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多重细胞因子检测试剂的开发及其在骨髓瘤中的应用 被引量:1
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作者 彭火英 张之尧 +4 位作者 郑向君 韦鹏 胡迪 陈文明 于晓波 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1944-1950,共7页
目的:开发多重细胞因子检测试剂,分析复发难治性多发性骨髓瘤(RRMM)的细胞因子、血管生成、骨重塑蛋白表达水平变化。方法:采用多重微球流式荧光免疫技术建立多重细胞因子定量检测试剂,并应用于55例RRMM患者和22例健康对照血清样本的测... 目的:开发多重细胞因子检测试剂,分析复发难治性多发性骨髓瘤(RRMM)的细胞因子、血管生成、骨重塑蛋白表达水平变化。方法:采用多重微球流式荧光免疫技术建立多重细胞因子定量检测试剂,并应用于55例RRMM患者和22例健康对照血清样本的测定,分析患者细胞因子、血管生成、骨重塑蛋白表达水平及其与临床特征的相关性。结果:本研究成功开发了十重细胞因子免疫分析检测试剂,平均灵敏度为7.1 pg/ml,平均回收率为97.4%,平均批内变异系数为4.8%,平均批间变异系数为9.0%。此外,RRMM样本结果发现IL-2、IL-17、DKK1、RANKL、OPG水平与IgG单克隆蛋白水平呈正相关,TIMP1与IgG、IgA单克隆蛋白水平呈正相关。结论:本研究开发出10种具有较高灵敏度和特异性的细胞因子检测试剂,并发现IL-2、IL-17、DKK1、RANKL、OPG、TIMP1在RRMM中具有追踪疾病进程的潜在价值。建立的多重细胞因子试剂开发流程对今后拓展蛋白标志物多重检测试剂的研发和应用具有重要参考价值。 展开更多
关键词 多重微球流式荧光免疫技术 复发难治性多发性骨髓瘤 细胞因子 血管生成 骨重塑
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重组变构人TRAIL联合柔红霉素对白血病细胞诱导凋亡作用及其机制的研究 被引量:5
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作者 张学军 温丽 +6 位作者 王福旭 罗建民 潘崚 刘小军 杜行严 董作仁 杨世芳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期1123-1128,共6页
为了研究重组变构人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(recombinanat mutant human TRAIL,rmhTRAIL)单用及与柔红霉素(DNR)联合应用对白血病细胞株U937、K562的诱导凋亡作用及其机制,以正常人胚肺成纤维细胞株MRC-5作对照,采用MTT法检测体... 为了研究重组变构人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(recombinanat mutant human TRAIL,rmhTRAIL)单用及与柔红霉素(DNR)联合应用对白血病细胞株U937、K562的诱导凋亡作用及其机制,以正常人胚肺成纤维细胞株MRC-5作对照,采用MTT法检测体外培养的U937、K562白血病细胞株在rmhTRAIL单用和联合DNR作用下增殖的抑制效应;用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测DNR处理前后白血病细胞TRAIL死亡受体和诱杀受体的mRNA表达水平。结果表明rmhTRAIL对白血病细胞株U937、K562有较明显的抑制增殖作用,DNR与TRAIL联合对抑制肿瘤细胞具有协同性,与各药单独使用比较均有显著差异(P<0.05);经DNR作用后,U937、K562细胞的死亡受体DR4、DR5水平上调,而两种诱杀受体DcR1、DcR2表达未受影响。结论在体外rm-hTRAIL单用或与DNR联用均能明显抑制白血病细胞增殖,rmhTRAIL与DNR对白血病细胞的杀伤有协同作用,其诱导机制可能与U937、K562细胞死亡受体DR4、DR5表达水平上调有关。 展开更多
关键词 rmhTRAIL U937细胞 K562细胞 柔红霉素
