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甘蓝型油菜BnaSLY1基因进化分析及功能研究
1
作者
李嘉欣
黄莹莹
+7 位作者
吴潞梅
赵伦
易斌
马朝芝
涂金星
沈金雄
傅廷栋
文静
《作物学报》
CAS
北大核心
2025年第1期44-57,共14页
赤霉素调控植物表皮细胞增长、茎叶伸长以及株型建成。拟南芥SLY1属于F-box蛋白,它通过靶向泛素化赤霉素信号转导路径的负向调控因子——DELLA蛋白来影响植物生长发育,然而油菜中BnaSLY1的基因功能尚未揭示。本研究对BnaSLY1进行了表达...
赤霉素调控植物表皮细胞增长、茎叶伸长以及株型建成。拟南芥SLY1属于F-box蛋白,它通过靶向泛素化赤霉素信号转导路径的负向调控因子——DELLA蛋白来影响植物生长发育,然而油菜中BnaSLY1的基因功能尚未揭示。本研究对BnaSLY1进行了表达特征和进化树分析,利用CRISPR/Cas9技术创制了BnaSLY1不同拷贝数的突变体,结合RNA-Seq技术对BnaSLY1的生物学功能及其对油菜生长发育的影响进行了研究。结果表明,甘蓝型油菜Westar中有2个SLY1同源拷贝BnaA01.SLY1和BnaA06.SLY1,它们表达模式基本相同,为组成型表达基因,其蛋白定位在细胞核,且在不同的油菜品种及十字花科植物间序列保守。与对照相比,单突bnaa01sly1和bnaa06sly1开花时间推迟,株高显著降低,而双突bnasly1还表现出深绿色光叶表型,叶片厚度增加,开花期比单突进一步推迟,株高也进一步降低。RNA-Seq结果显示,双突与Westar之间的差异表达基因显著富集在生长素信号转导路径以及蜡质合成通路,多个开花时间相关基因表达也发生显著变化。本研究表明, BnaSLY1除影响植物株高和开花时间等生长发育进程,还影响表皮蜡质合成,为探索赤霉素信号转导路径在甘蓝型油菜生长发育中的重要作用奠定了理论基础。
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关键词
甘蓝型油菜
BnaSLY1
赤霉素
株型
蜡质合成
开花时间
RNA-SEQ
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职称材料
利用CRISPR/Cas9技术突变BnaMPK6基因降低甘蓝型油菜的耐盐性
被引量:
2
2
作者
张文宣
梁晓梅
+6 位作者
戴成
文静
易斌
涂金星
沈金雄
傅廷栋
马朝芝
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第2期321-331,共11页
甘蓝型油菜是我国一种重要的油料作物。MPK6是一种丝裂原活化蛋白激酶,MAPK级联途径可以被各种胁迫激活,进而调节植物对胁迫的响应,在植物响应非生物胁迫过程中发挥着重要的作用,但在甘蓝型油菜盐胁迫响应过程中的功能还尚不清楚。基因...
