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哺乳动物体细胞克隆的研究进展
被引量：
2
1
作者
王滇
于孟飞
+2 位作者
张春燕
刘松柏
杨利国
《中国畜牧兽医》
CAS
2008年第12期110-112,共3页
随着克隆技术的发展,哺乳动物体细胞克隆在生物学、医学等领域有着越来越重要的价值,近年来,克隆技术不断完善,克隆方法不断优化,取得了很多重要的成果,但在成功率等方面仍存在许多难以攻破的问题。作者重点阐述了胞质内全细胞直接注射...
随着克隆技术的发展,哺乳动物体细胞克隆在生物学、医学等领域有着越来越重要的价值,近年来,克隆技术不断完善,克隆方法不断优化,取得了很多重要的成果,但在成功率等方面仍存在许多难以攻破的问题。作者重点阐述了胞质内全细胞直接注射法这一技术在哺乳动物体细胞克隆上的应用情况,旨在阐明国内外哺乳动物体细胞克隆的研究现状,为进一步提高克隆成功率提供参考。
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关键词
哺乳动物
体细胞克隆
胞质内直接注射
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职称材料
猪MC4R基因突变体真核表达载体的构建及功能研究
2
作者
韩立强
郭豫杰
+4 位作者
鲁维飞
张欣
褚贝贝
王江
杨国宇
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第4期679-685,共7页
为研究MC4R基因不同突变体的功能差异,本研究从猪肌肉组织中克隆得到MC4R基因的编码序列,将克隆片段与pcDNA3.1真核表达载体进行KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切,连接形成重组表达载体MC4R1,将载体转染BHK细胞后Western blotting检测蛋白表达。通...
为研究MC4R基因不同突变体的功能差异,本研究从猪肌肉组织中克隆得到MC4R基因的编码序列,将克隆片段与pcDNA3.1真核表达载体进行KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切,连接形成重组表达载体MC4R1,将载体转染BHK细胞后Western blotting检测蛋白表达。通过点突变法得到MC4R基因在707/892位点的3个突变载体,将突变载体瞬时转染到BHK细胞,采用免疫荧光对细胞进行标记,通过激光共聚焦显微镜和流式细胞检测荧光表达,结果发现,克隆的MC4R1基因序列长度大约1 000bp,在707/892位点序列为G/G,将构建的真核表达载体MC4R1转染BHK细胞,经过Western blotting检测发现MC4R1蛋白正常表达;通过点突变法得到在707/892位点突变的突变载体MC4R2(G/A)、MC4R3(A/G)、MC4R4(A/A),经过激光共聚焦观察荧光表达后发现,突变受体在细胞膜上均有正常表达,流式检测发现4个突变受体表达的荧光平均强度并没有显著差异(P>0.05)。通过构建MC4R基因突变载体后发现,707/892位点突变对于MC4R受体在细胞膜的表达没有显著影响,其具体机制作用还需深入研究。
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关键词
猪
黑素皮质素受体-4
突变体
表达
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职称材料
题名
哺乳动物体细胞克隆的研究进展
被引量：
2
1
作者
王滇
于孟飞
张春燕
刘松柏
杨利国
机构
华中农业大学
教育部
农业
动物
遗传
育种与
繁殖
重点
实验室
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
2008年第12期110-112,共3页
基金
国家科技支撑计划子项目:公益性行业科技专项(Nyhyzx07-036)
国家科技支撑计划子项目:奶业发展重大关键技术研究与示范(2006BAD04A02-11)
文摘
随着克隆技术的发展,哺乳动物体细胞克隆在生物学、医学等领域有着越来越重要的价值,近年来,克隆技术不断完善,克隆方法不断优化,取得了很多重要的成果,但在成功率等方面仍存在许多难以攻破的问题。作者重点阐述了胞质内全细胞直接注射法这一技术在哺乳动物体细胞克隆上的应用情况,旨在阐明国内外哺乳动物体细胞克隆的研究现状,为进一步提高克隆成功率提供参考。
关键词
哺乳动物
体细胞克隆
胞质内直接注射
Keywords
mammal elone intracytoplasimic direct injection
分类号
S814.8 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
猪MC4R基因突变体真核表达载体的构建及功能研究
2
作者
韩立强
郭豫杰
鲁维飞
张欣
褚贝贝
王江
杨国宇
机构
河南
农业
大学
农业
部
动物
生化与营养
重点
实验室
华中农业大学教育部动物遗传育种与繁殖重点实验室
河南省现代畜牧业协同创新中心
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第4期679-685,共7页
基金
农业部"引进国际先进农业科学技术"(948)重点项目(2011-G35)
国家转基因重大专项(2014ZX0801015B)
郑州市科技攻关项目(141PPTGG430)
文摘
为研究MC4R基因不同突变体的功能差异,本研究从猪肌肉组织中克隆得到MC4R基因的编码序列,将克隆片段与pcDNA3.1真核表达载体进行KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切,连接形成重组表达载体MC4R1,将载体转染BHK细胞后Western blotting检测蛋白表达。通过点突变法得到MC4R基因在707/892位点的3个突变载体,将突变载体瞬时转染到BHK细胞,采用免疫荧光对细胞进行标记,通过激光共聚焦显微镜和流式细胞检测荧光表达,结果发现,克隆的MC4R1基因序列长度大约1 000bp,在707/892位点序列为G/G,将构建的真核表达载体MC4R1转染BHK细胞,经过Western blotting检测发现MC4R1蛋白正常表达;通过点突变法得到在707/892位点突变的突变载体MC4R2(G/A)、MC4R3(A/G)、MC4R4(A/A),经过激光共聚焦观察荧光表达后发现,突变受体在细胞膜上均有正常表达,流式检测发现4个突变受体表达的荧光平均强度并没有显著差异(P>0.05)。通过构建MC4R基因突变载体后发现,707/892位点突变对于MC4R受体在细胞膜的表达没有显著影响,其具体机制作用还需深入研究。
关键词
猪
黑素皮质素受体-4
突变体
表达
Keywords
pig
MC4R
mutation
expression
分类号
S828 [农业科学—畜牧学]
S813.3 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
哺乳动物体细胞克隆的研究进展
王滇
于孟飞
张春燕
刘松柏
杨利国
《中国畜牧兽医》
CAS
2008
2
在线阅读
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职称材料
2
猪MC4R基因突变体真核表达载体的构建及功能研究
韩立强
郭豫杰
鲁维飞
张欣
褚贝贝
王江
杨国宇
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
0
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