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p53基因对人肺癌细胞系耐药性的影响
1
作者
陶虹
朱允中
+7 位作者
汪惠
赖百塘
张春彦
湛秀萍
王玥
杨学惠
岳文涛
张洪涛
《中国肺癌杂志》
CAS
2008年第2期157-164,共8页
背景与目的肺癌细胞的耐药性是影响化疗疗效的重要因素之一,已有的研究表明p53基因异常与肿瘤细胞耐药性的产生密切相关。本研究的目的是探讨不同状态的p53基因对人肺癌细胞系耐药性的影响,为临床选择有针对性的化疗药物提供依据。方法...
背景与目的肺癌细胞的耐药性是影响化疗疗效的重要因素之一,已有的研究表明p53基因异常与肿瘤细胞耐药性的产生密切相关。本研究的目的是探讨不同状态的p53基因对人肺癌细胞系耐药性的影响,为临床选择有针对性的化疗药物提供依据。方法采用质粒pEGFP,分别构建含正义、反义p53cDNA的真核细胞表达载体,测序法检测外源p53基因。用脂质体介导转染人肺癌细胞系801D,建立含不同p53基因状态的单克隆细胞系,分别为pEGFP-801D、pEGFP-sensep53-801D[含有正义p53,pEGFP-p53(RS)-801D]、pEGFP-antisensep53-801D[含有反义p53,pEGFP-p53(AS)-801D]。荧光显微镜观察细胞绿色荧光,PCR法检测外源基因,MTT法检测耐药性,流式细胞术检测细胞周期与凋亡。结果测序结果显示外源p53基因分别以正向、反向连接于载体,荧光显微镜下转染细胞可见绿色荧光,PCR法检测出外源p53基因和neo基因。pEGFP-p53(AS)-801D细胞系对顺铂(Cisplatin,DDP)的IC50为0.26±0.09μg/mL,显著低于母系(0.55±0.19μg/mL,P<0.05)和空载系(0.77±0.13μg/mL,P<0.05)。pEGFP-p53(RS)-801D细胞系对DDP的IC50为0.43±0.25μg/mL,显著低于空载(P=0.000)但高于pEGFP-p53(AS)-801D(P<0.05)。pEGFP-p53(RS)-801D细胞系对紫杉醇(Paclitaxel,TAX)的IC50为2.34±0.43ng/mL,显著低于母系(8.40±1.50ng/mL,P﹤0.05),低于空载系但无显著差异。pEGFP-p53(RS)-801D细胞系对5氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5FU)的IC50为2.08±0.18μg/mL,显著低于母系(4.90±1.12μg/mL,P<0.05)和空载系(3.41±0.86μg/mL,P<0.05)。DDP能诱导pEGFP-p53(AS)-801D出现G2期阻滞,TAX、5FU诱导pEGFP-p53(RS)-801D细胞系分别出现G2、S期阻滞,DDP、TAX能诱导细胞凋亡和死亡。结论肺癌细胞中不同状态的p53基因对化疗药的耐药性有不同影响。p53突变、缺失与DDP耐受相关,p53缺失与TAX、5FU耐受相关,p53突变或缺失与长春瑞宾(Navelbine,NVB)、吉西他宾(Gemcitabine,GEM)耐药均无关。提示针对患者个体的基因情况选用敏感化疗药有助于提高疗效。
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关键词
P53基因
耐药
细胞周期
凋亡
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职称材料
题名
p53基因对人肺癌细胞系耐药性的影响
1
作者
陶虹
朱允中
汪惠
赖百塘
张春彦
湛秀萍
王玥
杨学惠
岳文涛
张洪涛
机构
北京
胸部
肿瘤
结核病医院
肿瘤
内科
北京胸部肿瘤结核病医院细胞分子生物学实验室
出处
《中国肺癌杂志》
CAS
2008年第2期157-164,共8页
文摘
背景与目的肺癌细胞的耐药性是影响化疗疗效的重要因素之一,已有的研究表明p53基因异常与肿瘤细胞耐药性的产生密切相关。本研究的目的是探讨不同状态的p53基因对人肺癌细胞系耐药性的影响,为临床选择有针对性的化疗药物提供依据。方法采用质粒pEGFP,分别构建含正义、反义p53cDNA的真核细胞表达载体,测序法检测外源p53基因。用脂质体介导转染人肺癌细胞系801D,建立含不同p53基因状态的单克隆细胞系,分别为pEGFP-801D、pEGFP-sensep53-801D[含有正义p53,pEGFP-p53(RS)-801D]、pEGFP-antisensep53-801D[含有反义p53,pEGFP-p53(AS)-801D]。荧光显微镜观察细胞绿色荧光,PCR法检测外源基因,MTT法检测耐药性,流式细胞术检测细胞周期与凋亡。结果测序结果显示外源p53基因分别以正向、反向连接于载体,荧光显微镜下转染细胞可见绿色荧光,PCR法检测出外源p53基因和neo基因。pEGFP-p53(AS)-801D细胞系对顺铂(Cisplatin,DDP)的IC50为0.26±0.09μg/mL,显著低于母系(0.55±0.19μg/mL,P<0.05)和空载系(0.77±0.13μg/mL,P<0.05)。pEGFP-p53(RS)-801D细胞系对DDP的IC50为0.43±0.25μg/mL,显著低于空载(P=0.000)但高于pEGFP-p53(AS)-801D(P<0.05)。pEGFP-p53(RS)-801D细胞系对紫杉醇(Paclitaxel,TAX)的IC50为2.34±0.43ng/mL,显著低于母系(8.40±1.50ng/mL,P﹤0.05),低于空载系但无显著差异。pEGFP-p53(RS)-801D细胞系对5氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5FU)的IC50为2.08±0.18μg/mL,显著低于母系(4.90±1.12μg/mL,P<0.05)和空载系(3.41±0.86μg/mL,P<0.05)。DDP能诱导pEGFP-p53(AS)-801D出现G2期阻滞,TAX、5FU诱导pEGFP-p53(RS)-801D细胞系分别出现G2、S期阻滞,DDP、TAX能诱导细胞凋亡和死亡。结论肺癌细胞中不同状态的p53基因对化疗药的耐药性有不同影响。p53突变、缺失与DDP耐受相关,p53缺失与TAX、5FU耐受相关,p53突变或缺失与长春瑞宾(Navelbine,NVB)、吉西他宾(Gemcitabine,GEM)耐药均无关。提示针对患者个体的基因情况选用敏感化疗药有助于提高疗效。
关键词
P53基因
耐药
细胞周期
凋亡
Keywords
p53 gene Drug resistance Cell cycle Apoptosis
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
p53基因对人肺癌细胞系耐药性的影响
陶虹
朱允中
汪惠
赖百塘
张春彦
湛秀萍
王玥
杨学惠
岳文涛
张洪涛
《中国肺癌杂志》
CAS
2008
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