甘蓝型油菜是我国一种重要的油料作物。MPK6是一种丝裂原活化蛋白激酶,MAPK级联途径可以被各种胁迫激活,进而调节植物对胁迫的响应,在植物响应非生物胁迫过程中发挥着重要的作用,但在甘蓝型油菜盐胁迫响应过程中的功能还尚不清楚。基因结构和蛋白序列分析表明,MAPK6在十字花科芸薹属植物种间分化相对保守,基因结构相似,蛋白之间均有相同的STKc_TEY_MAPK结构域,与胁迫和生长发育相关。为探究其功能,本研究利用CRISPR/Cas9技术对BnaMPK6基因进行编辑,通过农杆菌介导的方法将BnaMPK6基因转入到甘蓝型油菜中,获得了BnaMPK6基因4个同源拷贝同时突变的材料:cr-bnampk6-13-1和cr-bnampk6-49-1。cr-bnampk6突变体表现出明显的盐敏感性:在100 mmol L^(-1)和150 mmol L^(-1)浓度的NaCl溶液处理下,功能缺失突变体长势明显缓慢,并且株高和鲜重显著低于野生型植株,但根长无明显差异。此外,在盐胁迫下,功能缺失突变体体内的活性氧和丙二醛含量的积累显著高于野生型对照,脯氨酸含量也明显高于野生型植株。本研究结果表明,BnaMPK6基因在盐水胁迫下正向调控植株的生长和发育,影响甘蓝型油菜的耐盐性。本研究不仅为BnaMPK6基因调控甘蓝型油菜盐胁迫的研究提供了理论基础,而且为甘蓝型油菜耐盐性遗传改良提供了一定的技术支持。
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关键词
甘蓝型油菜
BnaMPK6
CRISPR/Cas9
盐胁迫
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职称材料
甘蓝型油菜盐胁迫响应基因表达谱分析及共表达网络的构建
被引量:
4
3
作者
杨闯
王玲
+5 位作者
全成滔
余良倩
戴成
郭亮
傅廷栋
马朝芝
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第1期237-250,共14页
甘蓝型油菜是重要的油料作物,而盐胁迫是影响油菜生长发育的主要环境条件之一,可能会造成油菜减产、品质下降甚至死亡。本研究利用半冬性油菜ZS11作为试验材料,对盐胁迫处理0、0.25、0.5、1、3、6、12和24h的叶片和根系组织进行转录组测...
甘蓝型油菜是重要的油料作物,而盐胁迫是影响油菜生长发育的主要环境条件之一,可能会造成油菜减产、品质下降甚至死亡。本研究利用半冬性油菜ZS11作为试验材料,对盐胁迫处理0、0.25、0.5、1、3、6、12和24h的叶片和根系组织进行转录组测序,通过测得的90份RNA-seq数据,获得了油菜响应盐胁迫的高分辨率时间动态转录表达谱。相关性分析发现,样本在盐胁迫处理1 h前后具有明显的早期响应与后期响应的聚类差异。利用DESeq2进行差异基因分析,鉴定出根系以及叶片组织响应差异基因分别为20,462个和29,334个,表明油菜叶片组织的响应程度整体上比根系更剧烈。进一步利用WGCNA分别构建根系以及叶片组织响应盐胁迫的基因共表达网络,从中筛选出与盐胁迫早期响应阶段显著相关的tan和yellow模块,以及与盐胁迫后期响应阶段显著相关的green和red模块,对其进行GO富集分析,并从中分别筛选出早期以及后期响应盐胁迫的核心转录因子41个和26个。功能注释显示4个模块中均存在已知的拟南芥同源基因参与不同阶段的盐胁迫响应,还发现BnWRKY46和BnWRKY57等核心基因在505份盐胁迫处理的油菜群体变异数据中具有丰富的SNPs变异和单倍体类型,表明这些核心转录因子可能是油菜响应盐胁迫的关键候选基因。本研究可为甘蓝型油菜耐盐性改良提供可靠的数据参考和候选基因资源。
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关键词
甘蓝型油菜
RNA-SEQ
盐胁迫
WGCNA
基因共表达网络
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职称材料
耐亚磷酸盐除草剂转基因油菜的创建和抗性评价
被引量:
1
4
作者
钟元
朱天宇
+1 位作者
戴成
马朝芝
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期1158-1171,共14页
在油菜的生产过程中,大量伴生的杂草严重影响了其产量和品质。由于近年来田间抗除草剂杂草数量的增加,除草剂的选择正在迅速减少,这影响了未来农业的可持续发展。植物可以通过正磷酸盐(Pi)转运蛋白吸收亚磷酸盐(Phi),但Phi不能被代谢为...
