金丝桃素对兔急性高眼压视网膜的保护作用 被引量：4

1

作者 李琳玲 姜发纲 李双 《眼科新进展》 CAS 2007年第12期900-903,共4页

目的探讨蛋白激酶C抑制剂金丝桃素对兔急性高眼压视网膜谷氨酸含量的影响以及对视网膜的保护作用。方法将新西兰大白兔随机分成处理组、对照组和正常组。处理组向玻璃体腔内注射0.1mL的金丝桃素,对照组向玻璃体腔内注射0.1mL生理盐水,48... 目的探讨蛋白激酶C抑制剂金丝桃素对兔急性高眼压视网膜谷氨酸含量的影响以及对视网膜的保护作用。方法将新西兰大白兔随机分成处理组、对照组和正常组。处理组向玻璃体腔内注射0.1mL的金丝桃素,对照组向玻璃体腔内注射0.1mL生理盐水,48h后经前房灌注升高眼压达100mmHg(1kPa=7.5mmHg),持续90min,24h后取材。正常组不做上述处理直接取材。高效液相色谱法检测视网膜谷氨酸含量;光镜、电镜观察视网膜超微结构的变化,并采用医学图像分析系统计数视网膜神经节细胞(retinalganglioncells,RGC)、测量视网膜总厚度及内层厚度;TUNEL法检测视网膜细胞的凋亡。结果处理组、对照组和正常组视网膜谷氨酸含量分别为(56.6±2.1)×10-6mmol.g-1、(84.1±2.7)×10-6mmol.g-1和(17.1±2.3)×10-6mmol.g-1,处理组视网膜谷氨酸含量明显低于对照组(P<0.05);3组长450μm视网膜片段的RGC数分别为(22.30±0.83)、(15.50±0.56)和(25.50±0.67),处理组和正常组RGC数均明显高于对照组(P<0.05),而RGC层及内核层内凋亡的细胞数明显少于对照组。结论金丝桃素能减缓兔急性高眼压视网膜谷氨酸水平的升高、减轻RGC的凋亡,对视网膜具有一定的保护作用。 展开更多

关键词 金丝桃素 谷氨酸 急性高眼压 神经节细胞 凋亡

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脂质体介导寡脱氧核糖核苷酸转染人视网膜色素上皮细胞的转染率及分布测定 被引量：2

2

作者 李晓青 曾水清 徐莉莉 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2008年第6期1111-1114,共4页

目的:观察阳离子脂质体LipofectamineTM 2000介导的寡脱氧核糖核苷酸(ODNs)在体外培养的人视网膜色素上皮(RPE)细胞中的转染效率及其在细胞中的分布。方法:在阳离子脂质体LipofectamineTM 2000的介导下将人工合成的FAM荧光标记的ODNs转... 目的:观察阳离子脂质体LipofectamineTM 2000介导的寡脱氧核糖核苷酸(ODNs)在体外培养的人视网膜色素上皮(RPE)细胞中的转染效率及其在细胞中的分布。方法:在阳离子脂质体LipofectamineTM 2000的介导下将人工合成的FAM荧光标记的ODNs转入人RPE细胞中,荧光显微镜下观察转染后20 min、1 h、2 h、4 h、6 h、12 h、24 h其在细胞内的分布,流式细胞仪检测其在RPE细胞中的转染效率;并用MTT法检测脂质体处理组、脂质体-ODNs复合物处理组和正常对照组的细胞增生活性,观察脂质体的毒性。结果:LipofectamineTM 2000能迅速将FAM-ODNs转入人RPE细胞的胞质和胞核内,4～6 h达高峰,转染效率高达(85.85±5.75)%,与其他时点比较差异有统计学意义(P<0.05),24 h后其转染率还有(70.11±5.81)%;且脂质体对RPE细胞无明显细胞毒性,3组间细胞增生活性比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LipofectamineTM 2000能有效地将FAM-ODNs转入人RPE细胞中,可作为一种安全有效的基因转移载体用于基因治疗。 展开更多

