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无PERV传染性“中畜”五指山小型猪近交系全基因组重测序分析: 1; 作者章冰艳范瑞 +3 位作者冯书堂贾俊婷张建斌马玉媛《中国畜牧兽医》北大核心 2025年第6期2459-2467,共9页; 【目的】自前期选育获得的无猪内源性反转录病毒(Porcine endogenous retrovirus,PERV)传染性“中畜”五指山小型猪近交系(Zhong Xu Wuzhishan Mini-pig Inbred line,ZXWIPIG)新品系中,选取1头雌性猪(ZXWIPIG505)进行全基因组重测序分析... 展开更多; 关键词猪内源性反转录病毒 “中畜”五指山小型猪近交系基因缺陷型全基因组重测序; 在线阅读下载PDF 职称材料

中国小型猪内源性反转录病毒研究进展与对策被引量：3: 2; 作者冯书堂马玉媛夏颖《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第4期1244-1248,共5页; 作者介绍了国内外猪内源性反转录病毒(PERV)研究进展,简述了中国不同品种小型猪PERV存在情况、PERV前病毒全基因克隆与序列分析、细胞水平鉴定方法、感染HEK293细胞研究平台的创建、猪A3F对PERV的抑制作用研究,以及从分子遗传学上揭示... 展开更多; 关键词中国小型猪猪内源性反转录病毒感染性克隆异种移植; 在线阅读下载PDF 职称材料

GGTA1/β4GalNT2双基因敲除近交系五指山小型猪的建立被引量：6: 3; 作者李楚任雪洋 +11 位作者李琳厉小雪金永张曼玲刘晓蕊熊强张立宁王盈李荣凤杨海元冯书堂戴一凡《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期835-840,共6页; 目的:利用CRISPR/Cas9技术建立五指山小型猪近交系GGTA1/β4GalNT2双基因敲除克隆猪。方法:设计合成靶向猪GGTA1和β4GalNT2基因的单导向RNA(single guide RNA,sgRNA),以pX330质粒为骨架,分别构建GGTA1和β4GalNT2的Cas9打靶载体,转染... 展开更多; 关键词近交系五指山小型猪 GGTA1/β4GalNT2 CRISPR/Cas9 异种移植; 在线阅读下载PDF 职称材料

