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维生素K3诱导氧化应激经ERK信号途径介导HeLa细胞发生自噬
被引量:
6
1
作者
于春艳
刘希
+4 位作者
于春荣
张钰
苏静
刘玉和
李洪岩
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第2期229-232,共4页
目的:利用维生素K3(VK3)复制HeLa细胞氧化应激模型,探讨细胞外信号调节激酶(ERK)途径在氧化应激诱导自噬过程中的作用。方法:将人宫颈癌HeLa细胞随机分为对照组、VK3组(30μmol·L-1)、U0126组(10μmol·L-1)和VK3(30μmol·...
目的:利用维生素K3(VK3)复制HeLa细胞氧化应激模型,探讨细胞外信号调节激酶(ERK)途径在氧化应激诱导自噬过程中的作用。方法:将人宫颈癌HeLa细胞随机分为对照组、VK3组(30μmol·L-1)、U0126组(10μmol·L-1)和VK3(30μmol·L-1)+U0126(10μmol·L-1)组。MTT法检测各组细胞生存率;Western blotting法检测HeLa细胞中ERK1/2、磷酸化ERK1/2(Phospho-ERK1/2)、自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、凋亡相关蛋白caspase-3及其活化片段cleaved caspase-3的表达水平;Hoechest 33342染色激光共聚焦观察凋亡细胞核形态和细胞凋亡率。结果:与VK3组比较,VK3+U0126组HeLa细胞生存率降低(P<0.05)。VK3组作用2、4和8hHeLa细胞中Phospho-ERK1/2表达水平增加(P<0.05)。与对照组比较,VK3组HeLa细胞中LC3-Ⅱ蛋白表达水平增加(P<0.05);与VK3组比较,VK3+U0126组HeLa细胞中LC3-Ⅱ蛋白表达水平降低(P<0.05),cleaved caspase-3蛋白表达水平增加(P<0.05)。与VK3组比较,VK3+U0126组HeLa细胞呈现凋亡细胞核形态,细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论:氧化应激通过ERK信号途径诱导HeLa细胞发生自噬,被激活的细胞自噬能抑制VK3诱导HeLa细胞凋亡。
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关键词
氧化应激
细胞外信号调节激酶
自噬
HELA细胞
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职称材料
人宫颈癌HeLa细胞氧化损伤中溶酶体与线粒体损伤的时间顺序及其意义
被引量:
1
2
作者
于春艳
刘希
+3 位作者
于春荣
张钰
苏静
刘玉和
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期872-875,I0002,共5页
目的:探讨溶酶体及线粒体死亡途径在氧化应激诱导HeLa细胞凋亡过程中的时间顺序及其意义,阐明溶酶体膜通透性在氧化应激诱导线粒体凋亡过程中的重要作用。方法:以对数生长期人宫颈癌HeLa细胞作为研究对象,利用维生素K3(VK3)复制氧化应...
目的:探讨溶酶体及线粒体死亡途径在氧化应激诱导HeLa细胞凋亡过程中的时间顺序及其意义,阐明溶酶体膜通透性在氧化应激诱导线粒体凋亡过程中的重要作用。方法:以对数生长期人宫颈癌HeLa细胞作为研究对象,利用维生素K3(VK3)复制氧化应激模型,实验分为对照组、VK3 1h、VK3 3h、VK3 6h和VK312h作用组。MTT法检测各组细胞生存率;2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)染色检测细胞内活性氧(ROS)水平,吖啶橙(AO)染色观察溶酶体膜通透性,罗丹明123染色检测线粒体膜电势(ΔΨm),Western blotting法检测凋亡相关蛋白caspase-3活化片段的表达。结果:与对照组比较,VK3 6和12h组HeLa细胞生存率降低(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,VK3 6和12h组HeLa细胞内caspase-3活化片段表达水平增加(P<0.05)。DCFH-DA染色,VK3作用1、3及6h,HeLa细胞内绿色荧光增强。AO染色,VK3 3h和6h组可见HeLa细胞的溶酶体内红色颗粒状荧光减弱,细胞浆绿色荧光增强。罗丹明123染色,VK36h组可见HeLa细胞浆内红色荧光强度明显降低(提示ΔΨm下降)。结论:氧化损伤能够诱导溶酶体及线粒体死亡途径,并且溶酶体的变化先于线粒体,提示溶酶体通透性在氧化应激诱导线粒体凋亡过程中具有重要作用。
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关键词
氧化应激
溶酶体
线粒体
细胞凋亡
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职称材料
题名
维生素K3诱导氧化应激经ERK信号途径介导HeLa细胞发生自噬
被引量:
6
1
作者
于春艳
刘希
于春荣
张钰
苏静
刘玉和
李洪岩
机构
北华大学
基础医
学院
病理学教研室
北华大学化学与生物学院实验中心
北京昭衍新药研究
中心
有限公司毒理部
吉林
大学
基础医
学院
病理生理学教研室
出处
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第2期229-232,共4页
基金
国家自然科学基金资助课题(81202552
