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猪伪狂犬病基因缺失疫苗的制备、安全性、免疫原性、保存期测定及区域试验
被引量:
12
1
作者
何启盖
方六荣
+5 位作者
吴斌
刘正飞
吴美洲
肖少波
金梅林
陈焕春
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第10期1055-1063,共9页
为了提供有效的伪狂犬病疫苗,用鸡胚成纤维细胞扩大培养了PrV HB-98突变株(TK-/gG-/LacZ+),研制了伪狂犬病基因缺失疫苗,并对该疫苗经肌肉接种、经口等免疫途径的最小免疫剂量进行了测定,同时也对4批疫苗的安全性、效力、免疫期和保存...
为了提供有效的伪狂犬病疫苗,用鸡胚成纤维细胞扩大培养了PrV HB-98突变株(TK-/gG-/LacZ+),研制了伪狂犬病基因缺失疫苗,并对该疫苗经肌肉接种、经口等免疫途径的最小免疫剂量进行了测定,同时也对4批疫苗的安全性、效力、免疫期和保存期进行了检测;同时将4批疫苗用于免疫23个猪场的母猪、新生仔猪和育肥猪进行区域试验。测定结果表明,疫苗经上述两种途径接种对不同阶段猪的最小免疫剂量均为105.0TCID50;10倍免疫剂量的疫苗对初生仔猪、15日龄仔猪和妊娠母猪是安全的,免疫猪能抵抗强毒的攻击;疫苗在4℃和-20℃下分别可保存6个月和12个月。对伪狂犬病毒抗体阴性的70日龄商品猪和种猪的免疫期为6个月。田间试验表明,4批猪伪狂犬病基因缺失疫苗安全有效,并可用于仔猪发病时的紧急接种。为猪伪狂犬病基因工程疫苗的制备与应用提供了有力的依据。
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关键词
伪狂犬病基因疫缺失苗
PrY
HK-98突变株
安全性
免疫原性
区域试验
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职称材料
检测伪狂犬病病毒双抗体夹心间接ELISA方法的建立与应用
被引量:
21
2
作者
汪招雄
何启盖
+3 位作者
刘丽娜
刘正飞
黄红亮
陈焕春
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期220-225,共6页
以猪伪狂犬病病毒(PrV)Ea株特异性单克隆抗体576株为捕获抗体,纯化的抗PrVIgG为检测抗体,建立了检测PrV抗原的双抗体夹心ELISA方法。最佳反应条件为,单克隆抗体576株的包被浓度为12.2μg/mL,IgG的工作浓度为16.0μg/mL,对PrV的检测灵敏...
以猪伪狂犬病病毒(PrV)Ea株特异性单克隆抗体576株为捕获抗体,纯化的抗PrVIgG为检测抗体,建立了检测PrV抗原的双抗体夹心ELISA方法。最佳反应条件为,单克隆抗体576株的包被浓度为12.2μg/mL,IgG的工作浓度为16.0μg/mL,对PrV的检测灵敏度达15.6ng(0.156μg/mL),与乙型脑炎病毒(JEV)、猪瘟病毒(HCV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)和猪流感病毒(SIV)等无交叉反应。批间和批内变异系数较小,分别为6.39%和4.1%。应用本方法对人工感染PrV的40日龄仔猪组织进行检测,肺和脑PrV抗原检出率最高,其次是脾、心、肝和肌肉。应用该方法和PrV对159份临床样本进行平行检测,发现二者的符合率可达到77.4%,比PCR敏感。实验结果表明:双抗体夹心间接ELISA方法具有敏感性高、特异性强和重复性好的特点,可广泛应用于动物组织中PrV的检测。
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关键词
双抗体夹心间接ELISA
单克隆抗体
猪伪狂犬病毒Ea株
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职称材料
口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及检测应用
被引量:
6
3
作者
李任峰
何启盖
+2 位作者
刘正飞
钱平
阮力
《生物技术通报》
CAS
CSCD
2006年第C00期544-548,共5页
用纯化的口蹄疫病毒(Footandmouthdiseasevirus,FMDV)免疫BALB/C小鼠,将免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用有限稀释法进行克隆,经筛选获得多株能稳定分泌抗FMDV单抗的杂交瘤细胞株。选择其中一株(2G12)用于下列实验,其细胞培养...
