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甘蓝型油菜根系可溶性蛋白的提取及双向电泳体系的优化
被引量：
7
1
作者
王振华
王志方
+2 位作者
陈水森
徐芳森
石磊
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期219-224,共6页
以甘蓝型油菜品种青油10号幼苗期根系为材料,采用三氯乙酸/丙酮沉淀法、酚提法及酚提取-甲醇/醋酸铵沉淀法分别提取甘蓝型油菜根系可溶性蛋白。以牛血清蛋白为标样,使用Bradford法测定蛋白质浓度,计算蛋白提取率,并对所提取的蛋白样品...
以甘蓝型油菜品种青油10号幼苗期根系为材料,采用三氯乙酸/丙酮沉淀法、酚提法及酚提取-甲醇/醋酸铵沉淀法分别提取甘蓝型油菜根系可溶性蛋白。以牛血清蛋白为标样,使用Bradford法测定蛋白质浓度,计算蛋白提取率,并对所提取的蛋白样品进行聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）及双向电泳（2-DE）检测,所得2-DE凝胶图片经PD Quest软件分析,分别检测得到644、645、669个蛋白点。对双向电泳条件进行优化,选择改进的酚提法提取蛋白,采用17 cm（pH 5~8）的IPG胶条、蛋白上样量150μg及10%的SDS-PAGE胶含量,可以获得分辨率高、重现性高的2-DE凝胶图片。
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关键词
甘蓝型油菜
根系
蛋白质提取
双向电泳
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职称材料
题名
甘蓝型油菜根系可溶性蛋白的提取及双向电泳体系的优化
被引量：
7
1
作者
王振华
王志方
陈水森
徐芳森
石磊
机构
华中农业大学作物遗传改良国家重点试验室/微量元素研究中心
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期219-224,共6页
基金
教育部高校博士点基金项目(0090146110006)
华中农业大学自主科技创新基金项目(2009SC008)
文摘
以甘蓝型油菜品种青油10号幼苗期根系为材料,采用三氯乙酸/丙酮沉淀法、酚提法及酚提取-甲醇/醋酸铵沉淀法分别提取甘蓝型油菜根系可溶性蛋白。以牛血清蛋白为标样,使用Bradford法测定蛋白质浓度,计算蛋白提取率,并对所提取的蛋白样品进行聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）及双向电泳（2-DE）检测,所得2-DE凝胶图片经PD Quest软件分析,分别检测得到644、645、669个蛋白点。对双向电泳条件进行优化,选择改进的酚提法提取蛋白,采用17 cm（pH 5~8）的IPG胶条、蛋白上样量150μg及10%的SDS-PAGE胶含量,可以获得分辨率高、重现性高的2-DE凝胶图片。
关键词
甘蓝型油菜
根系
蛋白质提取
双向电泳
Keywords
Brassica napus
roots
protein extraction
two-dimensional electrophoresis
分类号
Q945.12 [生物学—植物学]
S511 [农业科学—作物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
甘蓝型油菜根系可溶性蛋白的提取及双向电泳体系的优化
王振华
王志方
陈水森
徐芳森
石磊
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
7
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