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题名REDD1升高加重脑梗死后血管内皮细胞损伤
被引量:2
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作者
柳双桂
张慧燕
王震华
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机构
华中科技大学协和江南医院(武汉市江夏区第一人民医院)康复医学科
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出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第8期1415-1421,共7页
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基金
湖北省卫生健康委员会课题(No.WJ2019F152)。
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文摘
目的:探讨发育及DNA损伤反应调节蛋白1(REDD1)在脑梗死后血管内皮细胞损伤中的作用。方法:采用RT-qPCR和Westernblot分析氧糖剥夺(OGD)诱导对人脑微血管内皮细胞(HBMECs)中REDD1表达的影响。CCK-8法分析REDD1沉默对OGD诱导的HBMECs损伤影响,采用DCFH-DA染色和肌动蛋白染色分别检测细胞内活性氧(ROS)生成和细胞骨架损伤的情况。在体内实验中,建立大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,分别采用REDD1小干扰RNA(si-REDD1)及其对照siRNA进行转染。在MCAO造模后3 d、7 d和14 d,对大鼠进行mNSS神经功能评分。在MCAO造模后14 d,通过TTC染色测量大鼠脑梗死体积,并采用免疫荧光双染法检测BrdU/NeuN和BrdU/vWF阳性细胞数。结果:经OGD处理后,HBMECs中REDD1的mRNA和蛋白表达上调(P<0.05)。OGD处理诱导细胞骨架损伤,并抑制了细胞活力,而敲减REDD1的表达减弱了OGD的损伤作用。此外,敲减REDD1表达阻止了OGD诱导的细胞内ROS生成。MCAO大鼠神经功能损害严重,且MCAO后第14天时TTC染色显示大脑半球梗死体积显著高于假手术组(P<0.05),通过si-REDD1敲减MCAO大鼠脑组织中REDD1的表达,大鼠在MCAO后3、7和14 d的mNSS评分均显著低于MCAO组(P<0.05),且大鼠的梗死体积显著减少(P<0.05)。免疫荧光染色显示,REDD1沉默组的BrdU+/NeuN+细胞数和BrdU+/vWF+细胞数较MCAO组均显著增加(P<0.05)。结论:敲减REDD1表达减弱了OGD诱导的HBMECs损伤和氧化应激,并有助于增强MCAO大鼠神经发生和血管生成,促进神经功能恢复。
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关键词
发育及DNA损伤反应调节蛋白1
人脑微血管内皮细胞
氧糖剥夺
大脑中动脉闭塞
氧化应激
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Keywords
Protein regulated in development and DNA damage response 1
Human brain microvascular endothelial cells
Oxygen-glucose deprivation
Middle cerebral artery occlusion
Oxidative stress
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分类号
R743.3
[医药卫生—神经病学与精神病学]
R363.2
[医药卫生—病理学]
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