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伪狂犬病病毒Ea株UL54基因的克隆与序列分析
被引量：
9
1
作者
方六荣
陈焕春
+2 位作者
肖少波
徐引娣
何启盖
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期103-106,共4页
根据伪狂犬病病毒国外Ka株UL5 4基因核苷酸序列 ,设计一对包含UL5 4基因完整编码区的引物 ,以伪狂犬病病毒国内地方分离株Ea株细胞感染物为模板 ,PCR扩增出大小约 1.1kb特异性带。将纯化的扩增产物克隆到pBluescriptⅡsk +中 ,酶切分析...
根据伪狂犬病病毒国外Ka株UL5 4基因核苷酸序列 ,设计一对包含UL5 4基因完整编码区的引物 ,以伪狂犬病病毒国内地方分离株Ea株细胞感染物为模板 ,PCR扩增出大小约 1.1kb特异性带。将纯化的扩增产物克隆到pBluescriptⅡsk +中 ,酶切分析证实后经双脱氧末端终止法进行全序列测定 ,序列分析结果表明Ea株UL5 4基因全长 10 86bp ,可编码 36 1个氨基酸。由二级结构预测数据推断C 末端具有典型的锌指结构域。运用Blast软件与Ka株UL5 4基因进行同源比较 ,发现Ea株UL5 4基因在核苷酸和氨基酸水平上均存在多处点突变 ,但无插入或缺失突变 ;将Ea株UL5 4氨基酸序列同其它 4种α 疱疹病毒 (HSV 1、HSV 2、VZV、EHV 1)进行同源比较 ,同源性分别为 47%、36 %、36 %和 44 %。
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关键词
伪狂犬病病毒
Ea株
UL54基因
克隆
序列分析
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职称材料
伪狂犬病病毒鄂A株gG^-/LacZ^+突变株的构建
被引量：
11
2
作者
周复春
陈焕春
+3 位作者
方六荣
周锐
吴斌
何启盖
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期134-138,共5页
以从湖北某猪场分离鉴定的鄂A株为亲本 ,提取其基因组DNA ,克隆含 gG基因的SphⅠ /KpnⅠ片段 ,然后将LacZ基因融合到 gG启动子下游 ,得到重组质粒 pUSKZ ,将重组质粒与鄂A株基因组共转染PK 15细胞 ,待细胞完全病变后 ,在X gal存在下 ,...
以从湖北某猪场分离鉴定的鄂A株为亲本 ,提取其基因组DNA ,克隆含 gG基因的SphⅠ /KpnⅠ片段 ,然后将LacZ基因融合到 gG启动子下游 ,得到重组质粒 pUSKZ ,将重组质粒与鄂A株基因组共转染PK 15细胞 ,待细胞完全病变后 ,在X gal存在下 ,作蓝斑筛选纯化。经斑点杂交和PCR扩增证实得到的是基因型为 gG- /LacZ+ 的重组伪狂犬病病毒。
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关键词
伪狂犬病病毒
鄂A株
突变株
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职称材料
题名
伪狂犬病病毒Ea株UL54基因的克隆与序列分析
被引量：
9
1
作者
方六荣
陈焕春
肖少波
徐引娣
何启盖
机构
华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒实验室
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期103-106,共4页
基金
国家自然科学基金! (39970 5 5 9)资助项目
文摘
根据伪狂犬病病毒国外Ka株UL5 4基因核苷酸序列 ,设计一对包含UL5 4基因完整编码区的引物 ,以伪狂犬病病毒国内地方分离株Ea株细胞感染物为模板 ,PCR扩增出大小约 1.1kb特异性带。将纯化的扩增产物克隆到pBluescriptⅡsk +中 ,酶切分析证实后经双脱氧末端终止法进行全序列测定 ,序列分析结果表明Ea株UL5 4基因全长 10 86bp ,可编码 36 1个氨基酸。由二级结构预测数据推断C 末端具有典型的锌指结构域。运用Blast软件与Ka株UL5 4基因进行同源比较 ,发现Ea株UL5 4基因在核苷酸和氨基酸水平上均存在多处点突变 ,但无插入或缺失突变 ;将Ea株UL5 4氨基酸序列同其它 4种α 疱疹病毒 (HSV 1、HSV 2、VZV、EHV 1)进行同源比较 ,同源性分别为 47%、36 %、36 %和 44 %。
关键词
伪狂犬病病毒
Ea株
UL54基因
克隆
序列分析
Keywords
pseudorabies virus(PRV),Ea strain,UL54 gene,cloning,sequence analysis
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
伪狂犬病病毒鄂A株gG^-/LacZ^+突变株的构建
被引量：
11
2
作者
周复春
陈焕春
方六荣
周锐
吴斌
何启盖
机构
华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期134-138,共5页
基金
"九五"国家科技攻关计划生物技术资助!项目 (96 -C0 1- 0 4- 0 3)
文摘
以从湖北某猪场分离鉴定的鄂A株为亲本 ,提取其基因组DNA ,克隆含 gG基因的SphⅠ /KpnⅠ片段 ,然后将LacZ基因融合到 gG启动子下游 ,得到重组质粒 pUSKZ ,将重组质粒与鄂A株基因组共转染PK 15细胞 ,待细胞完全病变后 ,在X gal存在下 ,作蓝斑筛选纯化。经斑点杂交和PCR扩增证实得到的是基因型为 gG- /LacZ+ 的重组伪狂犬病病毒。
关键词
伪狂犬病病毒
鄂A株
突变株
Keywords
Pseudorabies virus
Ea
gG-/LacZ+ Mutant
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
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1
伪狂犬病病毒Ea株UL54基因的克隆与序列分析
方六荣
陈焕春
肖少波
徐引娣
何启盖
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001
9
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职称材料
2
伪狂犬病病毒鄂A株gG^-/LacZ^+突变株的构建
周复春
陈焕春
方六荣
周锐
吴斌
何启盖
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001
11
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