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题名马铃薯3种病毒的多重PCR检测方法构建
被引量：3
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作者
乔楠
曹佳
李霞
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机构
榆林学院生命科学学院
北京真思维生物科技有限公司
陕西省榆林市农业科学研究所
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出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2011年第25期15311-15313,共3页
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文摘
[目的]构建马铃薯A病毒(Potato virus A,PVA)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)3种马铃薯主要易受感染的病毒多重PRC(multiplex PCR)检测方法。[方法]根据GenBank公布的PVA、TMV、PVY基因序列分别设计引物,建立3种马铃薯病毒的多重PCR方法;通过构建3种病毒PCR扩增目的基因的质粒用于制备标准品进行敏感性验证,利用PVX(Potato virus X)、PVM(Potato virus M)、PVS(Potato virus S)、PVV(Potato virus V),CMV(Cucumber mosaic virus)等其他马铃薯病毒进行特异性试验;并对11份疑似发生病毒病的马铃薯块茎采集样品进行了检测。[结果]研究中构建的马铃薯3种病毒多重PCR检测方法,最低检测下限:PVA为100 copies/2μl,PVY为100 copies/2μl,TMV为1 000 copies/2μl,与PVX、PVM、PVV、PVS、CMV等其他马铃薯病毒无交叉反应,具有良好的特异性;11份疑似发生病毒病的马铃薯块茎中7份样品检出3种病毒感染阳性。[结论]该研究成功构建了马铃薯PVA、TMV、PVY病毒的多重PCR方法,为马铃薯病毒检测技术应用奠定一定基础。
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关键词
马铃薯
PVA
TMV
PVY
多重PCR
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Keywords
Potato
Potato virus A
Potato virus Y
Tobacco mosaic virus
Multiplex PCR
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分类号
S435.32
[农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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题名马铃薯PLRV的RT-LAMP检测方法的构建
被引量：9
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作者
乔楠
曹佳
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机构
榆林学院生命科学学院
北京真思维生物科技有限公司
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出处
《中国马铃薯》
2011年第5期309-312,共4页
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文摘
为了建立高效、便捷且成本较低的检测方法以应用于马铃薯卷叶病毒(Potato leaf roll virus,PLRV)检疫防控工作,本研究构建了PLRV的逆转录环介导恒温扩增反应(Reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)检测方法。结果表明:本研究构建的马铃薯PLRV的RT-LAMP检测方法,最低检测下限为10 copies/mL,与PVX、PVM、PVV、PVS、CMV等其他马铃薯病毒无交叉反应,具有良好的特异性,为马铃薯病毒检测技术应用奠定一定基础。
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关键词
马铃薯
马铃薯卷叶病毒
逆转录环介导恒温扩增反应
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Keywords
potato
potato leaf roll virus
reverse transcription loop-mediated isothermal amplification
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分类号
S532
[农业科学—作物学]
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