用纯化的口蹄疫病毒(Footandmouthdiseasevirus,FMDV)免疫BALB/C小鼠,将免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用有限稀释法进行克隆,经筛选获得多株能稳定分泌抗FMDV单抗的杂交瘤细胞株。选择其中一株(2G12)用于下列实验,其细胞培养上清液的效价是1:256,腹水效价是1:1280;以自行制备的兔抗FMDV高免血清IgG为捕获抗体包被酶联免疫吸附试验微量反应板,以单抗2G12为第二抗体,建立了快速检测FMDV抗原的双抗体夹心ELISA,该方法能检出90ng病毒,而且只与FMDV发生特异性反应,与猪瘟病毒(HCV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和乙脑病毒(JEV)均不发生反应。本研究为检测口蹄疫病毒抗原提供了灵敏和特异的方法。
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关键词
口蹄疫病毒
单克隆抗体
双抗体夹心ELLSA
抗原检测
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职称材料
抗伪狂犬病毒Ea株单克隆抗体的制备及鉴定
被引量:
4
4
作者
汪招雄
何启盖
+2 位作者
黄红亮
刘正飞
陈焕春
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期222-225,共4页
将伪狂犬病毒Ea株纯化后免疫雌性Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/O的骨髓瘤细胞融合,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)进行筛选,获得了2株抗PRV的单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3G7E3和4A6F5,其细胞培养上清及小鼠腹水效价(ELISA)分别为1...
将伪狂犬病毒Ea株纯化后免疫雌性Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/O的骨髓瘤细胞融合,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)进行筛选,获得了2株抗PRV的单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3G7E3和4A6F5,其细胞培养上清及小鼠腹水效价(ELISA)分别为1:212、1:212及1:100×212、1:100×212。特异性试验和免疫荧光结果显示,3G7E3和4A6F5仅与PRV反应,而与PPV、PRRSV、JEV和HCV等病毒不发生交叉反应;用单抗建立的夹心ELISA试验能检出伪狂犬病毒。表明本研究所获得的2株单抗是PRV特异性的。这2株分泌抗PRV单抗的杂交瘤细胞株的获得为进一步建立准确快速的抗原检测方法奠定了基础。
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关键词
伪狂犬病毒Ea株
单克隆抗体
间接免疫荧光试验
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职称材料
梅花鹿γ-干扰素在牛型结核病中的应用研究进展
5
作者
刘颖
王冰
+1 位作者
陈伟
郭爱珍
《现代农业科技》
2009年第23期318-319,323,共3页
梅花鹿γ-干扰素是细胞因子超家族中干扰素家族的特殊重要成员之一,具有广泛的生物学功能。其功能的多样性是通过诱导细胞表达多种蛋白质实现的。对梅花鹿γ-干扰素的诱导与产生、结核病特异性基因、梅花鹿γ-干扰素用于牛型结核病的检...
