紫云英根瘤菌与豌豆根瘤菌共生质粒间的相互作用 被引量：3

1

作者 张学贤 周俊初 +2 位作者 张忠明 李阜棣 陈华癸 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期175-181,共7页

将豌豆根瘤菌共生质粒pJB5JI导入紫云英根瘤菌含共生质粒的7653R菌株和消除了共生质粒的7653R+1菌株中。7653R+1接合子获得了在碗豆上结瘤的能力,7653R接合子却不能在豌豆上结瘤。从而揭示出紫云英根瘤菌的共生质粒能抑制导入的豌豆根... 将豌豆根瘤菌共生质粒pJB5JI导入紫云英根瘤菌含共生质粒的7653R菌株和消除了共生质粒的7653R+1菌株中。7653R+1接合子获得了在碗豆上结瘤的能力,7653R接合子却不能在豌豆上结瘤。从而揭示出紫云英根瘤菌的共生质粒能抑制导入的豌豆根瘤菌共生质粒pJB5JI功能的表达。同时pJB5JI的导入使7653R接合子在其正常宿主紫云英上的结瘤固氮能力较亲本7653R显著提高。试验同时考察了pJB5JI导入紫云英根瘤菌后的稳定性。 展开更多

关键词 紫云英 根瘤菌 共生质粒 豌豆

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应用玉米线粒体S类质粒对几种CMS的胞质进行分类 被引量：4

2

作者 赖菁茹 郑用琏 刘纪麟 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第2期129-133,共5页

抽提AN朝(正常胞质),AN朝CMS-T,AN朝CMS-S,AN朝CMS-C四种同核异质的玉米自交系及不育系材料的线粒体DNA作电泳分析,证实了S_1,S_2类质粒为S型细胞质所特有。并以此作为S型细胞质的分类指标,鉴定了齐,石大黄,小黄,大黄等几种未知胞质类... 抽提AN朝(正常胞质),AN朝CMS-T,AN朝CMS-S,AN朝CMS-C四种同核异质的玉米自交系及不育系材料的线粒体DNA作电泳分析,证实了S_1,S_2类质粒为S型细胞质所特有。并以此作为S型细胞质的分类指标,鉴定了齐,石大黄,小黄,大黄等几种未知胞质类型的待测CMS系为S型细胞质。 展开更多

关键词 玉米 S类质粒 线粒体DNA 胞质分类

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高效固氮大豆根瘤菌中重组质粒pBj32H_2的物理图谱 被引量：2

3

作者 张忠明 莫才清 +2 位作者 沈辉 周俊初 陈华癸 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第1期94-96,共3页

以在我国黑龙江地区广泛应用的慢生型大豆根瘤菌22—10为出发菌株,通过导入克隆有快生型大豆根瘤菌菌株B52的DNA片段的重组质粒pBj32H_2,构建了高效固氮大豆基因工程根瘤菌32.该菌株在黑龙江地区进行田间中试和大面积(15万亩)推广应用,... 以在我国黑龙江地区广泛应用的慢生型大豆根瘤菌22—10为出发菌株,通过导入克隆有快生型大豆根瘤菌菌株B52的DNA片段的重组质粒pBj32H_2,构建了高效固氮大豆基因工程根瘤菌32.该菌株在黑龙江地区进行田间中试和大面积(15万亩)推广应用,获得比出发菌株22—10增产大豆7.4%和8.5%的效果。为了研究pBj32H_2中所克隆基因的结构和功能,本工作对pBj32H_2进行了限制性内切酶图谱分析,确定了pBj32H_2中外源DNA片段的大小及EcoRⅠ、BglⅡ、XhoⅠ的酶切位点,建立了该片段的物理图谱。 展开更多

关键词 物理图谱 质粒 大豆根瘤菌 大豆

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应用玉米线粒体C质粒检测不育系未知不育胞质类型 被引量：5

