期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到9篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
S100A9蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定 被引量：3
1
作者 刘洋洋 李晓玲 +5 位作者 左威 迟健 柳刚 孙龙钦 姜俊义 刘莹 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期956-959,共4页
目的制备S100A9重组蛋白及其单克隆抗体(mAb),并对抗体进行特异性鉴定。方法以成人肝cDNA表达文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-S100A9和pET-32a-S100A9。融合蛋白在大肠杆菌中表达,纯化后以His-S100A9作为免疫原制备鼠mAb。采用EL... 目的制备S100A9重组蛋白及其单克隆抗体(mAb),并对抗体进行特异性鉴定。方法以成人肝cDNA表达文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-S100A9和pET-32a-S100A9。融合蛋白在大肠杆菌中表达,纯化后以His-S100A9作为免疫原制备鼠mAb。采用ELISA和Western blot法鉴定筛选抗体。挑取杂交瘤细胞株制备腹水并纯化,采用Western blot法和间接免疫荧光染色鉴定mAb的特异性。结果 GST-S100A9和His-S100A9融合蛋白均成功构建表达。共筛选到抗S100A9杂交瘤细胞18株,其中15株在Western blot检测中与重组蛋白呈强阳性反应,3株呈弱阳性反应。2株可识别肝癌组织间隙液中的S100A9天然蛋白。结论成功地制备出多株抗S100A9的mAb。 展开更多
关键词 S100A9 单克隆抗体 杂交瘤 细胞融合
在线阅读 下载PDF
血红蛋白A2单克隆抗体的制备与鉴定
2
作者 陈志成 杨金菊 +8 位作者 刘蓉 曲海霞 王婉 刘莉 柳晓兰 陈勇 刘莹 高建恩 孙启鸿 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期823-826,共4页
本研究目的是制备鼠抗人血红蛋白A2(HBA2)单克隆抗体(McAb)并进行初步鉴定。将正常人胎肝组织匀浆离心并分离出人胎肝核总蛋白,用人胎肝核总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,并通过间接ELISA法、Western blot及免疫组... 本研究目的是制备鼠抗人血红蛋白A2(HBA2)单克隆抗体(McAb)并进行初步鉴定。将正常人胎肝组织匀浆离心并分离出人胎肝核总蛋白,用人胎肝核总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,并通过间接ELISA法、Western blot及免疫组织化学的方法对单克隆抗体进行特异性鉴定,通过免疫沉淀和Uni-ZAPXR表达文库筛选鉴定抗原。结果表明:通过间接ELISA筛选获得分泌AEE091抗体的杂交瘤细胞1株,其分泌的单克隆抗体Ig亚类(型)为IgG1(κ);Western blot结果显示,该抗体识别分子量为15kD的蛋白;Western blot识别AEE091免疫沉淀获得的分子量为15kD的抗原;同时应用单克隆抗体AEE091对人肝脏cDNA表达文库(Uni-ZAPXR)进行筛选,筛选所获得的阳性噬菌斑测序结果显示两个阳性克隆插入序列均为HBA2。结论:经筛选获得了分泌AEE091抗体的杂交瘤细胞株。AEE091抗体能特异识别HBA2抗原,因而其在HBA2的功能研究和珠蛋白生成障碍性贫血筛查等方面具有应用价值。 展开更多
关键词 血红蛋白A2 单克隆抗体 CDNA表达文库 地中海贫血
在线阅读 下载PDF
重组人血管内皮生长因子D诱导鸡胚尿囊膜血管增生 被引量：1
3
作者 陈浩 丁秀云 +3 位作者 高媛 柳晓兰 高建恩 孙启鸿 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第2期364-368,共5页