在油菜的生产过程中,大量伴生的杂草严重影响了其产量和品质。由于近年来田间抗除草剂杂草数量的增加,除草剂的选择正在迅速减少,这影响了未来农业的可持续发展。植物可以通过正磷酸盐(Pi)转运蛋白吸收亚磷酸盐(Phi),但Phi不能被代谢为作物的磷肥料,导致植物生长受到抑制。此前,从罗尔斯通菌属(Raltsonia sp.strain 4506)中分离出了ptxD(phosphite dehydrogenase)基因,其139位的酪氨酸突变为谷氨酰胺(Y139Q)的突变蛋白ptxD_(Q)催化Phi转化为Pi的活性显著提高。为了评价ptxD_(Q)/Phi系统对甘蓝型油菜杂草的防治效果,本研究获得了带有密码子优化的ptxD(Y139Q,ptxD_(Q))基因的转基因甘蓝型油菜。在以Phi为单一磷元素的条件下,ptxD_(Q)转基因油菜可以正常生长,体内Pi含量显著提高,且Pi饥饿响应基因(PT21和PT24等)的表达水平被显著抑制,说明ptxD_(Q)在油菜体内可以促使Phi转化为Pi。此外,ptxD_(Q)转基因油菜具有比野生型油菜和单子叶杂草(狗尾草)更强的生长竞争优势。综上所述,ptxD_(Q)/Phi是一种有效的油菜磷利用和杂草控制系统,既可以抑制杂草的生长,又可以为作物提供充足的Pi营养,从而提高了农业的可持续性。
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关键词
甘蓝型油菜
除草剂
亚磷酸盐
ptxD_(Q)
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职称材料
题名
甘蓝型油菜BnaSLY1基因进化分析及功能研究
1
作者
李嘉欣
黄莹莹
吴潞梅
赵伦
易斌
马朝芝
涂金星
沈金雄
傅廷栋
文静
机构
华中农业大学作物遗传改良全国重点实验室/国家油菜工程技术研究中心/洪山实验室
出处
《作物学报》
CAS
北大核心
2025年第1期44-57,共14页
基金
国家自然科学基金项目(31771831,31000721)
财政部和农业农村部国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-12)资助。
文摘
赤霉素调控植物表皮细胞增长、茎叶伸长以及株型建成。拟南芥SLY1属于F-box蛋白,它通过靶向泛素化赤霉素信号转导路径的负向调控因子——DELLA蛋白来影响植物生长发育,然而油菜中BnaSLY1的基因功能尚未揭示。本研究对BnaSLY1进行了表达特征和进化树分析,利用CRISPR/Cas9技术创制了BnaSLY1不同拷贝数的突变体,结合RNA-Seq技术对BnaSLY1的生物学功能及其对油菜生长发育的影响进行了研究。结果表明,甘蓝型油菜Westar中有2个SLY1同源拷贝BnaA01.SLY1和BnaA06.SLY1,它们表达模式基本相同,为组成型表达基因,其蛋白定位在细胞核,且在不同的油菜品种及十字花科植物间序列保守。与对照相比,单突bnaa01sly1和bnaa06sly1开花时间推迟,株高显著降低,而双突bnasly1还表现出深绿色光叶表型,叶片厚度增加,开花期比单突进一步推迟,株高也进一步降低。RNA-Seq结果显示,双突与Westar之间的差异表达基因显著富集在生长素信号转导路径以及蜡质合成通路,多个开花时间相关基因表达也发生显著变化。本研究表明, BnaSLY1除影响植物株高和开花时间等生长发育进程,还影响表皮蜡质合成,为探索赤霉素信号转导路径在甘蓝型油菜生长发育中的重要作用奠定了理论基础。
关键词
甘蓝型油菜
BnaSLY1
赤霉素
株型
蜡质合成
开花时间
RNA-SEQ
Keywords
Brassica napus L.