五指山小型猪近交系异种移植产业化研发进展被引量：4: 4; 作者冯书堂戴一凡 +1 位作者章金刚潘志强《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期469-473,共5页; 为了早日实现五指山小型猪(WZSP)近交系异种移植产业化目标,努力推进近交繁育获得近交系,同时开展克服异种移植免疫排斥和猪内源性逆转录病毒(PERV)传染生物安全性两大难题的研发内容。本文从WZSP近交系双基因敲除克隆猪繁育成功、猪-... 展开更多; 关键词五指山小型猪近交系猪异种移植免疫排斥反应 α-1 3-半乳糖基转移酶基因敲除(αGTKO) 猪内源性逆转录病毒(PERV) 非α-1 3-半乳糖(Gal)抗原 CRISPR/Cas9基因编辑技术; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名无PERV传染性“中畜”五指山小型猪近交系全基因组重测序分析: 1; 作者章冰艳范瑞冯书堂贾俊婷张建斌马玉媛; 机构天津农学院动物科学与动物医学学院军事医学研究院北京盖兰德生物科技有限公司; 出处《中国畜牧兽医》北大核心 2025年第6期2459-2467,共9页; 基金国家自然科学基金面上项目(32070538)。; 文摘【目的】自前期选育获得的无猪内源性反转录病毒(Porcine endogenous retrovirus,PERV)传染性“中畜”五指山小型猪近交系(Zhong Xu Wuzhishan Mini-pig Inbred line,ZXWIPIG)新品系中,选取1头雌性猪(ZXWIPIG505)进行全基因组重测序分析,以进一步从分子水平上阐释无PERV传染性猪新品系的序列特征。【方法】分离ZXWIPIG505外周血单个核细胞并提取其基因组DNA,利用Illumina HiSeq-4000测序平台进行全基因组重测序。分别使用BLAST和SAMtools 0.1.19软件,提取ZXWIPIG505基因组中整合的PERV长片段和PERV-pol基因序列片段,并使用DNAStar软件对整合的PERV结构基因序列进行分析。将ZXWIPIG505中整合的PERV-pol基因序列特征与前期鉴定的PERV-pol缺陷型ZXWIPIG452中PERV-pol基因序列进行比较研究。【结果】ZXWIPIG505全基因组重测序平均测序深度为14.32×,测序数据有效率为97.21%,Q20为94.37%,Q30为87.03%,GC含量为43.38%,表明本次测序数据质量较高。ZXWIPIG505基因组中共整合5条PERV长片段,其中仅scaffold5028含有PERV全部结构基因,但均为缺陷型。ZXWIPIG505基因组中共整合85条PERV-pol基因片段序列,比对发现所有PERV-pol基因片段均不完整,为缺陷型。ZXWIPIG505和ZXWIPIG452基因组中整合的PERV-pol基因序列存在高度相似性,60条序列长度相同,75条序列在猪基因组中的整合位点相同,42条序列的PERV-pol基因提前终止位点相同。【结论】前期选育的ZXWIPIG505为PERV-pol基因缺陷型猪,并且ZXWIPIG505和ZXWIPIG452中整合的PERV-pol基因序列具有高度相似性。; 关键词猪内源性反转录病毒 “中畜”五指山小型猪近交系基因缺陷型全基因组重测序; Keywords Porcine endogenous retrovirus Zhong Xu Wuzhishan Mini-pig inbred line gene deficient variant whole genome resequencing; 分类号 S858.292 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名中国小型猪内源性反转录病毒研究进展与对策被引量：3: 2; 作者冯书堂马玉媛夏颖; 机构中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京盖兰德生物科技有限公司军事医学科学院输血医学研究所; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第4期1244-1248,共5页; 基金国家"863"(2012AA020603) 国家转基因专项(2008ZX08012-002-05) 北京市科技成果转化项目(2015-02); 文摘作者介绍了国内外猪内源性反转录病毒(PERV)研究进展,简述了中国不同品种小型猪PERV存在情况、PERV前病毒全基因克隆与序列分析、细胞水平鉴定方法、感染HEK293细胞研究平台的创建、猪A3F对PERV的抑制作用研究,以及从分子遗传学上揭示不同品系PERV特异性等创新性研究成果,分析了五指山小型猪近交系具有PERV基因拷贝少且没有PERV-C等特异性,以及展望培育中国PERV阴性猪新品系方法等研究,以期为人类异种器官移植和生物医用材料产品安全性研发,解决小型猪PERV疾病传播危险性提供科学对策和新的方向。; 关键词中国小型猪猪内源性反转录病毒感染性克隆异种移植; Keywords Chinese miniature pig porcine endogenous retrovirus infectious clone xenotransplantation; 分类号 S852.659.3 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名GGTA1/β4GalNT2双基因敲除近交系五指山小型猪的建立被引量：6: 3; 作者李楚任雪洋李琳厉小雪金永张曼玲刘晓蕊熊强张立宁王盈李荣凤杨海元冯书堂戴一凡; 机构南京医科大学江苏省异种移植重点实验室北京盖兰德生物科技有限公司; 出处《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期835-840,共6页; 基金国家重点研发计划(2017YFC1103701); 文摘目的:利用CRISPR/Cas9技术建立五指山小型猪近交系GGTA1/β4GalNT2双基因敲除克隆猪。方法:设计合成靶向猪GGTA1和β4GalNT2基因的单导向RNA(single guide RNA,sgRNA),以pX330质粒为骨架,分别构建GGTA1和β4GalNT2的Cas9打靶载体,转染至近交系五指山小型猪胎儿成纤维细胞(porcine fetal fibroblast,PFF)中,通过G418药物筛选和测序鉴定获得双基因敲除的单细胞克隆,然后利用体细胞克隆技术(somatic cell nuclear transfer,SCNT)获得双基因敲除的近交系五指山小型猪,并利用流式细胞技术检测克隆猪外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中αGal和Sd(a)抗原的表达。结果:成功构建GGTA1和β4GalNT2基因的Cas9/sgRNA表达载体,转染后获得双基因敲除的近交系五指山小型猪PFF细胞克隆9个。SCNT成功获得了10只五指山小型猪近交系双基因敲除的克隆猪,其PBMC无αGal和Sd(a)抗原的表达。结论:CRISPR/Cas9技术可以实现对猪GGTA1/β4GalNT2基因的编辑。本实验首次成功制备了GGTA1/β4GalNT2双基因敲除的近交系五指山型猪,为异种器官移植研究与应用提供了新的供体材料。; 关键词近交系五指山小型猪 GGTA1/β4GalNT2 CRISPR/Cas9 异种移植; Keywords Wuzhishan miniature inbred pigs GGTA1/β4GalNT2 CRISPR/Cas9 xenotransplantation; 分类号 R-332 [医药卫生] R617 [医药卫生—外科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名五指山小型猪近交系异种移植产业化研发进展被引量：4: 4; 作者冯书堂戴一凡章金刚潘志强; 机构北京盖兰德生物科技有限公司南京医科大学军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所北京同仁医院; 出处《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期469-473,共5页; 基金国家重点研发计划重点专项(2017YFC11037000、2017YFD0501606)。; 文摘为了早日实现五指山小型猪(WZSP)近交系异种移植产业化目标,努力推进近交繁育获得近交系,同时开展克服异种移植免疫排斥和猪内源性逆转录病毒(PERV)传染生物安全性两大难题的研发内容。本文从WZSP近交系双基因敲除克隆猪繁育成功、猪-猴异种角膜内皮移植取得突破性进展、WZSP近交系PERV无传染性群体建立、WZSP近交系是理想的动物模型和异种移植供体等方面,介绍WZSP近交系异种移植产业化的研发进展。; 关键词五指山小型猪近交系猪异种移植免疫排斥反应 α-1 3-半乳糖基转移酶基因敲除(αGTKO) 猪内源性逆转录病毒(PERV) 非α-1 3-半乳糖(Gal)抗原 CRISPR/Cas9基因编辑技术; 分类号 R617 [医药卫生—外科学] S828 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	无PERV传染性“中畜”五指山小型猪近交系全基因组重测序分析	章冰艳范瑞冯书堂贾俊婷张建斌马玉媛	《中国畜牧兽医》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	中国小型猪内源性反转录病毒研究进展与对策	冯书堂马玉媛夏颖	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2017	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	GGTA1/β4GalNT2双基因敲除近交系五指山小型猪的建立	李楚任雪洋李琳厉小雪金永张曼玲刘晓蕊熊强张立宁王盈李荣凤杨海元冯书堂戴一凡	《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2019	6	在线阅读下载PDF 职称材料
4	五指山小型猪近交系异种移植产业化研发进展	冯书堂戴一凡章金刚潘志强	《器官移植》 CAS CSCD 北大核心	2018	4	在线阅读下载PDF 职称材料