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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌flic基因的原核表达与生物学活性分析被引量：1: 1; 作者李任峰田香勤 +4 位作者何启盖王三虎郑玉姝胡建和赵坤《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期103-106,共4页; 以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清I型菌株基因组为模板,根据其鞭毛区与其它细菌高度同源性设计引物,利用PCR方法扩增鞭毛蛋白基因flic片段,将其亚克隆到pMD-18T载体中并进行PCR和酶切鉴定,再将其亚克隆与载体pGEX-kG分别双酶切和连接,构... 展开更多; 关键词猪传染性胸膜肺炎放线杆菌鞭毛蛋白诊断抗原; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌flic基因的克隆表达及生物信息学分析被引量：1: 2; 作者李任峰田香勤 +4 位作者何启盖王自良赵坤李学斌王三虎《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2009年第10期25-30,共6页; 【目的】构建猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actionobacillus pleuropneumoniae,App)鞭毛蛋白(flic)编码基因的重组表达质粒,对其编码蛋白进行生物信息学分析,并将其在原核细胞中进行表达。【方法】利用PCR方法扩增flic基因片段,将其克隆至p... 展开更多; 关键词猪传染性胸膜肺炎放线杆菌 flic基因鞭毛蛋白生物信息学; 在线阅读下载PDF 职称材料

大肠杆菌P4 FliC蛋白结构分析及同源建模被引量：3: 3; 作者李任峰田香勤 +4 位作者何启盖胡建和赵坤李学斌王三虎《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期143-148,共6页; 为了进一步认识大肠杆菌鞭毛蛋白(Escherichia coliFliC)的结构及功能,深入研究细菌鞭毛的生物学特性,采用生物信息学方法,对组成Escherichia coliP4 FliC蛋白质的理化性质、二级结构及三级结构等进行生物信息学分析,并在三级结构的基... 展开更多; 关键词大肠杆菌鞭毛蛋白同源建模; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪胸膜肺炎放线杆菌ApxIIA基因的序列分析及其B细胞表位预测被引量：2: 4; 作者李任峰田香勤 +4 位作者何启盖王自良赵坤李学斌王三虎《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期104-108,116,共6页; 摘要：为了进一步研究猪胸膜肺炎放线杆菌（Actionobacillus pleuropneumoniae，App）ApxⅡA基因的结构和功能，选取GenBank中6株不同App分离株，采用生物信息学方法对其ApxⅡA基因及其编码氨基酸序列进行同源性比对，并选择其中AY23228... 展开更多; 关键词猪胸膜肺炎放线杆菌 ApxIIA基因 B细胞表位; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪传染性胸膜肺炎放线杆菌flic基因的原核表达与生物学活性分析被引量：1: 1; 作者李任峰田香勤何启盖王三虎郑玉姝胡建和赵坤; 机构河南科技学院动物科学学院新乡医学院形态学研究室华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室动物病原分室; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期103-106,共4页; 基金河南科技学院青年科学基金项目(20065053); 文摘以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清I型菌株基因组为模板,根据其鞭毛区与其它细菌高度同源性设计引物,利用PCR方法扩增鞭毛蛋白基因flic片段,将其亚克隆到pMD-18T载体中并进行PCR和酶切鉴定,再将其亚克隆与载体pGEX-kG分别双酶切和连接,构建重组表达载体pGEX-flic,并将其转化大肠杆菌工程菌BL21进行原核表达。结果表明,目的基因片段长度为528bp,在大肠杆菌BL21中获得成功表达,且表达蛋白能与猪抗APP血清发生反应。为进一步研究细菌鞭毛的抗原性及其他功能提供参考。; 关键词猪传染性胸膜肺炎放线杆菌鞭毛蛋白诊断抗原; Keywords Actionobacillus pleuropneumoniae Flagellin Diagnosis antigen; 分类号 S852.61 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪传染性胸膜肺炎放线杆菌flic基因的克隆表达及生物信息学分析被引量：1: 2; 作者李任峰田香勤何启盖王自良赵坤李学斌王三虎; 机构河南科技学院动物科学学院新乡医学院医学研究中心华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室动物病原分室; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2009年第10期25-30,共6页; 基金河南省科技厅科技攻关项目(0524040001); 文摘【目的】构建猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actionobacillus pleuropneumoniae,App)鞭毛蛋白(flic)编码基因的重组表达质粒,对其编码蛋白进行生物信息学分析,并将其在原核细胞中进行表达。