BnaSLY1
gibberellin
plant architecture
wax biosynthesis
flowering time
RNA-seq
分类号
S565.4 [农业科学—作物学]
在线阅读
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职称材料
题名
利用CRISPR/Cas9技术突变BnaMPK6基因降低甘蓝型油菜的耐盐性
被引量:
2
2
作者
张文宣
梁晓梅
戴成
文静
易斌
涂金星
沈金雄
傅廷栋
马朝芝
机构
华中农业大学作物遗传改良全国重点实验室/国家油菜工程技术研究中心/洪山实验室
出处
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第2期321-331,共11页
基金
中央高校基本科研业务费专项基金(2662020ZKPY020)
国家重点研发计划项目(2020BBB061)资助。
文摘
甘蓝型油菜是我国一种重要的油料作物。MPK6是一种丝裂原活化蛋白激酶,MAPK级联途径可以被各种胁迫激活,进而调节植物对胁迫的响应,在植物响应非生物胁迫过程中发挥着重要的作用,但在甘蓝型油菜盐胁迫响应过程中的功能还尚不清楚。基因结构和蛋白序列分析表明,MAPK6在十字花科芸薹属植物种间分化相对保守,基因结构相似,蛋白之间均有相同的STKc_TEY_MAPK结构域,与胁迫和生长发育相关。为探究其功能,本研究利用CRISPR/Cas9技术对BnaMPK6基因进行编辑,通过农杆菌介导的方法将BnaMPK6基因转入到甘蓝型油菜中,获得了BnaMPK6基因4个同源拷贝同时突变的材料:cr-bnampk6-13-1和cr-bnampk6-49-1。cr-bnampk6突变体表现出明显的盐敏感性:在100 mmol L^(-1)和150 mmol L^(-1)浓度的NaCl溶液处理下,功能缺失突变体长势明显缓慢,并且株高和鲜重显著低于野生型植株,但根长无明显差异。此外,在盐胁迫下,功能缺失突变体体内的活性氧和丙二醛含量的积累显著高于野生型对照,脯氨酸含量也明显高于野生型植株。本研究结果表明,BnaMPK6基因在盐水胁迫下正向调控植株的生长和发育,影响甘蓝型油菜的耐盐性。本研究不仅为BnaMPK6基因调控甘蓝型油菜盐胁迫的研究提供了理论基础,而且为甘蓝型油菜耐盐性遗传改良提供了一定的技术支持。
关键词
甘蓝型油菜
BnaMPK6
CRISPR/Cas9
盐胁迫
Keywords
Brassica napus L.
BnaMPK6
CRISPR/Cas9
salt stress
分类号
S565.4 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
甘蓝型油菜盐胁迫响应基因表达谱分析及共表达网络的构建
被引量:
4
3
作者
杨闯
王玲
全成滔
余良倩
戴成
郭亮
傅廷栋
马朝芝
机构
华中农业大学作物遗传改良全国重点实验室/国家油菜工程技术研究中心/洪山实验室
出处
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第1期237-250,共14页
基金
国家重点研发计划项目(2021YFD160014101-02)
湖北省重点研发计划项目(2020BBB061)资助
+1 种基金
supported by the National Key Research and Development Program of China(2021YFD160014101-02)
the National Key Research and Development Program of Hubei Province(2020BBB061)。
文摘
甘蓝型油菜是重要的油料作物,而盐胁迫是影响油菜生长发育的主要环境条件之一,可能会造成油菜减产、品质下降甚至死亡。本研究利用半冬性油菜ZS11作为试验材料,对盐胁迫处理0、0.25、0.5、1、3、6、12和24h的叶片和根系组织进行转录组测序,通过测得的90份RNA-seq数据,获得了油菜响应盐胁迫的高分辨率时间动态转录表达谱。相关性分析发现,样本在盐胁迫处理1 h前后具有明显的早期响应与后期响应的聚类差异。利用DESeq2进行差异基因分析,鉴定出根系以及叶片组织响应差异基因分别为20,462个和29,334个,表明油菜叶片组织的响应程度整体上比根系更剧烈。进一步利用WGCNA分别构建根系以及叶片组织响应盐胁迫的基因共表达网络,从中筛选出与盐胁迫早期响应阶段显著相关的tan和yellow模块,以及与盐胁迫后期响应阶段显著相关的green和red模块,对其进行GO富集分析,并从中分别筛选出早期以及后期响应盐胁迫的核心转录因子41个和26个。功能注释显示4个模块中均存在已知的拟南芥同源基因参与不同阶段的盐胁迫响应,还发现BnWRKY46和BnWRKY57等核心基因在505份盐胁迫处理的油菜群体变异数据中具有丰富的SNPs变异和单倍体类型,表明这些核心转录因子可能是油菜响应盐胁迫的关键候选基因。本研究可为甘蓝型油菜耐盐性改良提供可靠的数据参考和候选基因资源。
关键词
甘蓝型油菜
RNA-SEQ
盐胁迫
WGCNA
基因共表达网络
Keywords
Brassica napus L.
