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基于特异引物的葡萄灰霉病检测体系的建立及应用
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作者 李欢欢 苏倩 +1 位作者 吴阳 于淑坤 《安徽农业科学》 2025年第16期92-96,120,共6页
[目的]建立葡萄灰霉病的快速检测体系。[方法]以灰霉菌的RNA聚合酶Ⅱ大亚基基因(RPB2)序列为检测靶标,设计并筛选特异性引物,通过聚合酶链式反应技术(PCR),建立基于特异引物的葡萄灰霉病检测体系,对引物的特异性、准确性、灵敏性进行验... [目的]建立葡萄灰霉病的快速检测体系。[方法]以灰霉菌的RNA聚合酶Ⅱ大亚基基因(RPB2)序列为检测靶标,设计并筛选特异性引物,通过聚合酶链式反应技术(PCR),建立基于特异引物的葡萄灰霉病检测体系,对引物的特异性、准确性、灵敏性进行验证。[结果]引物能从15种真菌DNA中特异检测出灰霉菌;能从发病的葡萄果实中检测出灰霉菌;能在葡萄感染灰霉菌24 h后检测出条带,最低检出限为4 pg。[结论]建立了一种基于特异引物的具有较好特异性、准确性、灵敏性的葡萄灰霉病检测体系。 展开更多
关键词 灰霉菌 特异性引物 快速检测 准确性 灵敏性
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枸杞面包复合改良剂优化及其品质的主成分分析法多指标评价 被引量:11
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作者 张怀予 沈世爽 +4 位作者 张浩 林勤 向爱源 蒲晓菊 王军节 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第13期232-241,共10页
为探讨改良剂对枸杞面包烘焙品质的影响,通过单因素实验结合响应面设计,优化复合改良剂的最佳配方,并通过主成分分析(PCA)法对改良组枸杞面包、枸杞组和空白组面包的品质进行量化比较。结果表明,复合改良剂最佳配方:以面粉为基重,谷朊粉... 为探讨改良剂对枸杞面包烘焙品质的影响,通过单因素实验结合响应面设计,优化复合改良剂的最佳配方,并通过主成分分析(PCA)法对改良组枸杞面包、枸杞组和空白组面包的品质进行量化比较。结果表明,复合改良剂最佳配方:以面粉为基重,谷朊粉2.0g/100g、硬脂酰乳酸钠0.4g/100g、Vc16.4mg/100g、葡萄糖氧化酶19.5mg/100g,且以此配方烘制的改良组面包的比容与高径比分别是空白组的1.34和1.11倍、枸杞组的1.06和1.15倍;贮藏期间改良组面包的水分散失速率、硬度上升速率都显著低于空白组与枸杞组;PCA显示,空白组与枸杞组在贮藏3d后,其弹柔性、黏附性、面包外观、组织结构等品质开始下降,硬度和内聚性显著增加,表皮色泽变暗。改良组面包在弹性、水分含量、高径比、比容等方面具有较好的品质,且与空白组和枸杞组有明显的区分。本研究对枸杞营养面包开发具有实践指导意义。 展开更多
关键词 枸杞面包 响应面设计 复合型改良剂 品质 主成分分析(PCA)
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适用于蛋白质组分析的粉红单端孢菌蛋白提取方法的建立 被引量:3
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作者 王鹏 王军节 李贞彪 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2019年第3期209-216,共8页