关键词 阳离子脂质体 基因转移 寡脱氧核糖核苷酸 视网膜色素上皮细胞 人

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来氟米特活性代谢物A771726抑制角膜新生血管的实验研究 被引量：3

3

作者 郝念 张明昌 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期191-195,共5页

目的探讨来氟米特活性代谢物丙二酸次氮酰胺(A771726)对角膜新生血管的抑制作用及机制。方法(1)碱烧伤法制作大鼠角膜新生血管模型,40只SD大鼠随机分成A、B、C及D组,每组10只大鼠(10只眼)。空白对照组(A组)生理盐水滴眼,B、C、D组伤后... 目的探讨来氟米特活性代谢物丙二酸次氮酰胺(A771726)对角膜新生血管的抑制作用及机制。方法(1)碱烧伤法制作大鼠角膜新生血管模型,40只SD大鼠随机分成A、B、C及D组,每组10只大鼠(10只眼)。空白对照组(A组)生理盐水滴眼,B、C、D组伤后分别滴用0·5%、1·0%及2·0%的A771726滴眼液,均每日4次,共28d。每日裂隙灯显微镜下观察角膜新生血管的生长情况,测量新生血管面积。(2)不同浓度A771726与体外培养的人脐静脉内皮细胞(ECV-304)共同孵育,以四唑盐比色法(MTT法)检测细胞的增生活性,激光共聚焦显微镜检测免疫荧光染色增生细胞核抗原(PCNA)的表达。结果(1)C、D组大鼠角膜新生血管面积均显著小于空白对照A组(P<0·01),而B组大鼠角膜新生血管面积与A组差异无统计学意义(P>0·05)。(2)40、80、160、320μmol/LA771726与人脐静脉内皮细胞共同孵育36h可抑制细胞增生,随浓度增加抑制作用增强,免疫荧光染色显示细胞核PCNA的表达有降低。结论A771726能通过抑制血管内皮细胞增生阻止角膜新生血管生成。 展开更多

关键词 丙二酸次氮酰胺 角膜新生血管 人脐静脉内皮细胞 激光共聚焦显微镜

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LASEK术后角膜接触镜病原菌分布及药敏试验研究 被引量：1

4

作者 刘香琼 范文 +4 位作者 李婧 艾彪 汪红莲 史芳玲 张光明 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2011年第3期274-276,共3页

目的了解准分子激光上皮瓣下磨镶术(laser subepithelial keratomileusis,LASEK)术后角膜表面病原菌分布及其耐药状况,为指导围手术期抗生素的使用提供一定的参考依据。方法 对在我科接受LASEK的患者102例(193眼)术后所配戴的角膜接触... 目的了解准分子激光上皮瓣下磨镶术(laser subepithelial keratomileusis,LASEK)术后角膜表面病原菌分布及其耐药状况,为指导围手术期抗生素的使用提供一定的参考依据。方法 对在我科接受LASEK的患者102例(193眼)术后所配戴的角膜接触镜上的微生物进行培养,并观察培养阳性细菌对临床常见抗生素的药物敏感性。结果 所有患者102例193眼中无病原体生长者90例177眼,有沙眼衣原体生长者9例13眼(阳性率6.74%),有细菌生长者3例3眼(阳性率1.55%),其中表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌、藤黄微球菌阳性各1眼(分别占0.52%);3种细菌均对泰能、环丙沙星、左氧氟沙星、复方新诺明等敏感,藤黄微球菌对大多数抗生素敏感,而肺炎克雷伯杆菌对多种抗生素耐药。结论 LASEK围手术期局部合理应用抗生素眼液滴眼,对防治LASEK术后的感染具有重要意义。 展开更多

关键词 准分子激光上皮瓣下角膜磨镶术 细菌培养 药敏试验

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RNA干扰沉默CTGF对牛角膜内皮细胞增殖的影响 被引量：1

5

作者 张红旭 陈宏 +1 位作者 张惠成 董映 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第12期2128-2130,共3页