81272876)
+2 种基金
吉林省教育厅科研基金资助课题(吉教科合字2011第117号
吉教科合字2012第394号)
吉林省科技厅自然科学基金资助课题(201215103)
文摘
目的:利用维生素K3(VK3)复制HeLa细胞氧化应激模型,探讨细胞外信号调节激酶(ERK)途径在氧化应激诱导自噬过程中的作用。方法:将人宫颈癌HeLa细胞随机分为对照组、VK3组(30μmol·L-1)、U0126组(10μmol·L-1)和VK3(30μmol·L-1)+U0126(10μmol·L-1)组。MTT法检测各组细胞生存率;Western blotting法检测HeLa细胞中ERK1/2、磷酸化ERK1/2(Phospho-ERK1/2)、自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、凋亡相关蛋白caspase-3及其活化片段cleaved caspase-3的表达水平;Hoechest 33342染色激光共聚焦观察凋亡细胞核形态和细胞凋亡率。结果:与VK3组比较,VK3+U0126组HeLa细胞生存率降低(P<0.05)。VK3组作用2、4和8hHeLa细胞中Phospho-ERK1/2表达水平增加(P<0.05)。与对照组比较,VK3组HeLa细胞中LC3-Ⅱ蛋白表达水平增加(P<0.05);与VK3组比较,VK3+U0126组HeLa细胞中LC3-Ⅱ蛋白表达水平降低(P<0.05),cleaved caspase-3蛋白表达水平增加(P<0.05)。与VK3组比较,VK3+U0126组HeLa细胞呈现凋亡细胞核形态,细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论:氧化应激通过ERK信号途径诱导HeLa细胞发生自噬,被激活的细胞自噬能抑制VK3诱导HeLa细胞凋亡。
关键词
氧化应激
细胞外信号调节激酶
自噬
HELA细胞
Keywords
oxidative stress
external signal-regulated kinase
autophagy
HeLa cells
分类号
R363.2 [医药卫生—病理学]
在线阅读
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职称材料
题名
人宫颈癌HeLa细胞氧化损伤中溶酶体与线粒体损伤的时间顺序及其意义
被引量:
1
2
作者
于春艳
刘希
于春荣
张钰
苏静
刘玉和
机构
北华大学
基础医
学院
病理学教研室
北华大学化学与生物学院实验中心
北京昭衍新药研究
中心
有限公司毒理部
吉林
大学
白求恩医
学院
病理生理学教研室
出处
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期872-875,I0002,共5页
基金
国家自然科学基金资助课题(81202552
81272876)
+2 种基金
吉林省教育厅科研基金资助课题(吉教科合字2011第117号
吉教科合字2012第394号)
吉林省科技厅自然科学基金资助课题(201215103)
文摘
目的:探讨溶酶体及线粒体死亡途径在氧化应激诱导HeLa细胞凋亡过程中的时间顺序及其意义,阐明溶酶体膜通透性在氧化应激诱导线粒体凋亡过程中的重要作用。方法:以对数生长期人宫颈癌HeLa细胞作为研究对象,利用维生素K3(VK3)复制氧化应激模型,实验分为对照组、VK3 1h、VK3 3h、VK3 6h和VK312h作用组。MTT法检测各组细胞生存率;2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)染色检测细胞内活性氧(ROS)水平,吖啶橙(AO)染色观察溶酶体膜通透性,罗丹明123染色检测线粒体膜电势(ΔΨm),Western blotting法检测凋亡相关蛋白caspase-3活化片段的表达。结果:与对照组比较,VK3 6和12h组HeLa细胞生存率降低(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,VK3 6和12h组HeLa细胞内caspase-3活化片段表达水平增加(P<0.05)。DCFH-DA染色,VK3作用1、3及6h,HeLa细胞内绿色荧光增强。AO染色,VK3 3h和6h组可见HeLa细胞的溶酶体内红色颗粒状荧光减弱,细胞浆绿色荧光增强。罗丹明123染色,VK36h组可见HeLa细胞浆内红色荧光强度明显降低(提示ΔΨm下降)。结论:氧化损伤能够诱导溶酶体及线粒体死亡途径,并且溶酶体的变化先于线粒体,提示溶酶体通透性在氧化应激诱导线粒体凋亡过程中具有重要作用。
关键词
氧化应激
溶酶体
线粒体
细胞凋亡
Keywords
oxidative stress
lysosome
mitochondria
apoptosis
分类号
R363.2 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
维生素K3诱导氧化应激经ERK信号途径介导HeLa细胞发生自噬
于春艳
刘希
于春荣
张钰
苏静
刘玉和
李洪岩
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2014
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
人宫颈癌HeLa细胞氧化损伤中溶酶体与线粒体损伤的时间顺序及其意义
于春艳
刘希
于春荣
张钰
苏静
刘玉和
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
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