4

作者 郑用琏 刘纪麟 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第2期216-218,共3页

Pring和Kembles对玉米各类胞质线粒体质粒的研究发现了S组胞质内存在S_1(6397bp)和S_2(5453bp)两种类质粒,C胞质中存在C_1(1570bp)和C_2(1420bp)质粒。前文已报道过,用这一方法检测属于S胞质类型的未知胞质不育系的结果,本文再继续报道... Pring和Kembles对玉米各类胞质线粒体质粒的研究发现了S组胞质内存在S_1(6397bp)和S_2(5453bp)两种类质粒,C胞质中存在C_1(1570bp)和C_2(1420bp)质粒。前文已报道过,用这一方法检测属于S胞质类型的未知胞质不育系的结果,本文再继续报道属于C胞质类型的吉1和吉2两个未知胞质的检测结果。 展开更多

关键词 玉米胞质不育 线粒体DNA C质粒

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紫云英根瘤菌寄主专性结瘤基因和固氮基因的鉴定 被引量：2

5

作者 张忠明 周俊初 陈华癸 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第4期285-290,共6页

用植物筛选法从紫云英根瘤菌7653R基因文库中分离到能互补7653R+1(原菌株7653R消除共生质粒的突变株)共生缺陷功能的重组质粒pRaZ15。pRaZ15质粒克隆有紫云英根瘤菌共同结瘤基因簇。采用三亲交配—植物试验法,将pRaZ15质粒转移到豌豆根... 用植物筛选法从紫云英根瘤菌7653R基因文库中分离到能互补7653R+1(原菌株7653R消除共生质粒的突变株)共生缺陷功能的重组质粒pRaZ15。pRaZ15质粒克隆有紫云英根瘤菌共同结瘤基因簇。采用三亲交配—植物试验法,将pRaZ15质粒转移到豌豆根廇菌菌株T83K3和菜豆根瘤菌菌株3622—15中,用以回接紫云英植株,并在紫云英上结瘤,证实了pRaZ15质粒上克隆有紫云英根瘤菌寄主专性结瘤基因。将pRaZ15质粒再次转移到紫云英根瘤菌不结瘤突变株7653R+1中,回接紫云英植株,用乙炔还原法测定出所结根瘤的固氮酶活性。用α—^(32)p-dCTP标记克隆有肺炎克氏杆菌nif HDK基因的pSA30,以此作为探针,与pRaZ15质粒的EcoR1片段杂交,证实了紫云英根瘤菌nif HDK基因也存在于pRaZ15质粒上。 展开更多

关键词 紫云英 根瘤菌 固氮基因 结瘤基因

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玉米CMS—C材料雄花育性不稳定性与DNA的关系 被引量：3

6

作者 郑用琏 刘纪麟 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期120-126,共7页

田间鉴定7个CMS材料雄花育性,发现Mo17CMS—ES、Mo17CMS—C、107CMS—ES、107 CMS—C、塘四10CMS—C 5个材料均为完全不育或高度不育株,77 CMS—C、关17CMS—C则分别出现了25—30%的半可育株。Mo17CMS—C、Mo17CMS—ES材料线粒体DNA经Ps... 田间鉴定7个CMS材料雄花育性,发现Mo17CMS—ES、Mo17CMS—C、107CMS—ES、107 CMS—C、塘四10CMS—C 5个材料均为完全不育或高度不育株,77 CMS—C、关17CMS—C则分别出现了25—30%的半可育株。Mo17CMS—C、Mo17CMS—ES材料线粒体DNA经PstⅠ、SalⅠ酶切,与2.2kb探针杂交的电泳图谱与正常胞质Mo17的有差异;它们的总DNA经ECoRⅠ酶切,与2.2kb探针杂交,其电泳电谱与正常胞质Mo17的也有差异。研究结果说明核背景中的修饰基因与胞质亚组等位基因之间的互作共同控制CMS材料雄花育性的不稳定遗传的可能性。 展开更多