目的:探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默结缔组织生长因子(connective tissuegrowth factor,CTGF)表达对牛角膜内皮细胞(corneal endothelial cells,CECs)增殖的影响。方法:设计并合成CTGF特异性小干扰RNA(small interfering ... 目的:探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默结缔组织生长因子(connective tissuegrowth factor,CTGF)表达对牛角膜内皮细胞(corneal endothelial cells,CECs)增殖的影响。方法:设计并合成CTGF特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),用脂质体转染入培养的牛CECs,反转录聚合酶链反应(reversetransfection-polymerase chain reaction,RT-PCR)法观察基因沉默效果,1μg/L TGF-β2作用于转染前、后的牛CECs,CCK-8检测法观察RNA干扰对牛CECs增殖的影响。结果:CTGF siRNA成功转染入培养的牛角膜内皮细胞并有效沉默CTGF mRNA表达,转染24,48h和72h CTGF mRNA表达分别为正常对照组的17.3%,24.4%和41.7%,与正常对照组比较,其差异有统计学意义(P<0.05)。在转染24、48h时1μg/L TGF-β2对牛CECs的抑制率分别为0.3804±0.0026、0.3117±0.0075。与对照组比较,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CTGF特异性siRNA能有效沉默细胞内CTGF mRNA表达,促进牛CECs的增殖。 展开更多

关键词 内皮细胞 CTGF TGF—β2

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眼局部肾素血管紧张素系统与青光眼 被引量：1

6

作者 章艳 熊新春 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期957-960,共4页

青光眼的发生和发展是多因素造成的,治疗和预防也是多方面的。随着研究的深入,眼局部组织的肾素血管紧张素系统(RAS)在这一疾病中的作用日益受到重视。就RAS在青光眼的诊断、治疗及病理生理中的作用进行综述。

关键词 肾素血管紧张素系统 青光眼 眼压

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细胞因子对视网膜色素上皮细胞Cadherin表达的影响

7

作者 肖青 曾水清 +2 位作者 石浩军 胡燕华 王静 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2006年第6期585-588,共4页

目的探讨细胞因子对视网膜色素上皮(RPE)细胞钙黏附素(Cadherin)表达的影响及可能的调节机制。方法取体外培养的第2代兔眼RPE细胞,加入不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、血小板源生长因子(PDGF)、肝细... 目的探讨细胞因子对视网膜色素上皮(RPE)细胞钙黏附素(Cadherin)表达的影响及可能的调节机制。方法取体外培养的第2代兔眼RPE细胞,加入不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、血小板源生长因子(PDGF)、肝细胞生长因子(HGF)共同培养12h后,用流式细胞技术定性、定量观察这4种细胞因子对RPE细胞膜上Cadherin表达的影响。结果正常兔RPE细胞可表达Cadherin,经各种细胞因子诱导后的RPE细胞Cadherin表达均明显下调,尤以4种细胞因子联合作用时表达下调最明显,其表达水平与细胞因子浓度呈剂量递减关系。不同浓度各组细胞因子与空白对照组比较,Cadherin表达具有显著统计学差异(P<0·05)。同浓度不同细胞因子组间Cadherin表达具有显著统计学差异(P<0·05)。结论正常兔RPE细胞可表达Cadherin,细胞因子bFGF、TNFα、PDGF、HGF能诱导RPE细胞Cadherin表达减弱,减弱的程度与剂量有关。 展开更多

关键词 细胞钙黏附素 视网膜色素上皮细胞 细胞因子 流式细胞技术

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来氟米特活性代谢物A771726对大鼠角膜移植排斥反应的影响