为了优化一种适用于粉红单端孢菌双向电泳的蛋白质提取方法,以期为蛋白质组学水平研究粉红单端孢菌的致病机制奠定基础。以分离纯化后的粉红单端孢菌为试验材料,分别采用超声-TCA-丙酮、超声-磷酸-TCA-丙酮、超声-SDS、超声-TCA/丙酮-酚... 为了优化一种适用于粉红单端孢菌双向电泳的蛋白质提取方法,以期为蛋白质组学水平研究粉红单端孢菌的致病机制奠定基础。以分离纯化后的粉红单端孢菌为试验材料,分别采用超声-TCA-丙酮、超声-磷酸-TCA-丙酮、超声-SDS、超声-TCA/丙酮-酚/SDS联合抽提和TCA/丙酮-酚/SDS联合抽提等5种方法提取菌体蛋白质,通过对比分析蛋白质含量以及纯度筛选出2种较好的提取方法。在筛选聚丙烯酰胺电泳凝胶浓度的基础上,再通过双向电泳对比分析,得出最佳的蛋白质提取方法。结果表明,12%的聚丙烯酰胺凝胶浓度获得的单向电泳图谱背景清晰且无严重的拖尾现象,超声-TCA/丙酮-酚/SDS联合抽提法获得蛋白样品的质量浓度和含量分别为6.650mg/mL和2.993mg/g,该法提取蛋白通过SDS-PAGE分析条带清晰,双向电泳分析可获得1238个独立清晰的蛋白点。由此可知,超声-TCA/丙酮-酚/SDS联合抽提法获得的粉红单端孢菌体蛋白适合于双向电泳分析及蛋白质组学研究。 展开更多
关键词 粉红单端孢 蛋白质组 蛋白质提取 双向电泳
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适用于双向电泳分析的链格孢菌体蛋白提取方法的筛选 被引量:1
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作者 李贞彪 王军节 王鹏 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期138-144,共7页
为筛选出一套适用于双向电泳分析的链格孢菌蛋白的提取方法,以该菌为研究材料,首先采用TCA-丙酮法、磷酸-TCA-丙酮法、SDS提取法和TCA/丙酮-SDS/酚抽提法分别提取菌丝蛋白质,然后进行蛋白质浓度的测定和单向SDS-PAGE试验,并建立双向电... 为筛选出一套适用于双向电泳分析的链格孢菌蛋白的提取方法,以该菌为研究材料,首先采用TCA-丙酮法、磷酸-TCA-丙酮法、SDS提取法和TCA/丙酮-SDS/酚抽提法分别提取菌丝蛋白质,然后进行蛋白质浓度的测定和单向SDS-PAGE试验,并建立双向电泳体系。结果表明:TCA/丙酮-SDS/酚抽提法所获得的蛋白质浓度为15.9 mg/mL,分别是其他三种方法所得蛋白浓度的2.64、4.61和1.43倍;SDS-PAGE图谱中形成的条带数目最多、丰度最好;所获得的2-DE图谱背景清晰干净,无明显的横纵条纹,分辨率高,可辨别的蛋白质点数为1 138个,是TCA-丙酮法所分离蛋白点数的1.89倍。由此可知,TCA/丙酮-SDS/酚抽提法为链格孢菌蛋白提取的最优方法,该方法所提取的蛋白质适用于双向电泳分析及后续的蛋白质组学研究。 展开更多
关键词 链格孢 采后病害 蛋白质提取 双向电泳 TCA/丙酮-SDS/酚抽提法
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普鲁兰多糖涂膜对鲜切苹果品质的影响
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作者 于淑坤 王金晶 +2 位作者 罗进 向玥 曹晓虹 《安徽农业科学》 CAS 2023年第17期150-153,157,共5页
以鲜切“富士”苹果为试材,采用浓度为0.5%、1.0%、1.5%的普鲁兰多糖浸泡处理,探究普鲁兰多糖涂膜对鲜切“富士”苹果贮藏品质的影响,从硬度、失重率、色泽、糖酸比、维生素C含量、多酚氧化酶活性、丙二醛含量、菌落总数等方面评价对鲜... 以鲜切“富士”苹果为试材,采用浓度为0.5%、1.0%、1.5%的普鲁兰多糖浸泡处理,探究普鲁兰多糖涂膜对鲜切“富士”苹果贮藏品质的影响,从硬度、失重率、色泽、糖酸比、维生素C含量、多酚氧化酶活性、丙二醛含量、菌落总数等方面评价对鲜切苹果的保鲜效果。结果表明,适当浓度的普鲁兰多糖涂膜可延缓鲜切苹果硬度下降,减少水分和酸性成分的流失,减缓褐变程度和维生素C含量的下降,抑制苹果表面微生物的繁殖,较好地维持了鲜切苹果的感官品质。在研究的3个浓度中,在4℃冷藏条件下1.0%普鲁兰多糖处理对鲜切苹果的保鲜效果较好。 展开更多
关键词 鲜切苹果 普鲁兰多糖 涂膜 品质
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