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题名美洲锦鳚抗冻蛋白的表达与特性分析
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作者
陈莹
赵庆春
吴琼
胡北
许子华
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机构
中国人民解放军北部战区总医院药学部实验室
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出处
《贵州农业科学》
CAS
2021年第3期70-74,共5页
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基金
辽宁省自然科学基金项目“基于仿生学-抗冻蛋白的重组表达及性能研究”(201602784)。
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文摘
【目的】构建美洲锦鳚抗冻蛋白低温表达体系,为探索寒冷损伤防治的新方法奠定理论基础。【方法】将含美洲锦鳚抗冻蛋白(AFP)基因的重组质粒转化E.coli BL21(DE3),优化诱导条件,利用亲和层析对重组蛋白His-AFP进行分离纯化,对纯化的蛋白进行质谱(MALDI-TOF-TOF)鉴定。采用邻接法(Neighbor-joining)构建系统进化树,根据结构、机制、活性等性质比较分析鱼类抗冻蛋白特性。【结果】美洲锦鳚抗冻蛋白的低温最佳诱导温度为18℃,IPTG加入终浓度为0.1mmol/L。质谱鉴定纯化的蛋白为美洲锦鳚抗冻蛋白。美洲锦鳚AFP与大西洋狼鱼(Anarhichas lupus)、大西洋鲱(Clupea harengus)、鳜鱼(Siniperca chuatsi)等的亲缘关系较近,而与其他鱼类的亲缘关系较远。【结论】研究成功构建了美洲锦鳚抗冻蛋白的低温表达系统,即最佳诱导温度为18℃,IPTG加入终浓度为0.1mmol/L。
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关键词
美洲锦鳚
抗冻蛋白
表达
特性
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Keywords
Zoarces americanus
antifreeze protein
expression
characteristic
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分类号
S91
[农业科学—水产科学]
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