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西加毒素小鼠生物学检测法的建立
被引量：
3
1
作者
朱海
郑露
+5 位作者
王爱辉
范放
郭爱珍
李金峰
杨晓夏
赵芳
《动物医学进展》
CSCD
2007年第10期17-22,共6页
旨在建立西加毒素小鼠生物学检测法。采用19 g^21 g的昆明系雄性小鼠,将一系列不同浓度的西加毒素(P-CTX-1)标准溶液通过腹腔注入小鼠体内,观察其中毒症状,确定1个鼠单位(mu)所代表的毒素剂量,并且建立剂量-中间死亡时间曲线。结果表明...
旨在建立西加毒素小鼠生物学检测法。采用19 g^21 g的昆明系雄性小鼠,将一系列不同浓度的西加毒素(P-CTX-1)标准溶液通过腹腔注入小鼠体内,观察其中毒症状,确定1个鼠单位(mu)所代表的毒素剂量,并且建立剂量-中间死亡时间曲线。结果表明对我国昆明系雄性小鼠腹腔注射西加毒素,1个鼠单位所对应的P-CTX-1剂量值约为9.10 ng,其95%可信限为8.67 ng^9.56 ng;剂量-中间死亡时间曲线方程为y=244.9x-1.3937;其中y代表致死时间,x表剂量;将死亡时间t变为时间倒数1/t,对CTX的毒性mu取对数即logmu,得直线回归方程y=1.2076 x-0.047,R2=0.9921,其中y代表西加毒素毒性的对数(logmu),x代表小鼠死亡时间倒数(1/t),R为相关系数。同时利用该方法在0.1、0.2、0.3 ppb 3个浓度水平进行验证试验,结果表明,方法的总体平均回收率为46.58%~50.23%,相对标准偏差范围为1.17%~2.28%。
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关键词
西加毒素
P-CTX-1
小鼠生物法
鼠单位(mu)
LD50
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职称材料
三黄鸡CD154基因的克隆、序列分析与表达
2
作者
方亮
肖少波
+5 位作者
江云波
袁明涛
马朝志
李彬
方六荣
陈焕春
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第10期1032-1037,共6页
CD154在抗原特异的T淋巴细胞和抗原提呈细胞的相互作用中发挥非常重要的作用。利用RT—PCR方法从三黄鸡的外周血单核细胞（PBMC）中克隆了鸡CD154基因全长cDNA，序列分析显示该基因cDNA全长819bp，可编码272个氨基酸。将克隆的鸡CD154全...
CD154在抗原特异的T淋巴细胞和抗原提呈细胞的相互作用中发挥非常重要的作用。利用RT—PCR方法从三黄鸡的外周血单核细胞（PBMC）中克隆了鸡CD154基因全长cDNA，序列分析显示该基因cDNA全长819bp，可编码272个氨基酸。将克隆的鸡CD154全长cDNA克隆到原核表达载体pET-28a中获得表达质粒pET-28a—CD154，转化BL21（DE3）后未检测到特异性表达蛋白。进一步通过PCR获得去除信号肽（1～22aa）和跨膜区（23～46aa）的CD154基因片段（CD154d），并将其克隆到pQE80的6×His下游，在大肠杆菌中成功表达，获得分子量约27ku的融合表达蛋白6×His—CD154d。Western—blot试验证实表达的融合蛋白能与抗6×His的单抗发生特异性反应。同时，将CD154基因全长cDNA插入真核表达载体pEGFP-C1的EGFP基因下游，获得真核表达质粒pEGFP—CD154，转染Hela细胞，荧光显微镜观察发现EGFP—CD154融合蛋白表达在细胞膜上，证实了鸡CD154的膜定位特性。本研究为进一步研究鸡CD154的结构与功能及其免疫佐剂效应奠定了基础。
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关键词
鸡
CD154
克隆
表达
定位
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职称材料
题名
西加毒素小鼠生物学检测法的建立
被引量：
3
1
作者
朱海
郑露
王爱辉
范放
郭爱珍
李金峰
杨晓夏
赵芳
机构
深圳市出入境检验检疫局食品检验检疫技术中心
华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院
