本HCMV的比较	向稚丹方峰甄宏徐翼刘隽聂兴草	《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心	2005	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	腺病毒介导的hVEGF_(165)基因转移促进小鼠骨髓移植后造血重建	仲照东游泳刘凌波邹萍陈智超黄士昂	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2005	0	在线阅读下载PDF 职称材料