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葡萄白藜芦醇合酶基因转化水稻的研究 被引量:3
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作者 刘聃璐 林拥军 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期8-14,共7页
将来源于2个葡萄品种的白藜芦醇合酶基因以组成型表达的强启动子Ubiquitin驱动,并利用农杆菌介导的遗传转化引入粳稻品种中花11中。通过对单拷贝转基因家系基因表达量及白藜芦醇目标物的检测,发现大多数转基因家系的外源基因可稳定表达... 将来源于2个葡萄品种的白藜芦醇合酶基因以组成型表达的强启动子Ubiquitin驱动,并利用农杆菌介导的遗传转化引入粳稻品种中花11中。通过对单拷贝转基因家系基因表达量及白藜芦醇目标物的检测,发现大多数转基因家系的外源基因可稳定表达,但检测到的最终产物不是白藜芦醇,而是白藜芦醇苷(亦称云杉新苷),最高检出量达到了10.26μg/g,是野生型对照的1 000倍,推测这是在生成白藜芦醇的基础上,水稻内源的糖基转移酶作用的结果。虽然经抗病检测发现转基因植株并没有对稻瘟病菌表现出明显抗性,但是高含量的云杉新苷转基因家系可以作为提升水稻潜在营养价值的材料进行使用。 展开更多
关键词 白藜芦醇 云杉新苷 白藜芦醇合酶基因 水稻
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β-胡萝卜素加强的转基因水稻培育 被引量:5
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作者 杜丽缺 赵明超 +1 位作者 林拥军 陈浩 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1-7,共7页
为了使水稻种子积累维生素A的前体——β-胡萝卜素,将人工合成的来源于欧文氏菌的八氢番茄红素脱氢酶基因(crtI)和来源于玉米的八氢番茄红素合酶基因(psy)导入水稻中,且在水稻胚乳中特异性表达。结合PCR和Southern blotting的检测结果,... 为了使水稻种子积累维生素A的前体——β-胡萝卜素,将人工合成的来源于欧文氏菌的八氢番茄红素脱氢酶基因(crtI)和来源于玉米的八氢番茄红素合酶基因(psy)导入水稻中,且在水稻胚乳中特异性表达。结合PCR和Southern blotting的检测结果,从psy/crtI转化植株中分离得到1个外源基因单拷贝插入且无选择标记(Marker-free)的纯合转基因家系ky1-4。通过热不对称交错PCR(Tail-PCR)分离得到ky1-4的T-DNA插入位点右边界的侧翼序列,结合Southern blotting检测结果推测该插入位点位于水稻第11号染色体上。超高效液相色谱(UPLC)分析结果表明,psy/crtI转化水稻植株种子中β-胡萝卜素含量为(1.99±0.11)^(4.41±0.30)μg/g,其中ky1-4家系β-胡萝卜素的含量为(3.11±0.08)μg/g。 展开更多
关键词 水稻 维生素A 八氢番茄红素合酶 八氢番茄红素脱氢酶 黄金米
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水稻脆性突变体nbc(t)的主要特性和脆性基因的初步定位 被引量:5
3
作者 王川丽 王令强 牟同敏 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期159-164,共6页
对脆性突变体的表型、主要农艺性状和稻米品质进行了考查,并对脆性基因进行了初步定位。结果表明:脆茎水稻nbc(t)与野生亲本9311在株高等形态特征上无明显区别,仅在机械强度上有区别;nbc(t)的根、茎、叶、穗及种子都很脆,易折断,且表现... 对脆性突变体的表型、主要农艺性状和稻米品质进行了考查,并对脆性基因进行了初步定位。结果表明:脆茎水稻nbc(t)与野生亲本9311在株高等形态特征上无明显区别,仅在机械强度上有区别;nbc(t)的根、茎、叶、穗及种子都很脆,易折断,且表现全生育期脆性。脆茎突变体nbc(t)的主要农艺性状与9311相似,产量略低于9311,除了整精米率偏低以外,其他稻米品质性状与9311相似。脆茎突变体nbc(t)与广占63-4S所配组合的产量和稻米品质与扬两优6号相当。与9311相比,nbc(t)茎秆的抗折力相当,但抗张力明显降低,纤维素含量约降低17%。遗传分析表明,nbc(t)的脆茎特性可能由2个基因位点控制,初步定位在9号染色体上的2个区段,一个位于9号染色体上段SSR标记RM3700和RM24371之间,遗传距离分别为1.3cM和3.1cM;另一个位于9号染色体下段INDEL标记CL062和CL045外侧,遗传距离分别为1.6cM和6.0cM。 展开更多
关键词 水稻脆茎突变体 nbc(t) 农艺性状 稻米品质 脆性基因 基因定位