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重组变构人TNF相关促凋亡配体联合三氧化二砷诱导白血病耐药细胞株凋亡 被引量:2
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作者 王雅茹 温树鹏 +5 位作者 王福旭 温丽 杨渤彦 杨敬慈 张学军 杨世方 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期1055-1059,共5页
本研究探讨重组变构人TNF相关促凋亡配体(recombinant mutant human TNF-related apoptosis-inducing ligand,rmhTRAIL)联合三氧化二砷(As2O3)对阿霉素诱导的人慢性髓系白血病红白血病变耐药细胞株K562/AO2(mdr-1+)的促凋亡作用。以亲... 本研究探讨重组变构人TNF相关促凋亡配体(recombinant mutant human TNF-related apoptosis-inducing ligand,rmhTRAIL)联合三氧化二砷(As2O3)对阿霉素诱导的人慢性髓系白血病红白血病变耐药细胞株K562/AO2(mdr-1+)的促凋亡作用。以亲本阿霉素敏感细胞株K562(mdr-1-)为对照,观察rmhTRAIL作用后细胞形态变化,采用MTT法测定rmhTRAIL、As2O3单药及联合作用后细胞增殖抑制率;碘化丙锭染色的流式细胞术(FACSCalibur)定量检测rmhTRAILL、As2O3单药及联合作用后sub-G1峰占检测细胞的百分比(sub-G1%)。结果表明:rmhTRAIL联合As2O3对K562/AO2和K562增殖的抑制作用优于单药,采用国内金(正均)氏公式判断rmhTRAIL和As2O3联合作用具有协同作用;流式细胞术定量检测sub-G1%显示,rmhTRAIL2 000ng/ml与As2O32μmol/L单独作用下K562/AO2组与K562组凋亡率分别为(34.93±0.10)%、(10.53±0.16)%(p<0.01);(5.95±0.07)%、(3.50±0.01)%(p<0.05),联合作用下细胞凋亡率分别为(50.95±0.91)%、(20.75±0.95)%(p<0.05),K562/AO2组凋亡效应强于K562组。结论:rmhTRAIL可诱导K562、K562/AO2细胞凋亡;rmhTRAIL联合凋亡诱导剂As2O3对白血病耐药细胞株K562/AO2和K562细胞株的凋亡具有协同作用;rmhTRAIL、As2O3对K562/AO2的促凋亡作用优于其亲本K562细胞。 展开更多
关键词 重组变构人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 多药耐药基因-1 K562 CELL K562/AO2 CELL 三氧化二砷 细胞凋亡
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重组人淋巴毒素α的高密度发酵、复性和纯化
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作者 李道锋 张建军 +2 位作者 贾慧 杨世方 崔俊生 《中国比较医学杂志》 CAS 2006年第5期291-294,共4页
目的建立和优化重组人淋巴毒素α(rhLT-α)工程菌高密度发酵方法以及目的蛋白的复性和纯化方法,得到高纯度的重组人淋巴毒素α。方法高密度发酵rhLT-α工程菌,超声破碎细胞提取包涵体,经过复性后,用DEAE Sepharose FF,Phenyl Sepharose ... 目的建立和优化重组人淋巴毒素α(rhLT-α)工程菌高密度发酵方法以及目的蛋白的复性和纯化方法,得到高纯度的重组人淋巴毒素α。方法高密度发酵rhLT-α工程菌,超声破碎细胞提取包涵体,经过复性后,用DEAE Sepharose FF,Phenyl Sepharose FF(LS)进行分离纯化。结果重组人淋巴毒素α以包涵体形式表达,经过破碎离心收集包涵体,洗涤后包涵体纯度达到85%以上。复性后,经两步纯化,最终目的蛋白纯度达98%以上。活性达6×108U/mg以上。结论建立了高效简便的淋巴毒素生产工艺,为淋巴毒素的规模生产打下了基础。 展开更多
关键词 淋巴毒素Α 高密度发酵 复性 纯化
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