为了表达和纯化具有生物学活性的人血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)-D,探讨VEGF-D对血管增生作用,从人胎肺组织中提取总RNA,设计特异性引物并应用RT-PCR法扩增VEGF-D成熟肽片段;经测序证明目的片段序列正确... 为了表达和纯化具有生物学活性的人血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)-D,探讨VEGF-D对血管增生作用,从人胎肺组织中提取总RNA,设计特异性引物并应用RT-PCR法扩增VEGF-D成熟肽片段;经测序证明目的片段序列正确后,构建重组表达质粒pGEX-5X-1/VEGF-D并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行GST-VEGF-D融合蛋白的表达。结果表明,融合蛋白的分子量约为38kD,表达量占菌体总蛋白的15%以上,抗GST和抗VEGF-D的抗体均能识别融合蛋白;纯化的GST-VEGF-D融合蛋白与VEGFR-3/Fc具有结合活性,并能刺激红白血病细胞系HEL细胞生长;在鸡胚尿囊膜实验中GST-VEGF-D具有促进鸡胚尿囊膜血管生成的作用。结论:成功表达了具有生物学活性的重组人VEGF-D融合蛋白,为进一步研究VEGF-D的作用机理提供了实验模型。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子D 血管内皮生长因子受体3 鸡胚尿囊膜 血管生成
在线阅读 下载PDF
抗尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：2
4
作者 王婉 高媛 +10 位作者 杨金菊 柳晓兰 鞠艳芳 刘莉 陈志成 刘蓉 迟俊 邢维贤 高建恩 安立国 孙启鸿 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第3期563-566,共4页
本研究制备抗人尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2(UDP-glucose pyrophosphorylase2)的单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定。将正常成人肝组织匀浆离心并分离肝脏胞浆总蛋白,用肝脏胞浆总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,通过间... 本研究制备抗人尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2(UDP-glucose pyrophosphorylase2)的单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定。将正常成人肝组织匀浆离心并分离肝脏胞浆总蛋白,用肝脏胞浆总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,通过间接ELISA法、Western blot及免疫组织化学的方法对单克隆抗体进行特性鉴定,通过Uni-ZAP XR肝脏cDNA表达文库筛选鉴定抗体特异性。结果表明:通过间接ELISA筛选获得1株可稳定分泌抗人UGP2mAb的杂交瘤细胞系BAD062,其分泌的单克隆抗体的Ig亚类(型)为IgG2b(κ),Western blot结果显示该抗体可以特异地识别分子量为56kD的蛋白;应用单克隆抗体BAD062对人肝脏cDNA表达文库(Uni-ZAPXR)进行筛选,阳性噬菌斑测序结果显示2个阳性克隆插入序列均为UGP2。结论:单克隆抗体BAD062特异地识别抗原UGP2,该抗体可用于ELISA检测、Western blot、免疫组织化学实验,为UGP2的研究提供了有力的工具。 展开更多
关键词 尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2 单克隆抗体 CDNA表达文库
在线阅读 下载PDF
Clusterin抗原的表达、抗体制备及其初步鉴定 被引量：1
5
作者 张迎春 刘莹 +6 位作者 杨金菊 柳晓兰 迟俊 高建恩 唐晓波 朱大岭 孙启鸿 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期45-48,共4页