关键词 玉米 育性 稳定性 三系配套 DNA

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导入外源DNA片段的花生根瘤菌高效基因工程菌株的构建 被引量：2

7

作者 李立家 周俊初 陈华癸 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期219-225,共7页

以柯斯质粒ｐＬＡＦＲ１为载体先构建快生型花生根瘤菌８５－７菌株总ＤＮＡ的基因文库。在协助质粒ｐＲＫ２０１３帮助下用此基因文库分别同菌株８５－７和另一株慢生型花生根瘤菌菌株Ｃ０２－５作三亲本杂交。转移接合子接种沙培条件... 以柯斯质粒ｐＬＡＦＲ１为载体先构建快生型花生根瘤菌８５－７菌株总ＤＮＡ的基因文库。在协助质粒ｐＲＫ２０１３帮助下用此基因文库分别同菌株８５－７和另一株慢生型花生根瘤菌菌株Ｃ０２－５作三亲本杂交。转移接合子接种沙培条件下生长的花生，通过结瘤试验初筛选和复筛选，共筛选出３株工程菌ＨＮ１１、ＨＮ１２（以８５－７为受体）和ＨＮ１３（以Ｃ０２－５为受体）。其每植株根瘤的固氮酶活分别比出发菌株的提高３０２％（ＨＮ１１）、３５６％（ＨＮ１２）和２８４％（ＨＮ１３）；每植株干重分别比出发菌株的提高８５％（ＨＮ１１）、８３％（ＨＮ１２）和２８％（ＨＮ１３）。工程菌株的重组质粒酶切分析表明，除载体ｐＬＡＦＲ１外还分别含有２５ｋｂ（ｐＨＮ１１）、１４ｋｂ（ｐＨＮ１２和１８ｋｂ（ｐＨＮ１３）的外源片段。 展开更多

关键词 花生 根瘤菌 基因文库 外源DNA

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导入外源DNA的大豆根瘤菌22-10基因工程菌株的构建与分析 被引量：3

8

作者 缪礼鸿 周俊初 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期255-264,共10页

通过三亲本杂交,分别将紫云英根瘤菌7635R的基因文库和慢生型大豆根瘤菌22-10的基因文库引入到慢生型大豆根瘤菌22-10中,获得了大量的含有外源DNA片段的转移接合子。以结瘤试验作选择标准,从中筛选到3株具有较高固氮效率的基因工程菌株H... 通过三亲本杂交,分别将紫云英根瘤菌7635R的基因文库和慢生型大豆根瘤菌22-10的基因文库引入到慢生型大豆根瘤菌22-10中,获得了大量的含有外源DNA片段的转移接合子。以结瘤试验作选择标准,从中筛选到3株具有较高固氮效率的基因工程菌株HN5-1、HN5-2和HN22-2。采用反向杂交,将接合子HN5-2中的外源重组质粒转回到大肠杆菌中,提取质粒作EcoRI酶切。表明pLAFR1质粒载体上携带有大约20 kb大小的DNA片段。实验还证明,在含有从根瘤菌转移而来的pLAFR1质粒的大肠杆菌细胞中,常伴随有辅助性质粒pRK2013的存在,用四环素和卡那霉素两种选择性抗性可淘汰其中的pRK2013质粒而仅保留有来自根瘤菌的pLAFR1重组质粒。 展开更多

关键词 大豆 根瘤菌 杂交

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光敏核不育水稻农垦58S与农垦58蛋白质双向电泳对比分析 被引量：1

9

作者 曹孟良 郑用琏 张启发 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第4期305-311,共7页

