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SV40 PolyA序列及其AATAAA信号对上游GFP基因表达及转录终止的影响
被引量：
1
1
作者
李书平
冯晶晶
+2 位作者
王红钢
王秀芳
吕占军
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期113-119,共7页
SV40 PolyA(猴空泡病毒PolyA,简称PolyA)序列是有转录终止作用和使转录的mRNA添加PolyA尾的DNA序列(240 bp),含有AATAAA六核苷酸多腺苷化信号(Polyadenylation signal)。在pEGFP-C1质粒的GFP基因下游插入14个同向串联的Alu序列(Alu14),...
SV40 PolyA(猴空泡病毒PolyA,简称PolyA)序列是有转录终止作用和使转录的mRNA添加PolyA尾的DNA序列(240 bp),含有AATAAA六核苷酸多腺苷化信号(Polyadenylation signal)。在pEGFP-C1质粒的GFP基因下游插入14个同向串联的Alu序列(Alu14),构建pAlu14质粒,瞬时转染HeLa细胞,用Northern blot检测和荧光显微镜观察GFP RNA和GFP蛋白表达,发现Alu串联序列强烈抑制GFP基因表达,该序列没有转录终止作用产生高分子量GFP融合RNA。又在pAlu14质粒GFP基因和Alu串联序列之间按正、反方向插入PolyA序列及去除AATAAA信号的PolyA序列,插入的这些PolyA序列均能部分解除Alu14对GFP基因的抑制作用;去除AATAAA信号的PolyA正、反序列仍然引起转录终止。将PolyA反序(PolyAas)分为4段每段60 bp,中间的2段分别称为2F2R和3F3R,将2F2R或3F3R插在pAlu14质粒的Alu串联序列的上游,随着插入2F2R片段拷贝数的增加转录的GFP融合RNA的分子量增加;2F2R的下游如果依然是2F2R那么2F2R可以支持转录延伸,如果2F2R下游是Alu串联序列则2F2R导致转录终止。无论插入一个3F3R或插入64个3F3R,均产生低分子量GFP RNA。
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关键词
ALU
SV40
POLYA
AATAAA信号
GFP
转录终止
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职称材料
题名
SV40 PolyA序列及其AATAAA信号对上游GFP基因表达及转录终止的影响
被引量：
1
1
作者
李书平
冯晶晶
王红钢
王秀芳
吕占军
机构
河北医科大学实验动物学部遗传研究室
河北省邢台市人民医院检验二科
华东精神卫生康复中心
河南大学医学院生物化学与分子生物学教研室
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期113-119,共7页
基金
河北省自然科学基金项目(编号:C2008001065和C2011206043)资助
文摘
SV40 PolyA(猴空泡病毒PolyA,简称PolyA)序列是有转录终止作用和使转录的mRNA添加PolyA尾的DNA序列(240 bp),含有AATAAA六核苷酸多腺苷化信号(Polyadenylation signal)。在pEGFP-C1质粒的GFP基因下游插入14个同向串联的Alu序列(Alu14),构建pAlu14质粒,瞬时转染HeLa细胞,用Northern blot检测和荧光显微镜观察GFP RNA和GFP蛋白表达,发现Alu串联序列强烈抑制GFP基因表达,该序列没有转录终止作用产生高分子量GFP融合RNA。又在pAlu14质粒GFP基因和Alu串联序列之间按正、反方向插入PolyA序列及去除AATAAA信号的PolyA序列,插入的这些PolyA序列均能部分解除Alu14对GFP基因的抑制作用;去除AATAAA信号的PolyA正、反序列仍然引起转录终止。将PolyA反序(PolyAas)分为4段每段60 bp,中间的2段分别称为2F2R和3F3R,将2F2R或3F3R插在pAlu14质粒的Alu串联序列的上游,随着插入2F2R片段拷贝数的增加转录的GFP融合RNA的分子量增加;2F2R的下游如果依然是2F2R那么2F2R可以支持转录延伸,如果2F2R下游是Alu串联序列则2F2R导致转录终止。无论插入一个3F3R或插入64个3F3R,均产生低分子量GFP RNA。
关键词
ALU
SV40
POLYA
AATAAA信号
GFP
转录终止
Keywords
Alu
SV40 PolyA
AATAAA singal
GFP
transcription termination
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
SV40 PolyA序列及其AATAAA信号对上游GFP基因表达及转录终止的影响
李书平
冯晶晶
王红钢
王秀芳
吕占军
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
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