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水稻新型核转化筛选标记基因的鉴定及应用 被引量:2
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作者 张娟娟 林拥军 周菲 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期1-8,共8页
将人工合成的来自Escherichia coli的dsdA基因与来自Schizosaccharomyces pombe的dao1基因,通过农杆菌侵染方式转化到水稻中花11中。对转化植株进行分子生物学检测表明,目的基因整合到了水稻核基因组中,其中获得转化dsdA的单拷贝植株7个... 将人工合成的来自Escherichia coli的dsdA基因与来自Schizosaccharomyces pombe的dao1基因,通过农杆菌侵染方式转化到水稻中花11中。对转化植株进行分子生物学检测表明,目的基因整合到了水稻核基因组中,其中获得转化dsdA的单拷贝植株7个,转化dao1的单拷贝植株6个。通过对单拷贝转基因家系表达量检测及T0代种子萌发测验发现,dao1基因在2个(编号6,7)转基因家系中表达量显著,T0代种子在含D-Ala的培养基上,具有明显抗性。dsdA基因在所有的转基因家系中表达量相对偏低,在含D-Ser的培养基上,T0代种子有一定抗性。 展开更多
关键词 水稻 转基因 筛选标记基因 D-氨基酸 生物安全
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Eleocharis baldwinii的光合模式鉴定及染色体观察 被引量:1
5
作者 伍欢 吴杰敏 +1 位作者 陈太钰 林拥军 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期7-12,共6页
Eleocharis baldwinii是莎草科(Cyperaceae)两栖类淡水水草,能够在陆地和沉水2种不同的环境下生长。本研究对生长在不同环境的E.baldwinii进行光合模式鉴定,解剖结构观察、C4循环关键酶活性测定以及稳定碳同位素比值测定的结果显示,E.ba... Eleocharis baldwinii是莎草科(Cyperaceae)两栖类淡水水草,能够在陆地和沉水2种不同的环境下生长。本研究对生长在不同环境的E.baldwinii进行光合模式鉴定,解剖结构观察、C4循环关键酶活性测定以及稳定碳同位素比值测定的结果显示,E.baldwinii的陆生型光合碳同化途径为C4型,而水生型为C3-C4中间型。此外,还对E.baldwinii进行了染色体压片观察,确定其染色体数目为20条。 展开更多
关键词 光合作用 ELEOCHARIS baldwinii 两栖植物 染色体压片
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1个新水稻组成型启动子的克隆与功能鉴定 被引量:7
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作者 魏晶 毛伟华 +1 位作者 林拥军 陈浩 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期139-146,共8页
根据基因芯片数据库和RT-PCR验证得到1个高活性的水稻组成型表达基因(TIGR Locus:LOC-Os07g34589),用PCR技术从籼稻品种明恢63基因组中克隆得到其上游启动子PSUI1,长度为1 941bp;将其与β-glucuronidase(GUS)报告基因融合构建植物表达载... 根据基因芯片数据库和RT-PCR验证得到1个高活性的水稻组成型表达基因(TIGR Locus:LOC-Os07g34589),用PCR技术从籼稻品种明恢63基因组中克隆得到其上游启动子PSUI1,长度为1 941bp;将其与β-glucuronidase(GUS)报告基因融合构建植物表达载体DX2181b-PSUI1,利用玉米Ubiquitin启动子融合GUS报告基因构建表达载体DX2181b-PUbi作为对照,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法将DX2181b-PSUI1和DX2181b-PUbi转化粳稻品种中花11。组织化学染色表明,含DX2181b-PSUI1的转基因植株中,GUS基因在幼苗期叶片、叶鞘、根,抽穗期叶片、叶鞘、茎秆、颖壳、雄蕊和成熟期的叶片、叶鞘、茎秆、胚、胚乳中均有表达,说明PSUI1为组成型启动子。对GUS表达活性进行定量分析表明,PSUI1启动子的活性约为玉米Ubiquitin启动子活性的1/3~1/2,但是PSUI1表现出了更好的表达稳定性。 展开更多
关键词 水稻 组成型启动子 GUS报告基因 GUS染色 GUS定量
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