目的:制备Clusterin(CLU)多克隆和单克隆抗体(mAb),并进行特性鉴定。方法:以成人肝cDNA表达文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-CLU和PET-32a-CLU。GST-CLU融合蛋白在大肠杆菌中表达,被作为免疫原制备兔多抗和鼠mAb。采用ELISA法和We... 目的:制备Clusterin(CLU)多克隆和单克隆抗体(mAb),并进行特性鉴定。方法:以成人肝cDNA表达文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-CLU和PET-32a-CLU。GST-CLU融合蛋白在大肠杆菌中表达,被作为免疫原制备兔多抗和鼠mAb。采用ELISA法和Western blot鉴定抗CLU抗血清在重组蛋白和天然蛋白中的特异性。采用West-ern blot,间接免疫荧光,免疫组化鉴定mAb的特异性。结果:GST-CLU融合蛋白在相对分子质量(Mr)约54 000处呈现明显表达条带。Western blot鉴定表明,制备的抗CLU兔多克隆抗体可特异地识别成人肝总蛋白中Mr约52 000和58 000的CLU蛋白。获得9株可稳定分泌抗CLU的杂交瘤细胞株可识别重组人CLU蛋白,其中有2株可特异性结合HepG2细胞质中的蛋白,4株可特异性结合成人肝脏组织肝细胞质中的蛋白。结论:成功地制备出兔抗人CLU抗血清和9株抗CLU的mAb,为进一步研究CLU在肿瘤中的功能奠定了实验基础。 展开更多
关键词 CLUSTERIN 原核表达 多克隆抗体 单克隆抗体
在线阅读 下载PDF
Ras相关C3肉毒毒素底物1(Rac1)多克隆抗体的制备及应用 被引量：1
6
作者 张莉莉 郝露 +2 位作者 左威 马维佳 刘莹 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1120-1123,共4页
目的制备抗Ras相关C3肉毒毒素底物1(Rac1)兔多克隆抗体并进行初步应用。方法以人宫颈癌细胞系He La细胞c DNA为模板,构建重组表达质粒p ET-32a-Rac1。His-Rac1融合蛋白在大肠杆菌中成功表达,将纯化后的融合蛋白作为免疫原免疫家兔制备... 目的制备抗Ras相关C3肉毒毒素底物1(Rac1)兔多克隆抗体并进行初步应用。方法以人宫颈癌细胞系He La细胞c DNA为模板,构建重组表达质粒p ET-32a-Rac1。His-Rac1融合蛋白在大肠杆菌中成功表达,将纯化后的融合蛋白作为免疫原免疫家兔制备兔多克隆抗体。分别采用ELISA、Western blot法和免疫组织化学技术对抗Rac1抗血清的效价及特异性进行鉴定。结果 His-Rac1融合蛋白成功构建并高效表达。制备的抗Rac1兔多克隆抗体可以检测到He La细胞、MCF-7细胞的Rac1蛋白,并能识别人肾组织中的Rac1蛋白。结论成功制备了兔抗人Rac1多克隆抗体,该抗体可以识别多种天然样本中的Rac1蛋白。 展开更多
关键词 RAC1 原核表达 多克隆抗体
在线阅读 下载PDF
PON2单克隆抗体的制备与初步鉴定 被引量：1
7
作者 于占红 杨金菊 +6 位作者 刘静 迟俊 陈苗 柳晓兰 刘莹 高建恩 孙启鸿 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1130-1132,共3页
目的:制备PON2(paraxonase2)单克隆抗体(mAb),并进行初步鉴定。方法:利用生物信息学方法分析人类PON2蛋白序列,选取与小鼠同源性低,而免疫原性与亲水性均较强的片段,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-PON2和PET-32a-PON2,GST-PON2和HIS-PON2... 目的:制备PON2(paraxonase2)单克隆抗体(mAb),并进行初步鉴定。方法:利用生物信息学方法分析人类PON2蛋白序列,选取与小鼠同源性低,而免疫原性与亲水性均较强的片段,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-PON2和PET-32a-PON2,GST-PON2和HIS-PON2融合蛋白在大肠杆菌中进行表达,以HIS-PON2作为免疫原制备鼠mAb,以GST-PON2作为筛选抗原。采用Western blot、间接免疫荧光鉴定mAb的特异性。结果:GST-PON2和HIS-PON2融合蛋白均在大肠杆菌中获得高效表达,经常规的细胞融合和筛选获得2株可稳定分泌抗PON2的杂交瘤细胞株,这2株抗体可以识别HepG2细胞中的靶蛋白。结论:成功制备出2株抗PON2的mAb,并通过免疫荧光技术检测了该蛋白在HepG2细胞中的分布,为进一步进行PON2蛋白的的研究提供了有效的工具。 展开更多
关键词 paraxonase2(PON2) 原核表达 单克隆抗体
在线阅读 下载PDF
