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月季3种病毒RT-LAMP检测方法的建立及应用
1
作者
李振锋
袁志豪
+4 位作者
陆月霞
罗云
黄冬华
王国平
蔡丽
《山西农业大学学报(自然科学版)》
北大核心
2025年第1期1-9,共9页
[目的]月季是我国重要的观赏花卉,李属坏死环斑病毒(prunus necrotic ringspot virus,PNRSV)、苹果茎沟病毒(apple stem grooving virus,ASGV)、月季潜隐病毒1(rose cryptic virus 1,RCV1)是侵染月季的主要病毒,与其它病毒复合侵染月季...
[目的]月季是我国重要的观赏花卉,李属坏死环斑病毒(prunus necrotic ringspot virus,PNRSV)、苹果茎沟病毒(apple stem grooving virus,ASGV)、月季潜隐病毒1(rose cryptic virus 1,RCV1)是侵染月季的主要病毒,与其它病毒复合侵染月季时,对其生长和发育可造成严重影响。本文旨在建立灵敏、便捷地检测月季中这3种病毒的RT-LAMP检测方法。[方法]本研究以病毒CP基因为靶序列设计特异性引物,建立侵染月季的PNRSV、ASGV和RCV1的RT-LAMP检测方法,并对反应体系中Mg^(2+)浓度和dNTP使用浓度、反应温度和反应时间进行了优化,并对反应灵敏度和特异性进行了检测。[结果]该方法在恒温条件(61℃)下即可对目标病毒实现可视化特异性检测,检测体系中Mg^(2+)和dNTP最佳使用浓度分别为5.0 mmol/L和1.2 mmol/L;本研究所建立的RT-LAMP检测方法,RCV1、PNRSV和ASGV可以检测到病毒的最低浓度分别为3.19×10^(5)、6.44×10^(4)和4.04×10^(4)拷贝/μL,灵敏度是RT-PCR的100~1000倍,而且检测体系具有很好的反应特异性,与侵染月季的其它病毒之间不存在交叉反应;使用该RT-LAMP检测方法随机对田间19个样品进行检测,可通过颜色变化,能准确检测出样品中的目标病毒,而无需借助琼脂糖凝胶电泳或其它专门仪器。[结论]该方法可通过直接添加染料实现可视化,具有快速、便捷、特异性好特点,适用于侵染月季的PNRSV、ASGV和RCV1的快速诊断及田间监测。
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关键词
月季
病毒
RT-LAMP
检测方法
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职称材料
青枯劳尔氏菌Ⅲ型效应子的致病和无毒机制
被引量：
2
2
作者
戚培培
于晓
李博
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期651-661,707,共12页
青枯劳尔氏菌(简称“青枯菌”)是一种危害十分严重的植物病原细菌,其引起的植物青枯病严重影响番茄和马铃薯等作物的健康生产。青枯菌寄主种类广泛,而且能够通过基因水平转移和基因重组获得新毒力,以扩展寄主范围。青枯菌的致病机制复杂...