RNA-seq
salt stress
WGCNA
gene co-expression networks
分类号
S565.4 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
耐亚磷酸盐除草剂转基因油菜的创建和抗性评价
被引量:
1
4
作者
钟元
朱天宇
戴成
马朝芝
机构
华中农业大学作物遗传改良全国重点实验室/国家油菜工程技术研究中心/洪山实验室
出处
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期1158-1171,共14页
基金
国家自然科学基金项目(32072105)资助。
文摘
在油菜的生产过程中,大量伴生的杂草严重影响了其产量和品质。由于近年来田间抗除草剂杂草数量的增加,除草剂的选择正在迅速减少,这影响了未来农业的可持续发展。植物可以通过正磷酸盐(Pi)转运蛋白吸收亚磷酸盐(Phi),但Phi不能被代谢为作物的磷肥料,导致植物生长受到抑制。此前,从罗尔斯通菌属(Raltsonia sp.strain 4506)中分离出了ptxD(phosphite dehydrogenase)基因,其139位的酪氨酸突变为谷氨酰胺(Y139Q)的突变蛋白ptxD_(Q)催化Phi转化为Pi的活性显著提高。为了评价ptxD_(Q)/Phi系统对甘蓝型油菜杂草的防治效果,本研究获得了带有密码子优化的ptxD(Y139Q,ptxD_(Q))基因的转基因甘蓝型油菜。在以Phi为单一磷元素的条件下,ptxD_(Q)转基因油菜可以正常生长,体内Pi含量显著提高,且Pi饥饿响应基因(PT21和PT24等)的表达水平被显著抑制,说明ptxD_(Q)在油菜体内可以促使Phi转化为Pi。此外,ptxD_(Q)转基因油菜具有比野生型油菜和单子叶杂草(狗尾草)更强的生长竞争优势。综上所述,ptxD_(Q)/Phi是一种有效的油菜磷利用和杂草控制系统,既可以抑制杂草的生长,又可以为作物提供充足的Pi营养,从而提高了农业的可持续性。
关键词
甘蓝型油菜
除草剂
亚磷酸盐
ptxD_(Q)
Keywords
Brassica napus
herbicide
phosphite
ptxD_(Q)
分类号
S565.4 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
甘蓝型油菜BnaSLY1基因进化分析及功能研究
李嘉欣
黄莹莹
吴潞梅
赵伦
易斌
马朝芝
涂金星
沈金雄
傅廷栋
文静
《作物学报》
CAS
北大核心
2025
0
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职称材料
2
利用CRISPR/Cas9技术突变BnaMPK6基因降低甘蓝型油菜的耐盐性
张文宣
梁晓梅
戴成
文静
易斌
涂金星
沈金雄
傅廷栋
马朝芝
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
2
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职称材料
3
甘蓝型油菜盐胁迫响应基因表达谱分析及共表达网络的构建
杨闯
王玲
全成滔
余良倩
戴成
郭亮
傅廷栋
马朝芝
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
4
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职称材料
4
耐亚磷酸盐除草剂转基因油菜的创建和抗性评价
钟元
朱天宇
戴成
马朝芝
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
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