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伪狂犬病病毒Ea株gD基因的克隆及序列分析被引量：8: 1; 作者洪文洲陈焕春 +3 位作者方六荣周锐何启盖吴斌《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期235-243,共9页; 本研究从含有伪狂犬病病毒 (Pseudorabiesvirus,PRV)Ea株 gD基因BamHI 6 6Kb片段的重组质粒 pUCB7中分别亚克隆gD基因的上、下游片段 ,并对上游片段进一步改造 ,去掉 gD基因上游的非编码序列 ,构建了含完整 gD基因编码区的重组质粒 pBR... 展开更多; 关键词伪狂犬病病毒 Ea株 GD基因克隆序列分析伪狂犬病; 在线阅读下载PDF 职称材料

伪狂犬病病毒Ea株gE基因的克隆、序列分析及其表达被引量：3: 2; 作者肖少波陈焕春 +2 位作者方六荣何启盖洪文洲《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期174-179,共6页; 对含伪狂犬病病毒（Pseudorabies Virus,PrV）Ea株gD基因部分编码序列,gI、gE和11k基因全序列、28k基因部分序列的质粒pSKB4.5进行亚克隆,构建了只含完整gE基因（长1.78kb）的重组质粒pSDM1.78+,并采用双脱氧末端终止法对全序列进行了分... 展开更多; 关键词伪狂犬病病毒 GE基因克隆序列分析体外表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪大肠杆菌水肿毒素SLT-IIeA基因的克隆和序列分析被引量：8: 3; 作者刘国平吴斌 +2 位作者刘梦元何启盖陈焕春《动物医学进展》 CSCD 2004年第1期122-125,共4页; 研究以本地猪水肿病大肠杆分离物ED1株为材料 ,利用 PCR克隆了含猪水肿病大肠杆菌 (VTEC) slt-IIe A基因 987bp的片段 ,并测定了含该克隆片段的 Bam HI、Hind 酶切片段的核苷酸序列。结果表明 ,slt-IIe A基因的编码区全长 960 bp,编码 3... 展开更多; 关键词猪大肠杆菌水肿毒素 SLT—ⅡeA基因基因克隆序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪白细胞介素15基因的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：2: 4; 作者江云波方六荣 +5 位作者肖少波张辉潘永飞罗锐李彬陈焕春《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期841-845,共5页; 本研究通过RT-PCR方法从用ConA刺激的猪外周血淋巴细胞中扩增出猪IL-15(pIL-15)编码序列的cD-NA,将其克隆至T载体pMD18-T后,序列测定表明pIL-15基因长度为489 bp,编码162个氨基酸。进一步通过PCR方法获得缺失其N端48 aa的信号肽序列的成... 展开更多; 关键词猪白细胞介素15 基因克隆原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名伪狂犬病病毒Ea株gD基因的克隆及序列分析被引量：8: 1; 作者洪文洲陈焕春方六荣周锐何启盖吴斌; 机构华中农业大学动物病毒室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期235-243,共9页; 基金国家自然科学基金资助项目!(396 70 5 5 5 ) 瑞典青年基金!(B/ 2 987- 1); 文摘本研究从含有伪狂犬病病毒 (Pseudorabiesvirus,PRV)Ea株 gD基因BamHI 6 6Kb片段的重组质粒 pUCB7中分别亚克隆gD基因的上、下游片段 ,并对上游片段进一步改造 ,去掉 gD基因上游的非编码序列 ,构建了含完整 gD基因编码区的重组质粒 pBRgDI,并利用基因内部的限制性内切酶位点 ,用内切酶KpnI和SalI酶切分析 ,证实了 gD基因的可靠性和完整性。同时构建了测序质粒 pSKgDSB和 pSKgDS ,并用双脱氧终止法进行测序。将测序结果与国外的Rice毒株进行比较 ,发现Ea株 gD基因核苷酸序列有多处点突变和一处插入突变 ,在编码氨基酸残基水平上也有差异。; 关键词伪狂犬病病毒 Ea株 GD基因克隆序列分析伪狂犬病; Keywords Pseudorabies virus Ea strain gD gene Clone Nucleotide sequence analysis; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学] S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名伪狂犬病病毒Ea株gE基因的克隆、序列分析及其表达被引量：3: 2; 作者肖少波陈焕春方六荣何启盖洪文洲; 机构华中农业大学动物病毒室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期174-179,共6页; 基金 "九五"国家科技攻关计划生物技术项目(96-C01-04-03); 文摘对含伪狂犬病病毒（Pseudorabies Virus,PrV）Ea株gD基因部分编码序列,gI、gE和11k基因全序列、28k基因部分序列的质粒pSKB4.5进行亚克隆,构建了只含完整gE基因（长1.78kb）的重组质粒pSDM1.78+,并采用双脱氧末端终止法对全序列进行了分析,发现同国外标准毒株Rice株相比较,在核苷酸和氨基酸水平均存在一定程度的差异。