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靶向siRNA对人子宫颈癌细胞的抑制作用
被引量:
1
1
作者
黄浩
余南才
+4 位作者
江俊
刘倩
马威
郝建军
易艳东
《华中科技大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期16-18,共3页
目的构建增殖细胞核抗原(PCNA)的小发夹结构RNA(shRNA)的真核表达载体并在人HeLa细胞表达,同时观察PCNA shRNA对HeLa细胞体外增殖及生物学特性的影响。方法将PCNA cDNA的shRNA引物插入真核表达载体pGenesil-1,构建真核表达质粒pGenesil-...
目的构建增殖细胞核抗原(PCNA)的小发夹结构RNA(shRNA)的真核表达载体并在人HeLa细胞表达,同时观察PCNA shRNA对HeLa细胞体外增殖及生物学特性的影响。方法将PCNA cDNA的shRNA引物插入真核表达载体pGenesil-1,构建真核表达质粒pGenesil-1-PCNA(1-4),并通过酶切和测序等方法进行鉴定,将真核表达质粒pGenesil-1-PCNA(1-4)转染HeLa细胞,运用Western blot方法检测PCNA蛋白的表达,流式细胞仪分析细胞周期变化。结果PCNA shRNA能显著抑制人HeLa细胞的生长,阻滞细胞于G0/G1期,PCNA的蛋白表达同时受到抑制。结论PCNA shRNA能显著抑制人HeLa细胞的生长,其抑制作用可能通过阻断PCNA蛋白表达实现,实验结果为进一步研究PCNA shRNA对子宫颈癌的基因治疗奠定了基础。
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关键词
子宫颈癌
增殖细胞核抗原
小发夹结构RNA
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职称材料
靶向siRNA下调人结直肠癌Colo320细胞端粒长度与端粒酶逆转录酶基因表达的研究
2
作者
黄浩
李秀
+4 位作者
肖宏
傅雷
余兰才
林世和
易艳东
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2008年第10期1134-1138,共5页
目的:探讨发夹状shRNA封阻原癌基因(c-myc),抑制癌细胞增殖、生长的作用。方法:针对c-myc的构建发夹状shRNA的真核表达质粒,并转染人结直肠癌Colo320细胞。荧光定量RT-PCR检测c-myc及细胞端粒酶逆转录酶的mRNA的表达,Western-blot检测c-...
目的:探讨发夹状shRNA封阻原癌基因(c-myc),抑制癌细胞增殖、生长的作用。方法:针对c-myc的构建发夹状shRNA的真核表达质粒,并转染人结直肠癌Colo320细胞。荧光定量RT-PCR检测c-myc及细胞端粒酶逆转录酶的mRNA的表达,Western-blot检测c-myc、端粒酶逆转录酶(hu-man telomerase reverse transeriptase,hTERT)蛋白表达水平。Southernblot检测端粒的长度,PCR-ELISE法检测端粒酶活性。3H-thymidine实验分析DNA合成和细胞增殖。结果:转染细胞增殖、生长皆受到抑制。同时c-myc和hTERT的mRNA和蛋白表达显著下降,端粒的长度明显缩短,端粒酶活性降低。结论:c-myc的shRNA对人结直肠癌Colo320细胞的生长增殖、端粒长度、端粒酶活性有特异性抑制作用,并呈剂量依赖关系。
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关键词
C-MYC
小发夹结构RNA
增殖
细胞端粒酶逆转录酶
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职称材料
题名
靶向siRNA对人子宫颈癌细胞的抑制作用
被引量:
1
1
作者
黄浩
余南才
江俊
刘倩
马威
郝建军
易艳东
机构
华中科技大学同济医学院
基础
医学院
病原生物学系
武汉市第一医院中心实验室
华中科技大学同济医学院保健科
出处
《华中科技大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期16-18,共3页
文摘
目的构建增殖细胞核抗原(PCNA)的小发夹结构RNA(shRNA)的真核表达载体并在人HeLa细胞表达,同时观察PCNA shRNA对HeLa细胞体外增殖及生物学特性的影响。方法将PCNA cDNA的shRNA引物插入真核表达载体pGenesil-1,构建真核表达质粒pGenesil-1-PCNA(1-4),并通过酶切和测序等方法进行鉴定,将真核表达质粒pGenesil-1-PCNA(1-4)转染HeLa细胞,运用Western blot方法检测PCNA蛋白的表达,流式细胞仪分析细胞周期变化。结果PCNA shRNA能显著抑制人HeLa细胞的生长,阻滞细胞于G0/G1期,PCNA的蛋白表达同时受到抑制。结论PCNA shRNA能显著抑制人HeLa细胞的生长,其抑制作用可能通过阻断PCNA蛋白表达实现,实验结果为进一步研究PCNA shRNA对子宫颈癌的基因治疗奠定了基础。
关键词
子宫颈癌
增殖细胞核抗原
小发夹结构RNA
Keywords
cervical carcinoma
proliferating cellular nuclear antigen
small hairpin RNA
分类号
R737.33 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
靶向siRNA下调人结直肠癌Colo320细胞端粒长度与端粒酶逆转录酶基因表达的研究
2
作者
黄浩
李秀
肖宏
傅雷
余兰才
林世和
易艳东
机构
武汉第一医院实验中心
华中科技大学同济医学院保健科
出处
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2008年第10期1134-1138,共5页
基金
湖北省科技攻关项目(2006AA301B66-3)
文摘
目的:探讨发夹状shRNA封阻原癌基因(c-myc),抑制癌细胞增殖、生长的作用。方法:针对c-myc的构建发夹状shRNA的真核表达质粒,并转染人结直肠癌Colo320细胞。荧光定量RT-PCR检测c-myc及细胞端粒酶逆转录酶的mRNA的表达,Western-blot检测c-myc、端粒酶逆转录酶(hu-man telomerase reverse transeriptase,hTERT)蛋白表达水平。Southernblot检测端粒的长度,PCR-ELISE法检测端粒酶活性。3H-thymidine实验分析DNA合成和细胞增殖。结果:转染细胞增殖、生长皆受到抑制。同时c-myc和hTERT的mRNA和蛋白表达显著下降,端粒的长度明显缩短,端粒酶活性降低。结论:c-myc的shRNA对人结直肠癌Colo320细胞的生长增殖、端粒长度、端粒酶活性有特异性抑制作用,并呈剂量依赖关系。
关键词
C-MYC
小发夹结构RNA
增殖
细胞端粒酶逆转录酶
Keywords
c-myc
small hairpin RNA
proliferation
human telomerase reverse transeriptase
分类号
R735.3 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
靶向siRNA对人子宫颈癌细胞的抑制作用
黄浩
余南才
江俊
刘倩
马威
郝建军
易艳东
《华中科技大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2007
1
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职称材料
2
靶向siRNA下调人结直肠癌Colo320细胞端粒长度与端粒酶逆转录酶基因表达的研究
黄浩
李秀
肖宏
傅雷
余兰才
林世和
易艳东
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2008
0
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引证文献
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