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题名猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究
被引量：48
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作者
唐先春
吴斌
索绪峰
王大林
陈焕春
尹争艳
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机构
华中农业大学动物病原微生物实验室
海口市美兰区罗牛山兽医站
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出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期590-595,共6页
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基金
国家自然科学基金项目资助(30471292)
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文摘
用PCR方法配合生化鉴定,从有肺炎症状猪的肺脏及进行性萎缩性鼻炎(Progressive atrophic rhinitis,PAR)症状猪的鼻拭子中分离出66 株多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida, Pm)。然后做了药敏试验,并用PCR方法对这66株Pm进行分型及毒素基因的检测, 用豚鼠皮肤坏死试验及小鼠致死试验对产毒素多杀性巴氏杆菌(Toxigenic Pasteurella multocida, T+Pm)进一步鉴定。结果显示PCR鉴定与生化鉴定Pm结果完全一致;PCR分型表明有46株为D型Pm,18株为A型Pm,1株为B型Pm,1株无法定型;有8株用PCR检测为T+ Pm;豚鼠皮肤坏死试验及小鼠致死试验对这8株T+Pm的进一步鉴定也表明均为产毒素菌株。所鉴定的8 株T+ Pm都为D型,都分离于有严重PAR症状的猪。
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关键词
多杀性巴氏杆菌
特性研究
分离鉴定
生物学
PCR方法
猪
生化鉴定
致死试验
萎缩性鼻炎
PCR鉴定
PcR检测
药敏试验
毒素基因
Pm
进行性
症状
PAR
分型
小鼠
坏死
皮肤
豚鼠
D型
肺脏
肺炎
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Keywords
Pm
T +Pm
PCR
typing
medicine sensitivity
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分类号
S858.315.1
[农业科学—临床兽医学]
S858.31
[农业科学—临床兽医学]
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题名猪源多杀性巴氏杆菌ompH基因的克隆、表达
被引量：11
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作者
吴斌
唐先春
陈焕春
王大鹏
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机构
华中农业大学动物病原微生物实验室
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出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第7期701-704,共4页
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基金
国家自然科学基金项目(30471292)
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文摘
利用已分离的菌株030224HB,根据NCBI上的序列(U52208)设计了一对引物,用PCR方法扩增了猪源多杀性巴氏杆菌的外膜蛋白基因(ompH),扩增的片段大小为1114bp(ORF为960bp),并克隆到载体pMD18T(TVector),测序表明该基因相当保守。用pET28b构建了原核表达载体pET28bompH,转化BL21并诱导表达,SDSPAGE结果显示表达蛋白约为35ku,与报道大小相近。Westernblot结果表明表达的蛋白质具有生物学活性,然后用所表达的蛋白做了ELISA检测方法的初步探讨。
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关键词
多杀性巴氏杆菌
ompH基因
克隆
原核表达
ELISA
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Keywords
Pasteurella multocida
ompH gene
cloning
prokaryotic expression
ELISA
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分类号
S852.612
[农业科学—基础兽医学]
Q786
[生物学—分子生物学]
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题名猪多杀性巴氏杆菌PCR检测方法的建立及应用
被引量：1
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作者
唐先春
吴斌
陈焕春
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机构
华中农业大学动物病原微生物实验室
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出处
《养殖与饲料》
2004年第5期26-27,共2页
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文摘
设计了一对用以检测猪多杀性巴氏杆菌的引物.对临床送检的有肺炎症状或萎缩性鼻炎症状的发病猪的病料进行细菌培养,然后挑菌做PCR,同时对可疑菌落纯化培养后做生化鉴定.结果,从不同省(市)送检的病料中分离鉴定出66株多杀性巴氏杆菌,PCR检测结果与生化鉴定结果完全符合;该引物对其他6种猪的常见呼吸道病原菌扩增均为阴性;该PCR检测方法能检测出cfu为103的巴氏杆菌模板.
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关键词
猪
多杀性巴氏杆菌
PCR检测
生化鉴定
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分类号
S858.28
[农业科学—临床兽医学]
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