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猪Suv39h2基因的cDNA克隆及原核表达
1
作者
刘丽娜
彭健
+2 位作者
郑嵘
刘敏
蒋思文
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期611-616,共6页
以人Suv39h2基因mRNA序列为基础,利用"电子克隆"获得猪的部分cDNA序列,并用RT-PCR技术从肌肉组织中扩增得到猪Suv39h2基因1 291 bp的cDNA序列,将其重组于pGEX-KG原核表达载体中,经酶切、序列鉴定正确后,用该重组质粒转化大肠...
以人Suv39h2基因mRNA序列为基础,利用"电子克隆"获得猪的部分cDNA序列,并用RT-PCR技术从肌肉组织中扩增得到猪Suv39h2基因1 291 bp的cDNA序列,将其重组于pGEX-KG原核表达载体中,经酶切、序列鉴定正确后,用该重组质粒转化大肠杆菌BL21,经异丙基B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并用SDS-PAGE电泳进行检测,优化后的最佳条件为IPTG诱导4 h,其浓度为0.7 mmol.L-1,并主要以包涵体的形式存在。Western blotting检测发现在约66 ku处有一条特异带,与预测的大小一致。猪Suv39h2基因的克隆和表达研究,为进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础。
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关键词
组蛋白赖氨酸甲基转移酶
猪Suv39h2基因
克隆
表达
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职称材料
猪ROCK1基因克隆、序列分析及时空表达研究
2
作者
冯小婷
朱记平
+1 位作者
张蕊蕊
李毅
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2018年第3期571-580,共10页
为进一步获得猪肉质性状候选基因Rho相关激酶1(Rho-associated,coiled-coil containing protein kinase1,ROCK1)的序列特征、生物学功能及时空表达规律等信息,本研究通过PCR、SMARTer RACE PCR的方法克隆了猪ROCK1基因,应用生物信息学...
为进一步获得猪肉质性状候选基因Rho相关激酶1(Rho-associated,coiled-coil containing protein kinase1,ROCK1)的序列特征、生物学功能及时空表达规律等信息,本研究通过PCR、SMARTer RACE PCR的方法克隆了猪ROCK1基因,应用生物信息学方法分析该基因的蛋白质序列在不同物种中的进化关系,并采用RT-PCR和实时荧光定量PCR的方法检测其在不同组织和不同猪种背最长肌不同发育阶段的表达。结果显示,ROCK1基因有2个转录本,包含4 065bp的开放阅读框(ORF),编码1 354个氨基酸;猪ROCK1基因ORF序列与人、小鼠和大鼠的ORF序列的同源性分别为95%、91%和91%,相应的氨基酸序列同源性分别为98%、96%和94%,该蛋白在不同物种间高度保守;ROCK1基因的组织分布较广泛,不同发育阶段在同一组织中的表达会发生变化;胚胎期ROCK1基因在梅山猪背最长肌中的表达极显著高于大白猪(P<0.01),出生后ROCK1基因在2个猪种背最长肌中的表达无显著差异(P>0.05)。本试验结果为研究ROCK1基因在猪骨骼肌发育中的生物学功能及其分子机制奠定基础。
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关键词
猪
ROCK1基因
克隆
表达
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职称材料
猪HSD11B1和MyoG基因多态性与妊娠期长短的关系
被引量：
5
3
作者
马志刚
李家连
+5 位作者
郭万虎
潘晚平
王家圣
韩安勤
丁山河
蒋思文
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期689-695,共7页
选择HSD11B1和MyoG2个基因作为影响妊娠期长短的候选基因。在7个中外猪群体中采用PCR-RFLP技术研究了HSD11B1和MyoG2个基因多态性与妊娠期长短的关系。HSD11B1基因的PCR-Bsh1236Ⅰ-RFLP分析结果表明:清平猪、新清平猪母系、大白猪、长...
