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两种载体表达人乳头瘤病毒6型L_1基因的比较
1
作者
舒琍琍
冯慧敏
侯云德
《中山医科大学学报》
CSCD
1991年第4期258-260,共3页
以表达融合蛋白的载体PUR288以及高效表达载体PBV221作载体,在大肠杆菌内成功地表达了我国克隆的HPV6BVL_I基因,并对表达蛋白进行免疫学鉴定,对两种载体的表达情况进行了讨论。
关键词
人乳头瘤病毒
基因表达
晚期基因
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职称材料
含Ⅰ型单纯疱疹病毒包装信号序列片段的分离及扩增子质粒双表达载体的构建
2
作者
王晓丹
杨天忠
+3 位作者
颜子颖
徐钤
彭朝晖
侯云德
《第一军医大学学报》
CSCD
1997年第2期85-89,共5页
利用基因工程技术分离出含有Ⅰ型单纯疱疹病毒（HSV－1）包装信号序列和HSV－1基因组复制起点序列的片段，表达外源基因所必需的启动子序列以及其下游作为报告基因的lacZ基因片段，构建成质粒型HSV－1载体pHSVL。用脂质体介导的方法可...
利用基因工程技术分离出含有Ⅰ型单纯疱疹病毒（HSV－1）包装信号序列和HSV－1基因组复制起点序列的片段，表达外源基因所必需的启动子序列以及其下游作为报告基因的lacZ基因片段，构建成质粒型HSV－1载体pHSVL。用脂质体介导的方法可将该质粒转染入经辅助病毒HSV－1tsK株超感染的Vero细胞，并将其包装成HSV－1假型病毒颗粒，可如天然病毒一样再感染传代细胞和神经细胞并在其中进行基因表达。在pHSVL的基础上，我们还构建了一种可同时表达两种外源基因的质粒型疱疹病毒载体pHLCL，即在pHSVL中插入第二个转录单位：HCMVIE启动子和其下游的荧光素酶基因（lucgene），由此获得的pHLCL病毒接种传代细胞证明它可在其中同时表达两种报告基因．本研究成功地构建了两种质粒型HSV－1载体，其独特的基因转移方式使之在神经生理、病理及神经系统疾病的基因治疗的实验研究中都具有广阔的应用前景。
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关键词
单纯疱疹病毒
载体基因转移
HSV-1
分离
质粒
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职称材料
人血小板生成素cDNA转染COS-7细胞及表达产物对小鼠骨髓巨核细胞的作用
3
作者
刘东旭
尹华丽
+4 位作者
郭涛
吴小林
王虹
邹萍
沈迪
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第3期172-174,共3页
将克隆全长１．１ｋｂ血小板生成素（ＴＰＯ）ｃＤＮＡ构建重组ＰＣＩｎｅｏＴＰＯ表达载体，利用ＬｉｐｏｆｅｃｔｉｎＴＭ介导转染ＣＯＳ－７细胞中，对阳性克隆ＣＯＳ－７细胞的ＤＮＡ、ｍＲＮＡ和培养上清分别进行ＰＣＲ扩增Ｓｏｕ...
将克隆全长１．１ｋｂ血小板生成素（ＴＰＯ）ｃＤＮＡ构建重组ＰＣＩｎｅｏＴＰＯ表达载体，利用ＬｉｐｏｆｅｃｔｉｎＴＭ介导转染ＣＯＳ－７细胞中，对阳性克隆ＣＯＳ－７细胞的ＤＮＡ、ｍＲＮＡ和培养上清分别进行ＰＣＲ扩增Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ、斑点杂交和ＴＰＯ夹心ＥＬＩＳＡ检测，观察表达产物对小鼠骨髓巨核细胞的作用。结果表明：全长１．１ｋｂＴＰＯｃＤＮＡ转染ＣＯＳ－７细胞获得表达，最高表达量可达４８．２８Ｕ／ｍｌ，其产物使骨髓巨核细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＭＫ）集落数增加４倍，巨核细胞增大至４２．１０±６．７０μｍ（Ｐ＜０．０１）；动态观察骨髓ＣＦＵ－ＭＫ集落数于实验第８天达最高峰，约持续２ｄ，第１０天后开始下降。
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关键词
人血小板生成素
CDNA
COS-7细胞
巨核细胞
骨髓
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职称材料
题名
两种载体表达人乳头瘤病毒6型L_1基因的比较
1
作者
舒琍琍
冯慧敏
侯云德
机构
中山医科大学微生物与免疫学教研室
北京病毒基因工程国家重点实验室
出处
《中山医科大学学报》
CSCD
1991年第4期258-260,共3页
文摘
以表达融合蛋白的载体PUR288以及高效表达载体PBV221作载体,在大肠杆菌内成功地表达了我国克隆的HPV6BVL_I基因,并对表达蛋白进行免疫学鉴定,对两种载体的表达情况进行了讨论。
关键词
人乳头瘤病毒
基因表达
晚期基因
Keywords
Human papillomavirus type 6 Late gene Gene expression