将光敏核不育水稻农垦58S和正常可育农垦58N适时播种,使其光敏感期处于自然长日照控制下。于苗期、分蘖期、第二次枝梗分化期、雌雄蕊形成期、花粉母细胞形成期及减数分裂期分别在暗、光下取其幼穗及第一全展叶作蛋白质双向电泳分析,发... 将光敏核不育水稻农垦58S和正常可育农垦58N适时播种,使其光敏感期处于自然长日照控制下。于苗期、分蘖期、第二次枝梗分化期、雌雄蕊形成期、花粉母细胞形成期及减数分裂期分别在暗、光下取其幼穗及第一全展叶作蛋白质双向电泳分析,发现了17个特异的蛋白质组分。其中11个组分在可育与不育水稻间表现为有或无的差异;3个组分表现为表达量的变化;另3个组分表现为位置在双向电泳图谱上的平移。研究结果还表明低温和异常高温不仅可使光敏不育水稻的花粉育性出现部分恢复,而且高温处理还导致了电泳图谱上蛋白组分的相应改变。 展开更多

关键词 光敏感时期 幼穗 叶片 蛋白 水稻

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重组质粒pHN32对花生根瘤菌固氮的影响

10

作者 李立家 周俊初 陈华癸 《生物技术通报》 CAS CSCD 1994年第1期9-12,共4页

通过三亲本杂交将大豆根瘤菌高效基因工程菌株HN32所携带的增效重组质粒pHN32引入一株快生型花生根瘤菌菌株85-7和另一株慢生型花生根瘤菌菌株co2-5中。花生盆栽结瘤试验结果统计分析表明:p的HN32载体质粒pLAFR1对根瘤菌85-7和co2-5的... 通过三亲本杂交将大豆根瘤菌高效基因工程菌株HN32所携带的增效重组质粒pHN32引入一株快生型花生根瘤菌菌株85-7和另一株慢生型花生根瘤菌菌株co2-5中。花生盆栽结瘤试验结果统计分析表明:p的HN32载体质粒pLAFR1对根瘤菌85-7和co2-5的固氮功能没有影响;pHN32对85-7固氮影响不论在植株干重方面还是在固氮酶活方面统计学上都不显著;而对co2-5则植株干重提高了25.7%,存在极显著差异,固氮酶活尽管提高了51.8%,但统计学上不显著。根瘤中分离的Tc^r根瘤co2-5(pHN32)中的pHN32EcoR1酶切分析表明:pHN32没有发生结构上的变化且固氮增强作用可能由3.7kb外源片段引起。 展开更多

关键词 pHN32 快生型花生根瘤薯 慢生型花生根瘤薯

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大麦萌发种子总mRNA的分离及cDNA克隆

11

作者 杨官品 张启发 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期315-318,共4页

以大麦为材料,用硫氰酸胍-热酚-氯化锂-蛋白酶K法抽提萌发种子的总RNA,经过Oligo(dT)-纤维素柱层析,分离出总mRNA。经MuMLV逆转录酶合成cDNA第一条链,再用E. coliDNA聚合酶Ⅰ-RNase H共同作用,合成第二条链。经DNA聚合酶Ⅰ大片段修平末... 以大麦为材料,用硫氰酸胍-热酚-氯化锂-蛋白酶K法抽提萌发种子的总RNA,经过Oligo(dT)-纤维素柱层析,分离出总mRNA。经MuMLV逆转录酶合成cDNA第一条链,再用E. coliDNA聚合酶Ⅰ-RNase H共同作用,合成第二条链。经DNA聚合酶Ⅰ大片段修平末端后,与经过SmaⅠ完全酶切并用碱性磷酸酶处理了的pUC19载体连接,转化受体菌JM107,挑出白色重组子,用小麦全长的α-淀粉酶基因为探针经过菌落原位杂交筛选,获得一个含有α-淀粉酶基因片段的阳性克隆,插入片段长度约0.8kb。 展开更多