选择HSD11B1和MyoG2个基因作为影响妊娠期长短的候选基因。在7个中外猪群体中采用PCR-RFLP技术研究了HSD11B1和MyoG2个基因多态性与妊娠期长短的关系。HSD11B1基因的PCR-Bsh1236Ⅰ-RFLP分析结果表明:清平猪、新清平猪母系、大白猪、长白猪、杜洛克猪、中国瘦肉猪新品系DIV1和DIV2系猪群中A等位基因的频率分别为0.538、0.752、0.522、0.941、1.000、0.889和0.594;除DIV2外,HSD11B1不同基因型与妊娠期长短无显著关系(P>0.05)。MyoG基因的PCR-MspⅠ-RFLP分析结果表明:清平猪、新清平猪母系、大白猪、长白猪、杜洛克猪、中国瘦肉猪新品系DIV1和DIV2系猪群中M等位基因的频率分别为1.000、0.534、0.370、0.115、0.094、0.382和0.243;清平猪中只存在MM基因型,其他群体中3种基因型皆有分布;新清平猪母系MM比NN基因型母猪妊娠期要短,且在经产长白猪中差异极显著(P<0.01)。
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关键词
猪
妊娠期
HSD11B1
MYOG
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职称材料
题名
猪Suv39h2基因的cDNA克隆及原核表达
1
作者
刘丽娜
彭健
郑嵘
刘敏
蒋思文
机构
华中农业大学
农业部
猪
遗传
育种
重点
开放实验室
&
农业
动物
遗传
育种与
繁殖
教育部
重点
实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期611-616,共6页
基金
国家"863"计划(2006AA10Z140)
国家支撑计划(2006BAD01A08-07)
湖北省重点项目(2006AA201B24)
文摘
以人Suv39h2基因mRNA序列为基础,利用"电子克隆"获得猪的部分cDNA序列,并用RT-PCR技术从肌肉组织中扩增得到猪Suv39h2基因1 291 bp的cDNA序列,将其重组于pGEX-KG原核表达载体中,经酶切、序列鉴定正确后,用该重组质粒转化大肠杆菌BL21,经异丙基B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并用SDS-PAGE电泳进行检测,优化后的最佳条件为IPTG诱导4 h,其浓度为0.7 mmol.L-1,并主要以包涵体的形式存在。Western blotting检测发现在约66 ku处有一条特异带,与预测的大小一致。猪Suv39h2基因的克隆和表达研究,为进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础。
关键词
组蛋白赖氨酸甲基转移酶
猪Suv39h2基因
克隆
表达
Keywords
Histone Lys methyltransferase
porcine Suv39h2 gene
cloning
expression
分类号
S828 [农业科学—畜牧学]
Q344.13 [生物学—遗传学]
在线阅读
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职称材料
题名
猪ROCK1基因克隆、序列分析及时空表达研究
2
作者
冯小婷
朱记平
张蕊蕊
李毅
机构
武汉生物工程学院应用生物技术研究中心湖北省病毒载体(基因治疗)工程技术研究中心
华中农业大学农业部猪遗传育种重点开放实验室农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2018年第3期571-580,共10页
基金
湖北省教育厅科学技术研究计划指导性项目(B2016301)
文摘
为进一步获得猪肉质性状候选基因Rho相关激酶1(Rho-associated,coiled-coil containing protein kinase1,ROCK1)的序列特征、生物学功能及时空表达规律等信息,本研究通过PCR、SMARTer RACE PCR的方法克隆了猪ROCK1基因,应用生物信息学方法分析该基因的蛋白质序列在不同物种中的进化关系,并采用RT-PCR和实时荧光定量PCR的方法检测其在不同组织和不同猪种背最长肌不同发育阶段的表达。结果显示,ROCK1基因有2个转录本,包含4 065bp的开放阅读框(ORF),编码1 354个氨基酸;猪ROCK1基因ORF序列与人、小鼠和大鼠的ORF序列的同源性分别为95%、91%和91%,相应的氨基酸序列同源性分别为98%、96%和94%,该蛋白在不同物种间高度保守;ROCK1基因的组织分布较广泛,不同发育阶段在同一组织中的表达会发生变化;胚胎期ROCK1基因在梅山猪背最长肌中的表达极显著高于大白猪(P<0.01),出生后ROCK1基因在2个猪种背最长肌中的表达无显著差异(P>0.05)。本试验结果为研究ROCK1基因在猪骨骼肌发育中的生物学功能及其分子机制奠定基础。
关键词
猪
ROCK1基因
克隆
表达
Keywords
porcine
ROCK1 gene
cloning
expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
猪HSD11B1和MyoG基因多态性与妊娠期长短的关系
被引量：
5
3
作者
马志刚
李家连
郭万虎
潘晚平
王家圣
韩安勤
丁山河
蒋思文
机构
华中农业大学
农业部
猪
遗传
育种
重点
开放实验室
＆
农业
动物
遗传
育种与
繁殖
教育部
重点
实验室
当阳市清平种
猪
场
湖北省原种
猪
场
湖北省桑梓湖种
猪
场
湖北省畜牧兽医局
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期689-695,共7页
基金
“十一五”国家科技支撑计划(2006BAD01A08-07)
湖北省重点项目(2005AA206B012006AA201B24)资助
文摘
选择HSD11B1和MyoG2个基因作为影响妊娠期长短的候选基因。在7个中外猪群体中采用PCR-RFLP技术研究了HSD11B1和MyoG2个基因多态性与妊娠期长短的关系。HSD11B1基因的PCR-Bsh1236Ⅰ-RFLP分析结果表明:清平猪、新清平猪母系、大白猪、长白猪、杜洛克猪、中国瘦肉猪新品系DIV1和DIV2系猪群中A等位基因的频率分别为0.538、0.752、0.522、0.941、1.000、0.889和0.594;除DIV2外,HSD11B1不同基因型与妊娠期长短无显著关系(P>0.05)。MyoG基因的PCR-MspⅠ-RFLP分析结果表明:清平猪、新清平猪母系、大白猪、长白猪、杜洛克猪、中国瘦肉猪新品系DIV1和DIV2系猪群中M等位基因的频率分别为1.000、0.534、0.370、0.115、0.094、0.382和0.243;清平猪中只存在MM基因型,其他群体中3种基因型皆有分布;新清平猪母系MM比NN基因型母猪妊娠期要短,且在经产长白猪中差异极显著(P<0.01)。
关键词
猪
妊娠期
HSD11B1
MYOG
Keywords
pig
gestation length
HSD11B1
MyoG
分类号
S828.2 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪Suv39h2基因的cDNA克隆及原核表达
刘丽娜
彭健
郑嵘
刘敏
蒋思文
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
猪ROCK1基因克隆、序列分析及时空表达研究
冯小婷
朱记平
张蕊蕊
李毅
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2018
0
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职称材料
3
猪HSD11B1和MyoG基因多态性与妊娠期长短的关系
马志刚
李家连
郭万虎
潘晚平
王家圣
韩安勤
丁山河
蒋思文
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
5
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