8

作者 郝念 张明昌 边芳 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期100-104,共5页

目的探讨来氟米特活性代谢物A771726对大鼠角膜移植排斥反应的抑制作用。方法建立SD-Wistar大鼠同种异体穿透角膜移植模型,随机分组。A组为空白对照组;B、C、D组分别为0.5%、1.0%及2.0%A771726滴眼液组;E组为Wistar大鼠自体移植对照组... 目的探讨来氟米特活性代谢物A771726对大鼠角膜移植排斥反应的抑制作用。方法建立SD-Wistar大鼠同种异体穿透角膜移植模型,随机分组。A组为空白对照组;B、C、D组分别为0.5%、1.0%及2.0%A771726滴眼液组;E组为Wistar大鼠自体移植对照组。术后比较各组角膜植片排斥指数(RI)及植片存活时间,并对植片进行组织学及免疫组织化学染色观察。结果A组角膜植片存活时间为(9.38±2.26)d,B组(10.13±2.41)d,C组(17.57±1.72)d,D组(17.50±2.14)d,E组(>28.00)d。A组、B组分别与C组、D组植片存活时间差异有统计学意义(P<0.01)。移植术后10d,A组、B组角膜植片发生排斥反应,植片高表达IFN-γ及ICAM-1;术后20d,C组、D组植片发生排斥反应,植片IFN-γ及ICAM-1表达增高。结论局部应用A771726滴眼液能有效抑制角膜移植排斥反应。 展开更多

关键词 A771726 来氟米特 角膜移植 免疫排斥

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体外培养人眼小梁细胞Ang Ⅱ的表达

9

作者 章艳 熊新春 +1 位作者 郑红梅 秦文 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2009年第12期1077-1079,共3页

目的探讨血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)在体外培养的人眼小梁细胞(TMC)中的表达情况。方法原代和传代培养人眼TMC株,收集第3代人眼TMC用于制作细胞爬片。利用免疫组织化学染色法和Western blot法检测体外培养人眼TMC中AngⅡ蛋白的表达。结果传... 目的探讨血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)在体外培养的人眼小梁细胞(TMC)中的表达情况。方法原代和传代培养人眼TMC株,收集第3代人眼TMC用于制作细胞爬片。利用免疫组织化学染色法和Western blot法检测体外培养人眼TMC中AngⅡ蛋白的表达。结果传代培养的人眼TMC呈典型梭形,免疫组织化学检测显示体外培养的人眼TMC细胞膜和细胞质中可见AngⅡ的阳性颗粒,阴形对照片中未见有Ang Ⅱ蛋白表达。Western blot法在相对分子质量为64000处可见一明显蛋白条带,为Ang Ⅱ蛋白的阳性表达。结论Ang Ⅱ在体外培养的人眼TMC中呈阳性表达,提示AngⅡ可能参与青光眼眼压和房水循环的调节。 展开更多

关键词 人眼小梁细胞 血管紧张素Ⅱ 眼压

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大鼠角膜移植后颌下淋巴结中可诱导共刺激分子的表达

10

作者 陈晓敏 张明昌 胡燕华 《眼科新进展》 CAS 2008年第8期569-572,577,共5页

目的探讨可诱导的共刺激分子(inducible costimulatory,ICOS)在大鼠角膜移植后颌下淋巴结(submandibular lymph nodes,SMLN)中的表达和意义。方法采用RT-PCR、蛋白免疫印迹分析检测大鼠角膜移植后SMLN中ICOS mRNA和蛋白的表达;免疫组织... 目的探讨可诱导的共刺激分子(inducible costimulatory,ICOS)在大鼠角膜移植后颌下淋巴结(submandibular lymph nodes,SMLN)中的表达和意义。方法采用RT-PCR、蛋白免疫印迹分析检测大鼠角膜移植后SMLN中ICOS mRNA和蛋白的表达;免疫组织化学法检测ICOS蛋白在SMLN中的表达部位。结果ICOS在正常的SMLN中无表达;同种异体角膜移植组术后SMLN中的ICOS mRNA转录及蛋白的表达从第1天起即呈明显上升趋势,第7天达到高峰,分别从第5天和第3天开始,同一时间点上的表达水平在同种异体移植组明显高于自体移植组,自体移植组和异体移植组术后第5天、7天、14天SMLN中ICOS mRNA的相对表达量分别为0.2419和0.4907、0.2022和0.7348、0.1339和0.3190;术后第3天、7天、14天ICOS蛋白的相对表达量分别为0.2308和0.3957、0.1028和0.8366、0.0476和0.3966,差异有显著统计学意义(P<0.01);免疫组织化学显示同种异体角膜移植术后ICOS阳性表达见于SMLN的副皮质区,位于细胞胞浆中,表现为胞浆和胞膜呈棕黄色。结论同种异体角膜移植术后ICOS在SMLN中表达较对照组明显升高,可能在同种异体角膜术后的排斥反应中起到重要作用。 展开更多

