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题名应用巢式PCR对猪胚胎微量细胞性别的鉴定方法
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作者
刘龑
徐蕴博
张琦
徐倩倩
尹智
刘忠华
翁晓刚
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机构
东北农业大学生命科学学院
北方寒区猪智能化繁育与养殖教育部工程研究中心(东北农业大学)
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出处
《东北农业大学学报》
北大核心
2025年第4期47-55,共9页
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基金
国家自然科学基金项目(32072733)。
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文摘
为建立1种准确可靠的猪胚胎微量细胞性别的鉴定方法,将不同数量细胞样本进行DNA提取纯化后进行PCR扩增,结果表明:当使用纯化的DNA模板进行1轮PCR扩增时,SRY/ZFX引物可在10个细胞中有效扩增,而AMEL和SUSY/SUS12S引物仅在50个细胞以上有效。与纯化DNA模板相比,使用细胞裂解液进行PCR扩增的效果更优,但单次PCR中SUSY/SUS12S和AMEL引物在1或10个细胞样本中未检测到特异性条带。通过设计巢式PCR引物,成功在单细胞中扩增目标基因,特别是AMEL引物效果最佳,并通过Y染色体DNA-FISH检测验证PCR结果准确性。此外,通过在体外受精囊胚中测试建立的巢式PCR方法,表现出良好特异性。
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关键词
猪
胚胎
单细胞
巢式PCR
性别鉴定
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Keywords
porcine
embryo
single cell
nested PCR
sex identification
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分类号
Q781
[生物学—分子生物学]
S828
[农业科学—畜牧学]
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