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编码弓形虫表面抗原P30基因的克隆及在E.coli中的表达 被引量:1
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作者 占国清 吴少庭 +3 位作者 李国光 高世同 林敏 郑春福 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第3期31-33,共3页
目的 构建编码弓形虫RH株表面抗原P30基因重组表达质粒 ,初步观察P30基因在E coli表达。方法 将P30基因定向克隆到分支杆菌 -大肠杆菌穿梭表达质粒热休克蛋白 70 (hsp70 )起动基因的下游的多克隆位点 ,构建重组表达质粒pBCG -P30 ;采... 目的 构建编码弓形虫RH株表面抗原P30基因重组表达质粒 ,初步观察P30基因在E coli表达。方法 将P30基因定向克隆到分支杆菌 -大肠杆菌穿梭表达质粒热休克蛋白 70 (hsp70 )起动基因的下游的多克隆位点 ,构建重组表达质粒pBCG -P30 ;采用亚克隆技术 ,将含P30和hsp70起动基因的复合片段 ,插入表达载体 pBK -CMV质粒 ,转化大肠杆菌DH5α ,在卡那霉素阳性LB培养基平板筛选阳性重组子 ,并经双酶切及PCR扩增鉴定。重组质粒 pBK -P30转化大肠杆菌 ,IPTG诱导表达后进行SDS -PAGE和Westernboltting分析。 结果  1)阳性重组质粒 pBCG -P30、pBK -P30经酶切和PCR鉴定 ,与预期的结果相符合。 2 )序列测定证实克隆的基因为编码P30抗原的基因。 3)P30基因在大肠杆菌诱导表达后获得4 5kDa融合蛋白 ,此抗原未被弓形虫高免兔血清识别。结论 成功构建编码弓形虫表面抗原P30重组表达质粒 ,并在大肠杆菌中获得表达 。 展开更多
关键词 编码弓形虫 表面抗原 P30基因 克隆 E.COLI 表达 基因重组 弓形虫
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拉米夫定治疗乙型肝炎肝硬化失代偿期42例 被引量:1
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作者 江山 占国清 +1 位作者 尤世刚 朱琳 《医药导报》 CAS 2007年第12期1433-1434,共2页
目的观察拉米夫定治疗乙型肝炎肝硬化失代偿期的疗效。方法将76例慢性乙型肝炎肝硬化失代偿期患者分为对照组34例,给予还原性谷胱甘肽、门冬氨酸钾镁、维生素K1、清蛋白、复方氨基酸、益肝灵等护肝药物,并根据病情给予利尿和抗感染等综... 目的观察拉米夫定治疗乙型肝炎肝硬化失代偿期的疗效。方法将76例慢性乙型肝炎肝硬化失代偿期患者分为对照组34例,给予还原性谷胱甘肽、门冬氨酸钾镁、维生素K1、清蛋白、复方氨基酸、益肝灵等护肝药物,并根据病情给予利尿和抗感染等综合治疗,疗程6个月;治疗组42例,除上述治疗外,给予拉米夫定100 mg,qd,po,疗程6个月。两组分别治疗前、治疗后3和6个月检测肝功能、凝血功能、HBV-DNA定量。结果治疗6个月后,治疗组较对照组丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(T-BiL)、凝血时间(PT)、HBV-DNA定量及Child-pugh评分等均显著降低(P<0.01),同时清蛋白较对照组升高,但差异无显著性(P>0.05)。球蛋白降低、凝血活动度(PTA)升高,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。结论拉米夫定治疗乙型肝炎肝硬化失代偿期能有效抑制病毒复制,减轻肝脏炎症变化,改善患者肝功能及凝血功能。 展开更多
关键词 拉米夫定 肝硬化 失代偿期 肝炎 乙型
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