关键词 颌下淋巴结 同种异体移植 自体移植 可诱导的共刺激分子

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斑状角膜营养不良近亲结婚的家系中新的CHST6突变研究 被引量：1

11

作者 龚敏 张明昌 +1 位作者 赵心悦 许康康 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第12期1141-1144,共4页

目的了解斑状角膜营养不良近亲婚配家系遗传结构特征,探讨斑状角膜营养不良临床表现、与CHST6基因突变的关系以及基因突变的类型。方法该斑状角膜营养不良的家系所有成员都经过详细病史询问、严格的眼科检查,留存外眼像。患者术中切除... 目的了解斑状角膜营养不良近亲婚配家系遗传结构特征,探讨斑状角膜营养不良临床表现、与CHST6基因突变的关系以及基因突变的类型。方法该斑状角膜营养不良的家系所有成员都经过详细病史询问、严格的眼科检查,留存外眼像。患者术中切除的病变角膜标本行组织病理学检查,采用标准方法行HE染色,采集7名成员外周血各5 mL,提取RNA,逆转录生成cDNA,对其产物测序,CHST6测序结果与正常人群进行比对。结果基因测序结果显示Ⅱ1和Ⅱ4的基因型为隐性纯合子。组织病理学检查发现先证者角膜基质中有大量的淀粉样物质沉积。斑状角膜营养不良家系中2例患者在两条等位CHST6基因上存在相同的点突变(1072T>C),余表型正常且与先证者有血缘关系的人员均是该突变基因的携带者。结论 2例患者的两条等位CHST6基因上存在相同点突变(1072T>C),基因型为隐性纯合子。 展开更多

关键词 CHST6等位基因相同点突变 斑状角膜营养不良 近亲结婚 基因测序 CHST6基因突变

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苦参碱对大鼠角膜新生血管的抑制作用 被引量：5

12

作者 于静 张明昌 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2012年第6期532-535,共4页

目的观察苦参碱对大鼠角膜烧伤后新生血管生成的抑制作用。方法选取Wistar大鼠32只,建立碱烧伤角膜新生血管模型,随机分成对照组和3个不同剂量的苦参碱实验组,每组8只(16眼)。模型建立后,实验组大鼠在结膜下注射不同剂量的苦参碱(0.2mg... 目的观察苦参碱对大鼠角膜烧伤后新生血管生成的抑制作用。方法选取Wistar大鼠32只,建立碱烧伤角膜新生血管模型,随机分成对照组和3个不同剂量的苦参碱实验组,每组8只(16眼)。模型建立后,实验组大鼠在结膜下注射不同剂量的苦参碱(0.2mg、0.4mg、0.8mg),对照组注射生理盐水,在裂隙灯下动态观察大鼠角膜新生血管生长情况并计算角膜新生血管的面积,观察周期为21d。于造模后4d、7d、14d、21d取不同剂量的苦参碱实验组大鼠角膜进行组织病理学检测,采集各组大鼠的角膜标本,用免疫组化法检测角膜组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,计算其平均光密度值;采用RT-PCR方法检测各组大鼠角膜组织中VEGF mRNA的表达。结果碱烧伤后4d、7d、14d、21d,与对照组相比,各实验组大鼠新生血管面积明显减少,差异均有显著统计学意义(P<0.01);造模后14d时,不同剂量的苦参碱实验组新生血管密度计数(17.83±2.32、11.00±2.37、10.87±2.41)明显低于对照组(21.11±2.14)(P<0.05);各实验组角膜VEGF的平均光密度值均小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);各实验组VEGF mRNA水平与对照组相比也显著下降(P<0.05)。结论结膜下注射苦参碱对大鼠角膜碱烧伤后的新生血管生长有抑制作用。 展开更多

关键词 苦参碱 角膜新生血管生成 血管内皮生长因子

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