进一步将gE基因克隆到高效真核表达载体pcDNA3.1+的KpnI和BamHI位点之间,构建了gE基因的真核表达质粒pcDNA-gE。体外转染 IBRS-2细胞,经间接免疫荧光法检测证实了gE基因在IBRS-2细胞中得到了表达,表达的蛋白具有生物学活性。; 关键词伪狂犬病病毒 GE基因克隆序列分析体外表达; Keywords Pseudorabies virus Glycoprotein E Cloning Sequence analysis Expression; 分类号 S852.655 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪大肠杆菌水肿毒素SLT-IIeA基因的克隆和序列分析被引量：8: 3; 作者刘国平吴斌刘梦元何启盖陈焕春; 机构华中农业大学动物病毒室; 出处《动物医学进展》 CSCD 2004年第1期122-125,共4页; 文摘研究以本地猪水肿病大肠杆分离物ED1株为材料 ,利用 PCR克隆了含猪水肿病大肠杆菌 (VTEC) slt-IIe A基因 987bp的片段 ,并测定了含该克隆片段的 Bam HI、Hind 酶切片段的核苷酸序列。结果表明 ,slt-IIe A基因的编码区全长 960 bp,编码 3 1 9个氨基酸的蛋白质 ,序列与国外报导的 S1 1 79株进行比较发现其核苷酸同源性为 98.9%。经推导的氨基酸序列的同源性为 99.7%。这为进一步研究 slt-IIe A的生物学特性。; 关键词猪大肠杆菌水肿毒素 SLT—ⅡeA基因基因克隆序列分析; Keywords pig edema Slt Iie cloning indification sequence analysis; 分类号 S858.28 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪白细胞介素15基因的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：2: 4; 作者江云波方六荣肖少波张辉潘永飞罗锐李彬陈焕春; 机构华中农业大学动物病毒室农业微生物国家重点实验室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期841-845,共5页; 基金国家自然科学基金项目(30300257) 国家973基础研究项目(2005CB523200); 文摘本研究通过RT-PCR方法从用ConA刺激的猪外周血淋巴细胞中扩增出猪IL-15(pIL-15)编码序列的cD-NA,将其克隆至T载体pMD18-T后,序列测定表明pIL-15基因长度为489 bp,编码162个氨基酸。进一步通过PCR方法获得缺失其N端48 aa的信号肽序列的成熟pIL-15蛋白基因,将其亚克隆到原核表达载体pET-28a的6×His下游,构建重组表达质粒pET-pIL15,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导,重组菌体裂解物经SDS-PAGE可检测到分子量约为15 ku的重组蛋白,其表达量占总菌体蛋白量的17.5%。Western blot试验也证实表达的重组融合蛋白6×His-pIL15能够很好地与抗6×His单抗发生反应。猪IL-15基因的克隆、表达为进一步研究其功能和应用奠定了基础。; 关键词猪白细胞介素15 基因克隆原核表达; Keywords porcine IL-15 gene cloning prokaryotic expression; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	伪狂犬病病毒Ea株gD基因的克隆及序列分析	洪文洲陈焕春方六荣周锐何启盖吴斌	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2001	8	在线阅读下载PDF 职称材料
2	伪狂犬病病毒Ea株gE基因的克隆、序列分析及其表达	肖少波陈焕春方六荣何启盖洪文洲	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2002	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	猪大肠杆菌水肿毒素SLT-IIeA基因的克隆和序列分析	刘国平吴斌刘梦元何启盖陈焕春	《动物医学进展》 CSCD	2004	8	在线阅读下载PDF 职称材料
4	猪白细胞介素15基因的克隆及在大肠杆菌中的表达	江云波方六荣肖少波张辉潘永飞罗锐李彬陈焕春	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料