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应用PCR和单克隆抗体方法从人粪便及肿瘤组织中检测大肠癌基因突变的研究 被引量:3
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作者 曹琦珍 牛刚 +2 位作者 高立永 高子芬 谭焕然 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2004年第7期734-738,共5页
目的 :检测大肠癌病人粪便中脱落细胞与肿瘤组织细胞的DNA ,对比两者K ras基因序列和突变位点的变化 ,为临床非介入性的、简便的大肠癌诊断提供理论和实验依据。方法 :分离和提纯大肠癌组织及粪便中脱落细胞的DNA ,用PCR (Polymerasecha... 目的 :检测大肠癌病人粪便中脱落细胞与肿瘤组织细胞的DNA ,对比两者K ras基因序列和突变位点的变化 ,为临床非介入性的、简便的大肠癌诊断提供理论和实验依据。方法 :分离和提纯大肠癌组织及粪便中脱落细胞的DNA ,用PCR (Polymerasechainreaction)法扩增K ras基因 ,克隆K ras基因PCR产物并进行DNA序列的测定。免疫组化检测大肠癌相应抗原的表达 :采用ELISA法 ,用大肠癌单克隆抗体对大便样品进行检测。结果 :同一病人的大肠癌组织细胞与粪便中的脱落细胞的K ras基因的序列完全一致 ,并检测到 1例K ras基因点突变。K ras基因突变与否与大肠癌病理类型和大肠癌单克隆抗体检测大便样品中脱落细胞的癌抗原表达水平有一定的相关性。结论 :以大肠癌分子发病机理为基础的非介入性检测粪便中K ras突变是可行的 ,有望成为正常人群大肠癌筛查以及诊断的新方法之一 ,可以为大肠癌的早期发现及监测大肠癌的发生。 展开更多
关键词 大肠癌 K—ras基因 基因突变 大肠癌单克隆抗体 粪便DNA
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转录因子NF-κB p50基因的克隆、表达及抗p50抗体的制备 被引量:1
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作者 谭焕然 牛刚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期236-240,共5页
利用DNA重组技术,将转录因子NF-κBp50基因片段插入pGEX-2T质粒载体,经DNA序列分析证明克隆的正确性.将重组的pGEX-2T/p50转化入大肠杆菌JM109,表达出pGEX-2T/p50融合蛋白.经We... 利用DNA重组技术,将转录因子NF-κBp50基因片段插入pGEX-2T质粒载体,经DNA序列分析证明克隆的正确性.将重组的pGEX-2T/p50转化入大肠杆菌JM109,表达出pGEX-2T/p50融合蛋白.经WesternBlot检测证实表达产物对抗p50c的抗体呈特异性反应,表明克隆的正确性,并成功地应用纯化的p50蛋白制备了免疫血清. 展开更多
关键词 NF-κBp50基因 基因重组 抗p50抗体
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铅染毒大鼠血液中铅与其他元素含量的相关性研究 被引量:2
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作者 闫赖赖 刘丽萍 +2 位作者 牛刚 翁智辉 王京宇 《质谱学报》 EI CAS CSCD 2009年第5期295-299,共5页
研究了铅染毒大鼠血液中铅与其他元素之间的关系。选取75只健康的4周龄雄性Sprague-Dawley大鼠(SD大鼠),随机分为25组,各组染毒剂量均不相同。在实验开始的第40、80、120天,分别从各组中随机选取1只大鼠,乙醚麻醉后取股动脉血。用电感... 研究了铅染毒大鼠血液中铅与其他元素之间的关系。选取75只健康的4周龄雄性Sprague-Dawley大鼠(SD大鼠),随机分为25组,各组染毒剂量均不相同。在实验开始的第40、80、120天,分别从各组中随机选取1只大鼠,乙醚麻醉后取股动脉血。用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定血中的24种元素含量,并对铅与其他元素做相关分析。研究发现:在不同染毒周期,染毒剂量与血铅浓度的关系各有不同。血铅浓度随染毒时间的延长而升高,但染毒剂量在5~70mg·kg-1时,80天染毒组的血铅浓度反而高于120天染毒组;血铅与其他元素含量的相关性随染毒周期的变化而变化。 展开更多