分类号
R373 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
含Ⅰ型单纯疱疹病毒包装信号序列片段的分离及扩增子质粒双表达载体的构建
2
作者
王晓丹
杨天忠
颜子颖
徐钤
彭朝晖
侯云德
机构
第一军医大学热带医学研究所
北京
市
病毒基因
工程
国家
重点
实验室
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
1997年第2期85-89,共5页
基金
国家863计划基金
文摘
利用基因工程技术分离出含有Ⅰ型单纯疱疹病毒（HSV－1）包装信号序列和HSV－1基因组复制起点序列的片段，表达外源基因所必需的启动子序列以及其下游作为报告基因的lacZ基因片段，构建成质粒型HSV－1载体pHSVL。用脂质体介导的方法可将该质粒转染入经辅助病毒HSV－1tsK株超感染的Vero细胞，并将其包装成HSV－1假型病毒颗粒，可如天然病毒一样再感染传代细胞和神经细胞并在其中进行基因表达。在pHSVL的基础上，我们还构建了一种可同时表达两种外源基因的质粒型疱疹病毒载体pHLCL，即在pHSVL中插入第二个转录单位：HCMVIE启动子和其下游的荧光素酶基因（lucgene），由此获得的pHLCL病毒接种传代细胞证明它可在其中同时表达两种报告基因．本研究成功地构建了两种质粒型HSV－1载体，其独特的基因转移方式使之在神经生理、病理及神经系统疾病的基因治疗的实验研究中都具有广阔的应用前景。
关键词
单纯疱疹病毒
载体基因转移
HSV-1
分离
质粒
Keywords
herpes simplex virus type 1 (HSV-1 )
amplicon vector
gene tranfer
分类号
R373.11 [医药卫生—病原生物学]
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
人血小板生成素cDNA转染COS-7细胞及表达产物对小鼠骨髓巨核细胞的作用
3
作者
刘东旭
尹华丽
郭涛
吴小林
王虹
邹萍
沈迪
机构
同济医科大学血液病学研究所
中国科学院上海生物化学研究所
同济医科大学微生物教研室分子
病毒
室
北京病毒基因工程国家重点实验室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第3期172-174,共3页
文摘
将克隆全长１．１ｋｂ血小板生成素（ＴＰＯ）ｃＤＮＡ构建重组ＰＣＩｎｅｏＴＰＯ表达载体，利用ＬｉｐｏｆｅｃｔｉｎＴＭ介导转染ＣＯＳ－７细胞中，对阳性克隆ＣＯＳ－７细胞的ＤＮＡ、ｍＲＮＡ和培养上清分别进行ＰＣＲ扩增Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ、斑点杂交和ＴＰＯ夹心ＥＬＩＳＡ检测，观察表达产物对小鼠骨髓巨核细胞的作用。结果表明：全长１．１ｋｂＴＰＯｃＤＮＡ转染ＣＯＳ－７细胞获得表达，最高表达量可达４８．２８Ｕ／ｍｌ，其产物使骨髓巨核细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＭＫ）集落数增加４倍，巨核细胞增大至４２．１０±６．７０μｍ（Ｐ＜０．０１）；动态观察骨髓ＣＦＵ－ＭＫ集落数于实验第８天达最高峰，约持续２ｄ，第１０天后开始下降。
关键词
人血小板生成素
CDNA
COS-7细胞
巨核细胞
骨髓
Keywords
Thrombopoietin cDNA
COS7 cell
Megakaryocyte
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
两种载体表达人乳头瘤病毒6型L_1基因的比较
舒琍琍
冯慧敏
侯云德
《中山医科大学学报》
CSCD
1991
0
在线阅读
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职称材料
2
含Ⅰ型单纯疱疹病毒包装信号序列片段的分离及扩增子质粒双表达载体的构建
王晓丹
杨天忠
颜子颖
徐钤
彭朝晖
侯云德
《第一军医大学学报》
CSCD
1997
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
人血小板生成素cDNA转染COS-7细胞及表达产物对小鼠骨髓巨核细胞的作用
刘东旭
尹华丽
郭涛
吴小林
王虹
邹萍
沈迪
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1998
0
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职称材料
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0
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