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题名猪Suv39h2基因的cDNA克隆及原核表达
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作者
刘丽娜
彭健
郑嵘
刘敏
蒋思文
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机构
华中农业大学农业部猪遗传育种重点开放实验室&农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室
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出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期611-616,共6页
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基金
国家"863"计划(2006AA10Z140)
国家支撑计划(2006BAD01A08-07)
湖北省重点项目(2006AA201B24)
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文摘
以人Suv39h2基因mRNA序列为基础,利用"电子克隆"获得猪的部分cDNA序列,并用RT-PCR技术从肌肉组织中扩增得到猪Suv39h2基因1 291 bp的cDNA序列,将其重组于pGEX-KG原核表达载体中,经酶切、序列鉴定正确后,用该重组质粒转化大肠杆菌BL21,经异丙基B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并用SDS-PAGE电泳进行检测,优化后的最佳条件为IPTG诱导4 h,其浓度为0.7 mmol.L-1,并主要以包涵体的形式存在。Western blotting检测发现在约66 ku处有一条特异带,与预测的大小一致。猪Suv39h2基因的克隆和表达研究,为进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础。
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关键词
组蛋白赖氨酸甲基转移酶
猪Suv39h2基因
克隆
表达
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Keywords
Histone Lys methyltransferase
porcine Suv39h2 gene
cloning
expression
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分类号
S828
[农业科学—畜牧学]
Q344.13
[生物学—遗传学]
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