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基于CRISPR/Cas9系统的单碱基基因编辑技术及其在医药研究中的应用
1
作者
张爱霞
赵宇
+2 位作者
安静
罗影
陈志国
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第7期507-514,共8页
成簇规律间隔短回文重复序列及其相关基因9(CRISPR/Cas9)系统的基因编辑需要依赖双链DNA断裂和低效的同源重组,这使其在精准基因编辑中效率不高。单碱基基因编辑技术通过将Cas9蛋白与胞苷脱氨酶或腺苷脱氨酶形成融合蛋白,并通过单链向导...
成簇规律间隔短回文重复序列及其相关基因9(CRISPR/Cas9)系统的基因编辑需要依赖双链DNA断裂和低效的同源重组,这使其在精准基因编辑中效率不高。单碱基基因编辑技术通过将Cas9蛋白与胞苷脱氨酶或腺苷脱氨酶形成融合蛋白,并通过单链向导RNA(sgRNA)与靶序列的互补配对和Cas9蛋白对前间区序列邻近基序(PAM)的识别,在不产生双链DNA断裂的情况下在靶位点编辑窗口内进行碱基C→T或A→G的单碱基编辑,实现了基因组中G∶C与A∶T的互换。单碱基基因编辑技术简便高效,是生命科学研究领域应用的热点技术。本文综述了单碱基基因编辑技术的基本概况、筛选优化、医药研究中的应用以及目前存在的主要问题,以期为相关领域的进一步研究提供借鉴。
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关键词
CRISPR/Cas9
单碱基编辑
胞苷脱氨酶
腺苷脱氨酶
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职称材料
人外周血单个核细胞体外重编程为少突胶质前体细胞研究
2
作者
唐玺和
李默
+4 位作者
王淑艳
李鹏燕
张愚
陈志国
陈惠
《首都医科大学学报》
CAS
北大核心
2017年第4期553-558,共6页
目的利用非整合质粒载体在体外将成人外周血中单个核细胞重编程为少突胶质前体细胞(oligodendrocyte progenitor cells,OPCs)。方法经外周静脉采集志愿者血液5 m L,利用Ficoll-Paquem密度梯度离心法获得单个核细胞,体外扩增培养后,电转...
目的利用非整合质粒载体在体外将成人外周血中单个核细胞重编程为少突胶质前体细胞(oligodendrocyte progenitor cells,OPCs)。方法经外周静脉采集志愿者血液5 m L,利用Ficoll-Paquem密度梯度离心法获得单个核细胞,体外扩增培养后,电转染携带外源基因(OCT4,SOX2,KLF4,C-myc,LIN28,Nanog)的质粒,然后在加有化学小分子的特定培养基中分三步培养。结果转染后30 d左右,可以获得血小板衍生生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptor-α,PDGFR-α)阳性的早期少突胶质前体细胞(Pre-OPC),该细胞能传20代以上,继续分化30 d左右可以获得表达O4的少突胶质前体细胞。结论利用非整合质粒载体携带外源基因可以将成人外周血单个核细胞在较短期时间内重编程为具有增生能力的早期少突胶质前体细胞,且能继续分化为少突胶质前体细胞。
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关键词
外周血单个核细胞
重编程
少突胶质前体细胞
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职称材料
题名
基于CRISPR/Cas9系统的单碱基基因编辑技术及其在医药研究中的应用
1
作者
张爱霞
赵宇
安静
罗影
陈志国
机构
首都医科大学宣武医院细胞治疗中心
北京脑重大疾病研究院神经损伤和修复所
嘉应学院生命科学学院
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第7期507-514,共8页
基金
干细胞及转化国家重点专项(2016YFA0101403)
国家自然科学基金(81661130160)
+4 种基金
国家自然科学基金(81422014)
国家自然科学基金(81561138004)
北京市青年拔尖团队(2017000021223TD03)
北京市长城学者(CIT&TCD20180333)
北京市卫生系统高层次卫生技术人才(2015-3-063).
文摘
成簇规律间隔短回文重复序列及其相关基因9(CRISPR/Cas9)系统的基因编辑需要依赖双链DNA断裂和低效的同源重组,这使其在精准基因编辑中效率不高。单碱基基因编辑技术通过将Cas9蛋白与胞苷脱氨酶或腺苷脱氨酶形成融合蛋白,并通过单链向导RNA(sgRNA)与靶序列的互补配对和Cas9蛋白对前间区序列邻近基序(PAM)的识别,在不产生双链DNA断裂的情况下在靶位点编辑窗口内进行碱基C→T或A→G的单碱基编辑,实现了基因组中G∶C与A∶T的互换。单碱基基因编辑技术简便高效,是生命科学研究领域应用的热点技术。本文综述了单碱基基因编辑技术的基本概况、筛选优化、医药研究中的应用以及目前存在的主要问题,以期为相关领域的进一步研究提供借鉴。
关键词
CRISPR/Cas9
单碱基编辑
胞苷脱氨酶
腺苷脱氨酶
Keywords
CRISPR/Cas9
base editing
cytidine deaminase
adenosine deaminase
分类号
R966 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
人外周血单个核细胞体外重编程为少突胶质前体细胞研究
2
作者
唐玺和
李默
王淑艳
李鹏燕
张愚
陈志国
陈惠
机构
中国康复医学
研究
所
首都医科大学宣武医院细胞治疗室
北京脑重大疾病研究院神经损伤和修复所
北京
神经
损伤和
康复重点实验室
出处
《首都医科大学学报》
CAS
北大核心
2017年第4期553-558,共6页
基金
国家自然科学基金(81661130160)
北京市科委计划项目(Z151100001615055)~~
文摘
目的利用非整合质粒载体在体外将成人外周血中单个核细胞重编程为少突胶质前体细胞(oligodendrocyte progenitor cells,OPCs)。方法经外周静脉采集志愿者血液5 m L,利用Ficoll-Paquem密度梯度离心法获得单个核细胞,体外扩增培养后,电转染携带外源基因(OCT4,SOX2,KLF4,C-myc,LIN28,Nanog)的质粒,然后在加有化学小分子的特定培养基中分三步培养。结果转染后30 d左右,可以获得血小板衍生生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptor-α,PDGFR-α)阳性的早期少突胶质前体细胞(Pre-OPC),该细胞能传20代以上,继续分化30 d左右可以获得表达O4的少突胶质前体细胞。结论利用非整合质粒载体携带外源基因可以将成人外周血单个核细胞在较短期时间内重编程为具有增生能力的早期少突胶质前体细胞,且能继续分化为少突胶质前体细胞。
关键词
外周血单个核细胞
重编程
少突胶质前体细胞
Keywords
peripheral blood mononuclear cells
cell reprogramming
oligodendrocyte progenitor cells
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于CRISPR/Cas9系统的单碱基基因编辑技术及其在医药研究中的应用
张爱霞
赵宇
安静
罗影
陈志国
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018
0
在线阅读
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职称材料
2
人外周血单个核细胞体外重编程为少突胶质前体细胞研究
唐玺和
李默
王淑艳
李鹏燕
张愚
陈志国
陈惠
《首都医科大学学报》
CAS
北大核心
2017
0
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职称材料
已选择
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