抗11β-羟类固醇脱氢酶1的单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：1
8
作者 王婉 杨金菊 +5 位作者 刘莉 陈志成 高媛 高建恩 安立国 孙启鸿 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期38-40,共3页
目的:制备抗人11β-羟类固醇脱氢酶1(homo sapi-ens hydroxysteroid 11-beta dehydrogenase 1,HSD11B1)的单克隆抗体(mAb)并初步鉴定其特性。方法:将正常成人肝组织匀浆离心并分离线粒体,用线粒体总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制... 目的:制备抗人11β-羟类固醇脱氢酶1(homo sapi-ens hydroxysteroid 11-beta dehydrogenase 1,HSD11B1)的单克隆抗体(mAb)并初步鉴定其特性。方法:将正常成人肝组织匀浆离心并分离线粒体,用线粒体总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb,并通过间接ELISA法、Westernblot、免疫组化的方法对mAb进行特性鉴定,通过免疫沉淀、Uni-ZAP XR肝脏cDNA表达文库筛选鉴定抗原。结果:通过间接ELISA筛选获得1株可稳定分泌抗人HSD11B1 mAb的杂交瘤细胞系。其分泌的mAb的Ig亚类(型)为IgG1(κ),Western blot结果显示该mAb可以特异地识别相对分子质量(Mr)为35 000的蛋白;应用mAb CBF245对人肝脏cDNA表达文库(Uni-ZAP XR)进行筛选,阳性噬菌斑测序结果显示5个阳性克隆插入序列均为HSD11B1。结论:mAb BAD062特异地识别抗原HSD11B1,该mAb可用于ELISA检测、Westernblot、免疫组化和免疫沉淀实验,为HSD11B1的研究提供了有力的工具。 展开更多
关键词 HSD11B1 单克隆抗体 线粒体
在线阅读 下载PDF
乙醛酸还原酶/羟基丙酮酸还原酶单克隆抗体的制备与鉴定
9
作者 陈志成 杨金菊 +5 位作者 刘蓉 王婉 柳晓兰 刘莹 高建恩 孙启鸿 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期844-846,共3页
目的:制备鼠抗人乙醛酸还原酶/羟基丙酮酸还原酶单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定。方法:将正常成人肝组织匀浆离心并分离出肝脏胞质总蛋白,用肝脏胞质总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb,并通过间接ELISA法、Western blot及免... 目的:制备鼠抗人乙醛酸还原酶/羟基丙酮酸还原酶单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定。方法:将正常成人肝组织匀浆离心并分离出肝脏胞质总蛋白,用肝脏胞质总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb,并通过间接ELISA法、Western blot及免疫组化的方法对mAb进行特异性鉴定,通过免疫沉淀联合质谱和Uni-ZAP XR表达文库筛选鉴定抗原。结果:通过间接ELISA筛选获得杂交瘤细胞株ADB291,其分泌的mAb Ig亚类(型)为IgG1(κ),Western blot结果显示该mAb识别相对分子质量(Mr)为35 000的蛋白;对免疫沉淀获得的相应抗原回收、酶切、质谱鉴定为GRH-PR。同时应用mAb ADB291对人肝脏cDNA表达文库(Uni-ZAP XR)进行筛选,筛选所获得的阳性噬菌斑测序结果显示2个阳性克隆插入序列均为GRHPR;阳性克隆转化表达后的Western blot结果确认该抗体识别Mr35 000的表达蛋白。结论:mAb ADB291特异识别的抗原为GRHPR,该mAb在GRHPR的功能研究和二型原发性尿草酸盐过多遗传疾病的临床诊断等方面具有应用价值。 展开更多
关键词 GRHPR 单克隆抗体 CDNA表达文库
在线阅读 下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
关于我们 | 版权声明 | 联系我们 | 帮助中心| 意见反馈
主办单位：上海市教育委员会
技术支持：重庆维普资讯有限公司
渝公网安备 50019002500403号
使用帮助 返回顶部