目的探讨维甲酸X受体α(retinoid X receptorα,RXRα)在乙肝病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)上调肝细胞癌DNA甲基转移酶3a(DNA methyltransferases 3a,DNMT3a)表达中的作用及机制。方法采用RT-PCR和Western blot检测12例...目的探讨维甲酸X受体α(retinoid X receptorα,RXRα)在乙肝病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)上调肝细胞癌DNA甲基转移酶3a(DNA methyltransferases 3a,DNMT3a)表达中的作用及机制。方法采用RT-PCR和Western blot检测12例正常肝组织、56例HBV阳性的肝细胞癌和癌旁组织中DNMT3a、RXRα的基因和蛋白表达变化;在培养的SMMC-7721细胞中,转染HBx基因和RXRα基因,观察对其DNMT3a表达的影响;在转染HBx基因的SMMC-7721细胞中,分别加入信号通路阻断剂,观察何种信号通路在HBx调节RXRα的表达中发挥作用。结果与正常肝组织相比,肝癌组织与癌旁组织中DNMT3a的基因和蛋白表达量显著升高(P<0.01),肝癌组织与癌旁组织中RXRα的基因和蛋白表达量显著降低(P<0.01);在SMMC-7721细胞中,HBx的过表达使RXRα的蛋白表达量显著降低(P<0.01),DNMT3a的蛋白表达量显著升高(P<0.01),而RXRα与HBx共转染,则可降低HBx升高的DNMT3a蛋白表达量(P<0.01);MKK/MEK抑制剂PD98059和p38 MAPK抑制剂SB203580可显著升高HBx下调的RXRα基因和蛋白表达(P<0.01)。结论 HBV产生的HBx蛋白可能通过MAPK信号通路,降低RXRα表达,引起促癌基因DNMT3a蛋白含量增加。展开更多
文摘目的探讨维甲酸X受体α(retinoid X receptorα,RXRα)在乙肝病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)上调肝细胞癌DNA甲基转移酶3a(DNA methyltransferases 3a,DNMT3a)表达中的作用及机制。方法采用RT-PCR和Western blot检测12例正常肝组织、56例HBV阳性的肝细胞癌和癌旁组织中DNMT3a、RXRα的基因和蛋白表达变化;在培养的SMMC-7721细胞中,转染HBx基因和RXRα基因,观察对其DNMT3a表达的影响;在转染HBx基因的SMMC-7721细胞中,分别加入信号通路阻断剂,观察何种信号通路在HBx调节RXRα的表达中发挥作用。结果与正常肝组织相比,肝癌组织与癌旁组织中DNMT3a的基因和蛋白表达量显著升高(P<0.01),肝癌组织与癌旁组织中RXRα的基因和蛋白表达量显著降低(P<0.01);在SMMC-7721细胞中,HBx的过表达使RXRα的蛋白表达量显著降低(P<0.01),DNMT3a的蛋白表达量显著升高(P<0.01),而RXRα与HBx共转染,则可降低HBx升高的DNMT3a蛋白表达量(P<0.01);MKK/MEK抑制剂PD98059和p38 MAPK抑制剂SB203580可显著升高HBx下调的RXRα基因和蛋白表达(P<0.01)。结论 HBV产生的HBx蛋白可能通过MAPK信号通路,降低RXRα表达,引起促癌基因DNMT3a蛋白含量增加。