关键词 电感耦合等离子体质谱(ICP—MS) 相关性 铅染毒大鼠 血铅 元素
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肾脏和股骨铅蓄积多元素综合指标探讨
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作者 闫赖赖 王京宇 +3 位作者 刘丽萍 牛刚 王晓霞 欧阳荔 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2012年第3期45-48,共4页
目的:通过对血液中多元素与肾铅、股骨铅关系的分析,探讨能够准确反映肾脏、股骨铅蓄积的综合指标。方法:选取健康的4周龄雄性SD大鼠75只,随机分成25组,采取大剂量范围,小浓度间隔的染毒方法。实验开始后,于第40、80、120天分别从各组... 目的:通过对血液中多元素与肾铅、股骨铅关系的分析,探讨能够准确反映肾脏、股骨铅蓄积的综合指标。方法:选取健康的4周龄雄性SD大鼠75只,随机分成25组,采取大剂量范围,小浓度间隔的染毒方法。实验开始后,于第40、80、120天分别从各组随机选取1只大鼠,经乙醚麻醉后股动脉取血,并收集肾脏、股骨,用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定元素含量。结果:血铅、肾铅、股骨铅浓度随染毒剂量的增加而发生变化,但变化趋势各不相同;血铅浓度与肾铅、股骨铅浓度之间的相关性随染毒周期而变化;血液中其他元素的浓度或浓度比值与肾铅、股骨铅之间的相关有统计学意义,且相关系数均高于单一元素与肾铅、股骨铅间的相关系数。结论:单一血铅指标在反映脏器铅蓄积水平有一定的局限性;多元素综合指标则有可能成为估算脏器铅蓄积水平的有力工具。 展开更多
关键词 多元素综合指标 铅蓄积 肾脏 股骨 电感耦合等离子体质谱
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^(99m)Tc标记的大肠癌单克隆抗体在小鼠体内分布特点的研究
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作者 徐凌燕 赵金彩 +6 位作者 毛一卿 张春丽 李慧 张雅丽 牛刚 阮元 谭焕然 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2004年第7期739-743,共5页
目的 :研究99m Tc标记的大肠癌单克隆抗体(99mTc ACCmAb)在正常小鼠和荷瘤裸鼠体内的分布及在荷瘤裸鼠体内SPECT成像的研究。方法 :将99m Tc和99mTc ACCmAb分别注射入正常小鼠、荷L0 10 16人结肠癌裸鼠 ,按不同时间点采取小鼠的脏器进... 目的 :研究99m Tc标记的大肠癌单克隆抗体(99mTc ACCmAb)在正常小鼠和荷瘤裸鼠体内的分布及在荷瘤裸鼠体内SPECT成像的研究。方法 :将99m Tc和99mTc ACCmAb分别注射入正常小鼠、荷L0 10 16人结肠癌裸鼠 ,按不同时间点采取小鼠的脏器进行同位素放射性活度的测定 ;并在不同时间测定荷L0 10 16人结肠癌裸鼠注射99mTc ACCmAb的SPECT显像。结果 :注射99mTc后正常小鼠体内 6h 5min血液中的放射性活度与 30min相比下降了 76 .6 % ,是30min的 2 3.4 % ;肝脏中 6h 5min的放射性活度为30min的 2 7.2 % ,下降了 72 .8%。尾静脉注射99mTc ACCmAb的正常小鼠 ,6h 5min在血液中的放射性活度与 30min血液中的放射性活度比较下降了6 8.4 % ,是 30min的 31.6 % ,2 4h为 6h 5min的6 .1% ,下降了 93.9% ;荷瘤裸鼠体内99mTc ACCmAb在 2 4h血液中的放射性活度是 6h 5min的 2 .1% ,下降了 97.9%。SPECT显像结果表明 ,虽然在注射99mTc ACCmAb 2 0h血液与肿瘤的比值为最高 ,但在 2 4h的成像结果仍然好于其他的时间点。结论 :99m Tc标记的大肠癌单克隆抗体可特异性浓聚于荷L0 10 16人结肠癌裸鼠模型中 ,可能成为大肠癌根除手术中使用的手术导向体内诊断用药 。 展开更多
关键词 抗大肠癌单克隆抗体(^99mTc-ACCmAb) 大肠癌 分布 成像实验
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