梅花鹿γ-干扰素是细胞因子超家族中干扰素家族的特殊重要成员之一,具有广泛的生物学功能。其功能的多样性是通过诱导细胞表达多种蛋白质实现的。对梅花鹿γ-干扰素的诱导与产生、结核病特异性基因、梅花鹿γ-干扰素用于牛型结核病的检测原理及γ-干扰素优劣的研究进展进行综述。
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关键词
梅花鹿
Γ-干扰素
结核杆菌
检测原理
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职称材料
题名
猪伪狂犬病基因缺失疫苗的制备、安全性、免疫原性、保存期测定及区域试验
被引量:
12
1
作者
何启盖
方六荣
吴斌
刘正飞
吴美洲
肖少波
金梅林
陈焕春
机构
华中农业大学动物医学院预防兽医学湖北省重点实验室
农业
微生物学国家
重点
实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第10期1055-1063,共9页
基金
国家"十五"科技攻关项目(2002BA514A-18)
"863"计划(2001AA2130512002AA241341)
文摘
为了提供有效的伪狂犬病疫苗,用鸡胚成纤维细胞扩大培养了PrV HB-98突变株(TK-/gG-/LacZ+),研制了伪狂犬病基因缺失疫苗,并对该疫苗经肌肉接种、经口等免疫途径的最小免疫剂量进行了测定,同时也对4批疫苗的安全性、效力、免疫期和保存期进行了检测;同时将4批疫苗用于免疫23个猪场的母猪、新生仔猪和育肥猪进行区域试验。测定结果表明,疫苗经上述两种途径接种对不同阶段猪的最小免疫剂量均为105.0TCID50;10倍免疫剂量的疫苗对初生仔猪、15日龄仔猪和妊娠母猪是安全的,免疫猪能抵抗强毒的攻击;疫苗在4℃和-20℃下分别可保存6个月和12个月。对伪狂犬病毒抗体阴性的70日龄商品猪和种猪的免疫期为6个月。田间试验表明,4批猪伪狂犬病基因缺失疫苗安全有效,并可用于仔猪发病时的紧急接种。为猪伪狂犬病基因工程疫苗的制备与应用提供了有力的依据。
关键词
伪狂犬病基因疫缺失苗
PrY
HK-98突变株
安全性
免疫原性
区域试验
Keywords
gene-deleted vaccine against pseudorabies
PrY HB-98 strain
safety
immunogenicity
field trials
分类号
S858.285.3 [农业科学—临床兽医学]
S852.52 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
检测伪狂犬病病毒双抗体夹心间接ELISA方法的建立与应用
被引量:
21
2
作者
汪招雄
何启盖
刘丽娜
刘正飞
黄红亮
陈焕春
机构
华中农业大学动物医学院预防兽医学湖北省重点实验室
农业
微生物学国家
重点
实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期220-225,共6页
基金
国家"十五"重大科技攻关专项-食品安全关键技术项目(2002BA514A-18)资助
文摘
以猪伪狂犬病病毒(PrV)Ea株特异性单克隆抗体576株为捕获抗体,纯化的抗PrVIgG为检测抗体,建立了检测PrV抗原的双抗体夹心ELISA方法。最佳反应条件为,单克隆抗体576株的包被浓度为12.2μg/mL,IgG的工作浓度为16.0μg/mL,对PrV的检测灵敏度达15.6ng(0.156μg/mL),与乙型脑炎病毒(JEV)、猪瘟病毒(HCV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)和猪流感病毒(SIV)等无交叉反应。批间和批内变异系数较小,分别为6.39%和4.1%。应用本方法对人工感染PrV的40日龄仔猪组织进行检测,肺和脑PrV抗原检出率最高,其次是脾、心、肝和肌肉。应用该方法和PrV对159份临床样本进行平行检测,发现二者的符合率可达到77.4%,比PCR敏感。实验结果表明:双抗体夹心间接ELISA方法具有敏感性高、特异性强和重复性好的特点,可广泛应用于动物组织中PrV的检测。
关键词
双抗体夹心间接ELISA
单克隆抗体
猪伪狂犬病毒Ea株
Keywords
double-antibody sandwich indirect ELISA
monoclonal antibody
pseudorabies virus Ea strain
分类号
S852.655 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及检测应用
被引量:
6
3
作者
李任峰
何启盖
刘正飞
钱平
阮力
机构
华中农业大学动物医学院预防兽医学湖北省重点实验室
农业
微生物学国家
重点
实验室
河南科技
学院
动物
科学
学院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
2006年第C00期544-548,共5页
基金
国家"十五"重大科技专项资金(2002BA514A-18)
文摘
用纯化的口蹄疫病毒(Footandmouthdiseasevirus,FMDV)免疫BALB/C小鼠,将免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用有限稀释法进行克隆,经筛选获得多株能稳定分泌抗FMDV单抗的杂交瘤细胞株。选择其中一株(2G12)用于下列实验,其细胞培养上清液的效价是1:256,腹水效价是1:1280;以自行制备的兔抗FMDV高免血清IgG为捕获抗体包被酶联免疫吸附试验微量反应板,以单抗2G12为第二抗体,建立了快速检测FMDV抗原的双抗体夹心ELISA,该方法能检出90ng病毒,而且只与FMDV发生特异性反应,与猪瘟病毒(HCV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和乙脑病毒(JEV)均不发生反应。本研究为检测口蹄疫病毒抗原提供了灵敏和特异的方法。
