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猪伪狂犬病病毒直接免疫荧光检测方法的建立及初步应用
被引量：
5
1
作者
徐黎晖
彭忠
+3 位作者
赵婷婷
徐守兴
陈焕春
吴斌
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期993-997,共5页
为建立一种快速、敏感、准确的猪伪狂犬病病毒(PRV)直接免疫荧光检测方法(DFM),本研究通过制备并纯化PRV gE蛋白单克隆抗体(MAb),将其标记异硫氰酸荧光素(FITC)后对荧光抗体的最佳工作条件进行摸索;并对荧光抗体的特异性、敏感性、重复...
为建立一种快速、敏感、准确的猪伪狂犬病病毒(PRV)直接免疫荧光检测方法(DFM),本研究通过制备并纯化PRV gE蛋白单克隆抗体(MAb),将其标记异硫氰酸荧光素(FITC)后对荧光抗体的最佳工作条件进行摸索;并对荧光抗体的特异性、敏感性、重复性和稳定性进行测定;应用DFM对从临床收集的83份疑似病料进行检测,同时用PCR检测作为对照,计算符合率。结果显示,本研究制备FITC标记抗体的F/P比值为2.578±0.012,符合标准;荧光抗体的最佳工作条件为:使用固定剂(60%丙酮+40%乙醇)于-20℃固定20 min,抗体工作浓度为15μg/mL,抗体孵育时间为1 h;荧光抗体能在10~7病毒稀释度(1×TCID50)检出阳性信号,与PCV2、PPV、PRRSV、CSFV、PRV Bartha-K61均无交叉反应;批内和批间重复性良好,-20℃保存5个月染色后荧光强度仍稳定;83份临床样品检测结果显示,DFM与PCR的符合率为74.7%,其中淋巴结和扁桃体的符合率较高,分别为85.7%和93.3%。本研究建立的PRV直接免疫荧光检测方法为临床PRV检测和复合诊断奠定基础,适用于临床推广。
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关键词
猪伪狂犬病病毒
单克隆抗体
荧光抗体
直接免疫荧光检测方法
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职称材料
题名
猪伪狂犬病病毒直接免疫荧光检测方法的建立及初步应用
被引量：
5
1
作者
徐黎晖
彭忠
赵婷婷
徐守兴
陈焕春
吴斌
机构
华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室/湖北省生猪健康养殖协同创新中心
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期993-997,共5页
基金
国家科技支撑计划(2015BAD12B04)
文摘
为建立一种快速、敏感、准确的猪伪狂犬病病毒(PRV)直接免疫荧光检测方法(DFM),本研究通过制备并纯化PRV gE蛋白单克隆抗体(MAb),将其标记异硫氰酸荧光素(FITC)后对荧光抗体的最佳工作条件进行摸索;并对荧光抗体的特异性、敏感性、重复性和稳定性进行测定;应用DFM对从临床收集的83份疑似病料进行检测,同时用PCR检测作为对照,计算符合率。结果显示,本研究制备FITC标记抗体的F/P比值为2.578±0.012,符合标准;荧光抗体的最佳工作条件为:使用固定剂(60%丙酮+40%乙醇)于-20℃固定20 min,抗体工作浓度为15μg/mL,抗体孵育时间为1 h;荧光抗体能在10~7病毒稀释度(1×TCID50)检出阳性信号,与PCV2、PPV、PRRSV、CSFV、PRV Bartha-K61均无交叉反应;批内和批间重复性良好,-20℃保存5个月染色后荧光强度仍稳定;83份临床样品检测结果显示,DFM与PCR的符合率为74.7%,其中淋巴结和扁桃体的符合率较高,分别为85.7%和93.3%。本研究建立的PRV直接免疫荧光检测方法为临床PRV检测和复合诊断奠定基础,适用于临床推广。
关键词
猪伪狂犬病病毒
单克隆抗体
荧光抗体
直接免疫荧光检测方法
Keywords
pseudorabies virus
monoclonal antibody
FITC-MAb
direct-immunofluorescence method
分类号
S852.4 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
猪伪狂犬病病毒直接免疫荧光检测方法的建立及初步应用
徐黎晖
彭忠
赵婷婷
徐守兴
陈焕春
吴斌
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
5
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