出处
《动物医学进展》
CSCD
2007年第10期17-22,共6页
基金
国家质检总局科技项目资助(2006IK126)
文摘
旨在建立西加毒素小鼠生物学检测法。采用19 g^21 g的昆明系雄性小鼠,将一系列不同浓度的西加毒素(P-CTX-1)标准溶液通过腹腔注入小鼠体内,观察其中毒症状,确定1个鼠单位(mu)所代表的毒素剂量,并且建立剂量-中间死亡时间曲线。结果表明对我国昆明系雄性小鼠腹腔注射西加毒素,1个鼠单位所对应的P-CTX-1剂量值约为9.10 ng,其95%可信限为8.67 ng^9.56 ng;剂量-中间死亡时间曲线方程为y=244.9x-1.3937;其中y代表致死时间,x表剂量;将死亡时间t变为时间倒数1/t,对CTX的毒性mu取对数即logmu,得直线回归方程y=1.2076 x-0.047,R2=0.9921,其中y代表西加毒素毒性的对数(logmu),x代表小鼠死亡时间倒数(1/t),R为相关系数。同时利用该方法在0.1、0.2、0.3 ppb 3个浓度水平进行验证试验,结果表明,方法的总体平均回收率为46.58%~50.23%,相对标准偏差范围为1.17%~2.28%。
关键词
西加毒素
P-CTX-1
小鼠生物法
鼠单位(mu)
LD50
Keywords
ciguatoxin
P-CTX-1
mouse bioassay
mouse unit
LD50
分类号
S856.9 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
三黄鸡CD154基因的克隆、序列分析与表达
2
作者
方亮
肖少波
江云波
袁明涛
马朝志
李彬
方六荣
陈焕春
机构
华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院
动物
病毒室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第10期1032-1037,共6页
基金
国家"973"基础研究项目(2005CB523200)
国家科技支撑计划(2006BAD06A04)
文摘
CD154在抗原特异的T淋巴细胞和抗原提呈细胞的相互作用中发挥非常重要的作用。利用RT—PCR方法从三黄鸡的外周血单核细胞（PBMC）中克隆了鸡CD154基因全长cDNA，序列分析显示该基因cDNA全长819bp，可编码272个氨基酸。将克隆的鸡CD154全长cDNA克隆到原核表达载体pET-28a中获得表达质粒pET-28a—CD154，转化BL21（DE3）后未检测到特异性表达蛋白。进一步通过PCR获得去除信号肽（1～22aa）和跨膜区（23～46aa）的CD154基因片段（CD154d），并将其克隆到pQE80的6×His下游，在大肠杆菌中成功表达，获得分子量约27ku的融合表达蛋白6×His—CD154d。Western—blot试验证实表达的融合蛋白能与抗6×His的单抗发生特异性反应。同时，将CD154基因全长cDNA插入真核表达载体pEGFP-C1的EGFP基因下游，获得真核表达质粒pEGFP—CD154，转染Hela细胞，荧光显微镜观察发现EGFP—CD154融合蛋白表达在细胞膜上，证实了鸡CD154的膜定位特性。本研究为进一步研究鸡CD154的结构与功能及其免疫佐剂效应奠定了基础。
关键词
鸡
CD154
克隆
表达
定位
Keywords
chicken
CD154
clone
expression
location
分类号
S831.2 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
西加毒素小鼠生物学检测法的建立
朱海
郑露
王爱辉
范放
郭爱珍
李金峰
杨晓夏
赵芳
《动物医学进展》
CSCD
2007
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
三黄鸡CD154基因的克隆、序列分析与表达
方亮
肖少波
江云波
袁明涛
马朝志
李彬
方六荣
陈焕春
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
0
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已选择
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