关键词 大麦 种子 CDNA文库 Α-淀粉酶基因

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酵母人工染色体载体的改造和修饰

12

作者 张忠明 Gres.,PM 《高技术通讯》 CAS CSCD 1995年第1期10-13,共4页

将能在植物中表达的烟草花叶病毒ＣａＭＶ３５Ｓ启动子、ＧＵＳ基因、潮霉素（Ｈｙｇｒｏｍｙｃｉｎ）基因及ＮＯＳ终止子组建到酵母人工染色体（ＹＡＣ）载体，构建了具有能在植物细胞中表达和选择ｐＹＡＶ、ＧＵＳ、ｐＪＳ９７／ｐＪ... 将能在植物中表达的烟草花叶病毒ＣａＭＶ３５Ｓ启动子、ＧＵＳ基因、潮霉素（Ｈｙｇｒｏｍｙｃｉｎ）基因及ＮＯＳ终止子组建到酵母人工染色体（ＹＡＣ）载体，构建了具有能在植物细胞中表达和选择ｐＹＡＶ、ＧＵＳ、ｐＪＳ９７／ｐＪＳ９８－ＨＹＹＡＣ载体系统和一个标记ＹＡＣ克隆的ｐＵＲ４３－ＨＹ质粒。 展开更多

关键词 酵母人工染色体 烟草 植物 基因 烟草花叶病毒

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链霉菌高拷贝质粒pIJ101 DNA的研究 Ⅱ.在大肠杆菌中具有终止子活性片段的克隆和分析

13

作者 邓子新 Tobias Kieser David A.Hopwood 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第2期158-162,共5页

在大肠杆菌的终止子探针载体pIJ667上,neo基因的正常表达可使寄主产生较强的卡那霉索抗性。然而,把链霉菌高拷贝质粒pIJ101上的BclⅠ片段克隆到这个载体的BglⅡ位点,使neo的结构基因与其启动子隔开所做的克隆试验显示,有两个插入片段,Bc... 在大肠杆菌的终止子探针载体pIJ667上,neo基因的正常表达可使寄主产生较强的卡那霉索抗性。然而,把链霉菌高拷贝质粒pIJ101上的BclⅠ片段克隆到这个载体的BglⅡ位点,使neo的结构基因与其启动子隔开所做的克隆试验显示,有两个插入片段,BclⅠ-A和BclⅠ-E,可以有效地终止neo基因的转录,使大肠杆菌寄主对卡那霉素呈现敏感。这两个片段在pIJ101的限制性内切酶图谱上已得到了定位,其活性区域的大小分别为2.9和1.19kb。把pIJ101衍生的小质粒pIJ350上BclⅠ片段克隆到pIJ667中,不仅进一步暗示出pIJ101 BclⅠ-A片段上终止子功能的存在,而且把这个区域缩小到1.32kb的范围内。此外,这些终止子活性的表达显示出明显的方向性。 展开更多

关键词 链霉菌 质粒 大肠杆菌 终止子活性

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大麦抗白粉病近等基因系农艺性状相似性的评价

14

作者 陈茂顺 张启发 廖玉才 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第4期311-317,共7页

为考察近等基因系间遗传背景相似的程度,鉴定了十对具不同抗性基因的大麦抗白粉病近等基因系对人工接种白粉病菌的抗性反应,并在田间条件下考察了抽穗期、开花期、株高、穗长、有效分蘗、结实小穗数和百粒重等七个数量性状。结果表明,... 为考察近等基因系间遗传背景相似的程度,鉴定了十对具不同抗性基因的大麦抗白粉病近等基因系对人工接种白粉病菌的抗性反应,并在田间条件下考察了抽穗期、开花期、株高、穗长、有效分蘗、结实小穗数和百粒重等七个数量性状。结果表明,感病系均表现为高感,抗病系表现从免疫到中抗等不同程度的抗性。在不同对的近等基因系之间,抽穗期、开花期、株高、穗长和结实小穗数等五个性状有极显著的差异。各近等基因系对内抗病系和感病系间在这七个性状上没有明显的差异。说明除抗白粉病性之外,这十对近等基因系内的抗病系和感病系的遗传背景高度相似。 展开更多

关键词 大麦 白粉病 近等基因系 数量性状

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