青枯劳尔氏菌(简称“青枯菌”)是一种危害十分严重的植物病原细菌,其引起的植物青枯病严重影响番茄和马铃薯等作物的健康生产。青枯菌寄主种类广泛,而且能够通过基因水平转移和基因重组获得新毒力,以扩展寄主范围。青枯菌的致病机制复杂,Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion system,T3SS)是关键的致病因子,其分泌的Ⅲ型效应子(typeⅢeffectors,T3Es)在致病过程中发挥重要功能,从不同层面抑制寄主先天免疫反应;此外,植物寄主也能识别青枯菌的效应子,激活效应子触发的免疫反应并产生抗病性。本文对青枯菌Ⅲ型效应子的毒性机制与无毒功能进行了讨论和总结,为深入了解青枯菌的致病机制和植物抗青枯病的机制提供了思路。
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关键词
青枯劳尔氏菌
细菌性青枯病
效应子
致病机制
先天免疫
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职称材料
题名
月季3种病毒RT-LAMP检测方法的建立及应用
1
作者
李振锋
袁志豪
陆月霞
罗云
黄冬华
王国平
蔡丽
机构
华中农业大学
植物
科学技术
学院
/
湖北省
植物
病理学
重点
实验室
江西省
农业
科学
院蔬菜花卉研究所
出处
《山西农业大学学报(自然科学版)》
北大核心
2025年第1期1-9,共9页
基金
国家重点研发计划(2019YFD1001800)。
文摘
[目的]月季是我国重要的观赏花卉,李属坏死环斑病毒(prunus necrotic ringspot virus,PNRSV)、苹果茎沟病毒(apple stem grooving virus,ASGV)、月季潜隐病毒1(rose cryptic virus 1,RCV1)是侵染月季的主要病毒,与其它病毒复合侵染月季时,对其生长和发育可造成严重影响。本文旨在建立灵敏、便捷地检测月季中这3种病毒的RT-LAMP检测方法。[方法]本研究以病毒CP基因为靶序列设计特异性引物,建立侵染月季的PNRSV、ASGV和RCV1的RT-LAMP检测方法,并对反应体系中Mg^(2+)浓度和dNTP使用浓度、反应温度和反应时间进行了优化,并对反应灵敏度和特异性进行了检测。[结果]该方法在恒温条件(61℃)下即可对目标病毒实现可视化特异性检测,检测体系中Mg^(2+)和dNTP最佳使用浓度分别为5.0 mmol/L和1.2 mmol/L;本研究所建立的RT-LAMP检测方法,RCV1、PNRSV和ASGV可以检测到病毒的最低浓度分别为3.19×10^(5)、6.44×10^(4)和4.04×10^(4)拷贝/μL,灵敏度是RT-PCR的100~1000倍,而且检测体系具有很好的反应特异性,与侵染月季的其它病毒之间不存在交叉反应;使用该RT-LAMP检测方法随机对田间19个样品进行检测,可通过颜色变化,能准确检测出样品中的目标病毒,而无需借助琼脂糖凝胶电泳或其它专门仪器。[结论]该方法可通过直接添加染料实现可视化,具有快速、便捷、特异性好特点,适用于侵染月季的PNRSV、ASGV和RCV1的快速诊断及田间监测。
关键词
月季
病毒
RT-LAMP
检测方法
Keywords
Chinese rose
Virus
RT-LAMP
Detection method
分类号
S432.41 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
青枯劳尔氏菌Ⅲ型效应子的致病和无毒机制
被引量：
2
2
作者
戚培培
于晓
李博
机构
华中农业大学
农业
微生物资源发掘与利用全国
重点
实验室
华中农业大学植物科学技术学院湖北省植物病理学重点实验室
湖北
洪山
实验室
出处
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期651-661,707,共12页
基金
国家自然科学基金项目(32272556,31970125)
中央高校基本科研业务费专项资金项目(2662023ZKPY001)。
文摘
青枯劳尔氏菌(简称“青枯菌”)是一种危害十分严重的植物病原细菌,其引起的植物青枯病严重影响番茄和马铃薯等作物的健康生产。青枯菌寄主种类广泛,而且能够通过基因水平转移和基因重组获得新毒力,以扩展寄主范围。青枯菌的致病机制复杂,Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion system,T3SS)是关键的致病因子,其分泌的Ⅲ型效应子(typeⅢeffectors,T3Es)在致病过程中发挥重要功能,从不同层面抑制寄主先天免疫反应;此外,植物寄主也能识别青枯菌的效应子,激活效应子触发的免疫反应并产生抗病性。本文对青枯菌Ⅲ型效应子的毒性机制与无毒功能进行了讨论和总结,为深入了解青枯菌的致病机制和植物抗青枯病的机制提供了思路。
关键词
青枯劳尔氏菌
细菌性青枯病
效应子
致病机制
先天免疫
Keywords
Ralstonia solanacearum
bacterial wilt
effector
pathogenesis
innate immunity
分类号
S432.1 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
月季3种病毒RT-LAMP检测方法的建立及应用
李振锋
袁志豪
陆月霞
罗云
黄冬华
王国平
蔡丽
《山西农业大学学报(自然科学版)》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
青枯劳尔氏菌Ⅲ型效应子的致病和无毒机制
戚培培
于晓
李博
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2023
2
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