【方法】利用PCR方法扩增flic基因片段,将其克隆至pMD-18T载体后测序,利用生物信息学软件对其编码蛋白的二级结构及跨膜区进行预测。构建重组表达质粒pGEX-flic,转化大肠杆菌工程菌BL21,经IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE及Western-blo对表达蛋白进行鉴定。【结果】获得的目的基因片段长度为528 bp,测序表明其序列与GenBank公布的一致;软件预测结果显示,该蛋白具有多个明显的二级结构成分及跨膜区;SDS-PAGE检测表明,在约50 ku处有一特异性条带;Western-blot检测表明,表达蛋白具有良好的抗原活性。【结论】成功获得了App的flic基因,其编码的蛋白质具有较多的α螺旋区和无规则卷曲区域,表达的鞭毛蛋白具有生物学活性。; 关键词猪传染性胸膜肺炎放线杆菌 flic基因鞭毛蛋白生物信息学; Keywords Actionobacillus pleuropneumoniae f ilc gene flagellin bio-informatics; 分类号 S828.286.3 [农业科学—畜牧学] S852.619 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大肠杆菌P4 FliC蛋白结构分析及同源建模被引量：3: 3; 作者李任峰田香勤何启盖胡建和赵坤李学斌王三虎; 机构河南科技学院动物科学学院新乡医学院医学研究中心华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室动物病原分室; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期143-148,共6页; 基金河南省基础与前沿技术研究项目(082300430020) 河南科技学院青年创新基金项目(20065053); 文摘为了进一步认识大肠杆菌鞭毛蛋白(Escherichia coliFliC)的结构及功能,深入研究细菌鞭毛的生物学特性,采用生物信息学方法,对组成Escherichia coliP4 FliC蛋白质的理化性质、二级结构及三级结构等进行生物信息学分析,并在三级结构的基础上进行同源建模。理化性质分析结果表明,E.coliP4 FliC蛋白为酸性结构蛋白,与沙门氏菌鞭毛蛋白性质较为接近,二级结构以α-螺旋和随机卷曲为主要构件,其空间结构与Salmonella typhimurium的3a5xA蛋白相似性较高,以此为模板成功构建了可靠的三维结构分子模型。FliC蛋白为多种细菌的鞭毛蛋白,与细菌的运动功能关系密切,本研究为深入研究细菌的运动机制及致病机理奠定基础。; 关键词大肠杆菌鞭毛蛋白同源建模; Keywords Escherichia coli Flagellin Homology modeling; 分类号 Q936 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪胸膜肺炎放线杆菌ApxIIA基因的序列分析及其B细胞表位预测被引量：2: 4; 作者李任峰田香勤何启盖王自良赵坤李学斌王三虎; 机构河南科技学院动物科学学院新乡医学院医学研究中心华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室动物病原分室; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期104-108,116,共6页; 基金河南省技术与前沿技术研究项目(082300430020) 河南科技学院青年教师创新基金项目(20065053); 文摘摘要：为了进一步研究猪胸膜肺炎放线杆菌（Actionobacillus pleuropneumoniae，App）ApxⅡA基因的结构和功能，选取GenBank中6株不同App分离株，采用生物信息学方法对其ApxⅡA基因及其编码氨基酸序列进行同源性比对，并选择其中AY232288．1菌株（湖北分离株）ApxⅡA基因为研究对象，分析该基因所编码蛋白质的理化性质，并对其可能形成的二级结构及B细胞表位进行预测和分析。结果表明，6株不同App分离株ApxⅡA基因核苷酸及氨基酸序列同源性分别为65．56％和88．42％，在AY232288．1菌株ApxⅡA蛋白的肽链中，745—751和801—807区段可能是其B细胞表位优势区。本研究首次利用生物信息学方法对ApxⅡA基因及其蛋白质结构进行了分析和预测，为ApxⅡA基因功能的深入研究及APP多表住疫苗的设计奠定了基础。; 关键词猪胸膜肺炎放线杆菌 ApxIIA基因 B细胞表位; Keywords ActionobaciUus pleuropneumoniae ApxⅡA gene B cell epitope; 分类号 S852.61 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	猪传染性胸膜肺炎放线杆菌flic基因的原核表达与生物学活性分析	李任峰田香勤何启盖王三虎郑玉姝胡建和赵坤	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	猪传染性胸膜肺炎放线杆菌flic基因的克隆表达及生物信息学分析	李任峰田香勤何启盖王自良赵坤李学斌王三虎	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	大肠杆菌P4 FliC蛋白结构分析及同源建模	李任峰田香勤何启盖胡建和赵坤李学斌王三虎	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2010	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	猪胸膜肺炎放线杆菌ApxIIA基因的序列分析及其B细胞表位预测	李任峰田香勤何启盖王自良赵坤李学斌王三虎	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料