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基因工程血管抑素3A蛋白的分离纯化
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作者 尹芳 陈国豪 +2 位作者 陆兵 刘叶青 徐殿胜 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期465-469,共5页
在8mol/mL尿素溶液中,以二硫苏糖醇(DTT)为还原剂,对基因工程血管抑素3A包涵体进行溶解实验。结果发现:1.5h后溶解的上清液蛋白浓度达26.2mg/mL。SDS-PAGE电泳扫描结果显示,3A蛋白经过SephadexG75分离后PAGE电泳纯达到100%,该步收率达85... 在8mol/mL尿素溶液中,以二硫苏糖醇(DTT)为还原剂,对基因工程血管抑素3A包涵体进行溶解实验。结果发现:1.5h后溶解的上清液蛋白浓度达26.2mg/mL。SDS-PAGE电泳扫描结果显示,3A蛋白经过SephadexG75分离后PAGE电泳纯达到100%,该步收率达85.82%,相对分子质量为10ku。采用分步稀释法对其进行复性,所获复性3A蛋白经MTT法检测表明:3A蛋白浓度为0.1μg/mL时,对内皮细胞的生长抑制率为93.4%。 展开更多
关键词 3A蛋白 包涵体 复性 分离纯化
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甲醇利用型细菌发酵生产吡咯喹啉醌的培养条件 被引量:9
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作者 尹芳 陆兵 +1 位作者 陈国豪 徐殿胜 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期227-229,233,共4页
以甲醇为唯一碳源,对生丝微菌TH205进行培养,研究了甲醇流加速度、Fe2+浓度对细胞生长及吡咯喹啉醌(PQQ)表达量的影响。结果表明:培养基中添加浓度为7μg/mL的Fe2+,并控制甲醇的流加速度使培养基中甲醇浓度为1mL/L时,细胞的生长情况较好... 以甲醇为唯一碳源,对生丝微菌TH205进行培养,研究了甲醇流加速度、Fe2+浓度对细胞生长及吡咯喹啉醌(PQQ)表达量的影响。结果表明:培养基中添加浓度为7μg/mL的Fe2+,并控制甲醇的流加速度使培养基中甲醇浓度为1mL/L时,细胞的生长情况较好,且此时PQQ的发酵产量为26.6μg/mL。 展开更多
关键词 吡咯喹啉醌 生丝微菌 甲醇 FE^2+ 发酵
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梧桐花粉主要变应原的分离纯化 被引量:3
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作者 刘叶青 崔玉敏 +1 位作者 张秀萍 陈国豪 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期357-360,共4页
以离子交换和凝胶过滤层析对梧桐花粉变应原进行分离和纯化。采用生物素 -链霉亲和素酶联免疫吸附分析法 ( BSA- ELISA)测定其抗原活性 ,得到两个具高活性的单一变应原组分 PT13和 PT53 。经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得它们的分子质量... 以离子交换和凝胶过滤层析对梧桐花粉变应原进行分离和纯化。采用生物素 -链霉亲和素酶联免疫吸附分析法 ( BSA- ELISA)测定其抗原活性 ,得到两个具高活性的单一变应原组分 PT13和 PT53 。经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得它们的分子质量分别为 2 0 ku和 1 展开更多
关键词 梧桐花粉 变应原 离子交换层析 凝胶过滤层析 分离 纯化 抗原活性 分子量
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重组人酸性成纤维细胞生长因子的分离纯化
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作者 刘叶青 徐殿胜 +2 位作者 曹学君 桑玉英 张秀萍 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期361-363,378,共4页
采用肝素 - sepharose亲和层析和 Sephadex G- 1 0 0凝胶过滤层析法 ,从含 ha FGF基因重组体的大肠杆菌菌体中分离纯化得到人酸性成纤维细胞生长因子 ( rha FGF)。 SDS- PAGE,IEF电泳检测均为单一谱带 ,HPLC层析显示单一蛋白峰。 SDS- P... 采用肝素 - sepharose亲和层析和 Sephadex G- 1 0 0凝胶过滤层析法 ,从含 ha FGF基因重组体的大肠杆菌菌体中分离纯化得到人酸性成纤维细胞生长因子 ( rha FGF)。 SDS- PAGE,IEF电泳检测均为单一谱带 ,HPLC层析显示单一蛋白峰。 SDS- PAGE测定 rha FGF分子质量为 1 6.67ku,IEF测定等电点 p I为 4.8,并用 Edman降解法测定了 N-末端氨基酸序列。Balb/ c3T3细胞培养法测定纯化的 rha FGF生物活性 ED50 为 6μg/ L。 展开更多
关键词 人酸性成纤维细胞生长因子 肝素亲和层析 凝胶过滤 分离纯化 多肽类细胞生长因子 细胞分裂
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