关键词
口蹄疫病毒
单克隆抗体
双抗体夹心ELLSA
抗原检测
Keywords
Foot and mouth disease virus Monoclonal antibody Sandwich ELISA Antigen detection
分类号
S854.43 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
抗伪狂犬病毒Ea株单克隆抗体的制备及鉴定
被引量:
4
4
作者
汪招雄
何启盖
黄红亮
刘正飞
陈焕春
机构
华中农业大学动物医学院预防兽医学湖北省重点实验室
农业
微生物学国家
重点
实验室
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期222-225,共4页
基金
国家"十.五"重大科技攻关专项-食品安全关键技术项目(2002BA514A-18)资助
文摘
将伪狂犬病毒Ea株纯化后免疫雌性Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/O的骨髓瘤细胞融合,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)进行筛选,获得了2株抗PRV的单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3G7E3和4A6F5,其细胞培养上清及小鼠腹水效价(ELISA)分别为1:212、1:212及1:100×212、1:100×212。特异性试验和免疫荧光结果显示,3G7E3和4A6F5仅与PRV反应,而与PPV、PRRSV、JEV和HCV等病毒不发生交叉反应;用单抗建立的夹心ELISA试验能检出伪狂犬病毒。表明本研究所获得的2株单抗是PRV特异性的。这2株分泌抗PRV单抗的杂交瘤细胞株的获得为进一步建立准确快速的抗原检测方法奠定了基础。
关键词
伪狂犬病毒Ea株
单克隆抗体
间接免疫荧光试验
Keywords
PRV Ea strain
monoclonal antibodies (MAbs)
indirect immunofluorescence assay (IFA)
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
Q813 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
梅花鹿γ-干扰素在牛型结核病中的应用研究进展
5
作者
刘颖
王冰
陈伟
郭爱珍
机构
华中农业大学
农业
微生物学国家
重点
实验室
华中农业大学动物医学院预防兽医学湖北省重点实验室
出处
《现代农业科技》
2009年第23期318-319,323,共3页
基金
国家973项目(2006CB504401)
湖北省自然基金重大项目(2008CDA073)
+1 种基金
艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治科技重大专项(2009ZX10602-14
2008ZX10301)
文摘
梅花鹿γ-干扰素是细胞因子超家族中干扰素家族的特殊重要成员之一,具有广泛的生物学功能。其功能的多样性是通过诱导细胞表达多种蛋白质实现的。对梅花鹿γ-干扰素的诱导与产生、结核病特异性基因、梅花鹿γ-干扰素用于牛型结核病的检测原理及γ-干扰素优劣的研究进展进行综述。
关键词
梅花鹿
Γ-干扰素
结核杆菌
检测原理
Keywords
cervus nippon
IFN-γ
tuberculosis bacillus
diagnostic assay
分类号
S858.25 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪伪狂犬病基因缺失疫苗的制备、安全性、免疫原性、保存期测定及区域试验
何启盖
方六荣
吴斌
刘正飞
吴美洲
肖少波
金梅林
陈焕春
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
12
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职称材料
2
检测伪狂犬病病毒双抗体夹心间接ELISA方法的建立与应用
汪招雄
何启盖
刘丽娜
刘正飞
黄红亮
陈焕春
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
21
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职称材料
3
口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及检测应用
李任峰
何启盖
刘正飞
钱平
阮力
《生物技术通报》
CAS
CSCD
2006
6
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职称材料
4
抗伪狂犬病毒Ea株单克隆抗体的制备及鉴定
汪招雄
何启盖
黄红亮
刘正飞
陈焕春
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
4
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职称材料
5
梅花鹿γ-干扰素在牛型结核病中的应用研究进展
刘颖
王冰
陈伟
郭爱珍
《现代农业科技》
2009
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