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单一内标定量核磁法测定肺炎链球菌多糖抗原中荚膜多糖、C-多糖和磷含量
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作者 郭吉茹 秦春君 +4 位作者 胡静 曹欣 徐永学 刘建凯 尹健 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期472-477,共6页
肺炎糖疫苗在预防由肺炎链球菌引起的肺炎和脑膜炎等疾病中发挥关键作用。荚膜多糖、C-多糖和磷含量是疫苗研发和生产中多糖抗原质量控制的重要指标,研究发展了基于单一内标物六甲基磷酰三胺(hexamethylphosphoramide,HMPA)的定量1H NMR... 肺炎糖疫苗在预防由肺炎链球菌引起的肺炎和脑膜炎等疾病中发挥关键作用。荚膜多糖、C-多糖和磷含量是疫苗研发和生产中多糖抗原质量控制的重要指标,研究发展了基于单一内标物六甲基磷酰三胺(hexamethylphosphoramide,HMPA)的定量1H NMR和31P NMR法,实现6A,6B,18C,19A,19F及23F型肺炎链球菌多糖抗原中荚膜多糖、C-多糖和磷含量的同步测定。利用内参物比较法,探究了多糖溶解性质对定量核磁测定的影响,发现定量1H NMR的测定结果受到多糖水溶液黏度和浓度的影响。发现高黏度多糖在3~15 mg/mL,低黏度多糖在5-25 mg/mL是最适检测液浓度范围。该“一内标三定量”NMR法具有良好的精密度、特异性和准确度,为肺炎链球菌疫苗的质量控制提供了一种有价值的新策略。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 荚膜多糖 定量1H NMR 定量31P NMR C-多糖
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人轮状病毒疫苗的研究进展 被引量:13
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作者 张改梅 魏文进 付作申 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期583-588,共6页
轮状病毒(RV)是引起全球5岁以下婴幼儿腹泻最重要的病原之一,普遍流行于发达国家和发展中国家,然而在发展中国家该病的病死率较高。由于目前RV腹泻尚无有效治疗药物,并且改善卫生条件对预防RV感染并无明显的效果。因此,疫苗是目前证实... 轮状病毒(RV)是引起全球5岁以下婴幼儿腹泻最重要的病原之一,普遍流行于发达国家和发展中国家,然而在发展中国家该病的病死率较高。由于目前RV腹泻尚无有效治疗药物,并且改善卫生条件对预防RV感染并无明显的效果。因此,疫苗是目前证实能预防和控制RV腹泻唯一有效的手段。尽管RV疫苗研制已取得很大的进展,由于轮状病毒毒株的多样化和流行分布很广,故而继续研制一种新的适合的安全、有效的RV疫苗显得尤为重要。本文针对人RV疫苗的研究进展、质量控制、保护效力及安全性评价作一综述,以期促进后期相关研究。 展开更多
关键词 人轮状病毒 疫苗进展 质量控制 保护效力 安全性
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b型流感嗜血杆菌荚膜多糖纯化方法的优化 被引量:4
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作者 尹珊珊 李贵凡 +1 位作者 刘学龙 郑海发 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第1期50-52,共3页
对b型流感嗜血杆菌荚膜多糖纯化工艺中冷酚抽提次数、沉淀核酸的乙醇浓度、沉淀糖精的乙醇浓度进行研究。结果表明,最佳纯化工艺为冷酚抽提4次,300 mL/L的乙醇沉淀核酸,650 mL/L的乙醇沉淀糖。所建立的提取纯化工艺提取的荚膜多糖纯度高... 对b型流感嗜血杆菌荚膜多糖纯化工艺中冷酚抽提次数、沉淀核酸的乙醇浓度、沉淀糖精的乙醇浓度进行研究。结果表明,最佳纯化工艺为冷酚抽提4次,300 mL/L的乙醇沉淀核酸,650 mL/L的乙醇沉淀糖。所建立的提取纯化工艺提取的荚膜多糖纯度高,各项指标能够达到WHO的规程要求。 展开更多
关键词 B型流感嗜血杆菌 荚膜多糖 纯化
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实验室内部技术人员检测能力的科学评估方法
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作者 李娜 郑学学 +3 位作者 谭德讲 王翠杰 李向群 杜颖 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2023年第8期258-264,共7页
利用实验室能力验证中测量审核和能力比对两种方式,并结合稳健统计分析方法,建立一套科学有效的人员能力评定统计评价模式,同时以实例演示人员能力的评定过程。研究表明,当已知人员评定标准(参考值)时,则以评定标准为准则进行人员能力比... 利用实验室能力验证中测量审核和能力比对两种方式,并结合稳健统计分析方法,建立一套科学有效的人员能力评定统计评价模式,同时以实例演示人员能力的评定过程。研究表明,当已知人员评定标准(参考值)时,则以评定标准为准则进行人员能力比对;当未知评定标准时,需要评定员根据已有数据结合统计分析制定出指定值。因指定值可能与真实结果之间有较大偏倚,从而导致人员能力被误判,有评定标准(参考值)的比无评定标准的更为可靠。该模式可用于实验室内部技术人员检测能力的科学评价,进而提升实验室的质量管理水平。 展开更多
关键词 人员能力评定 能力验证 稳健统计方法 能力统计量 指定值
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多个相关二分类共同终点临床试验样本量估计方法 被引量:2
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作者 杨嘉莹 王诗远 +1 位作者 李贵凡 刘沛 《中国卫生统计》 CSCD 北大核心 2019年第2期297-301,共5页
对于具有多个主要终点(multiple primary endpoints)的临床试验,当规定任一个终点成功整个研究即为成功时,可称为并交(union-intersection)试验[1],此类研究常常会带来多重性问题。与之相反,针对多个共同终点(multiple co-primary endpo... 对于具有多个主要终点(multiple primary endpoints)的临床试验,当规定任一个终点成功整个研究即为成功时,可称为并交(union-intersection)试验[1],此类研究常常会带来多重性问题。与之相反,针对多个共同终点(multiple co-primary endpoints)的临床研究称为交并(intersection-union)试验[2-3],一般规定多个终点同时具有统计学意义时整个试验才记为成功。这种设计避免了多重检验所带来的Ⅰ类错误膨胀,但需要对Ⅱ类错误进行调整,为临床试验样本量计算带来了新挑战[4-6]。 展开更多
关键词 临床试验 样本量 估计方法 分类 临床研究 统计学 多重
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白喉毒素突变体CRM197原核表达载体构建及其蛋白表达 被引量:2
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作者 肖钾钙镁 王素英 +2 位作者 魏文进 张静飞 林福玉 《天津师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2012年第3期78-80,共3页
将合成的CRM197基因片段克隆到表达载体pBAD-DEST49中,转化到大肠杆菌菌株(ATCCMC1061).经阿拉伯糖诱导,CRM197获得高效表达.目的蛋白主要以包涵体形式存在,变性、复性后经DEAE阴离子交换后获得高于95%纯度的CRM197样品.用该样品做Weste... 将合成的CRM197基因片段克隆到表达载体pBAD-DEST49中,转化到大肠杆菌菌株(ATCCMC1061).经阿拉伯糖诱导,CRM197获得高效表达.目的蛋白主要以包涵体形式存在,变性、复性后经DEAE阴离子交换后获得高于95%纯度的CRM197样品.用该样品做Western blotting鉴定后,能得到单一的特异性条带.本实验的表达策略,为CRM197进一步生产及应用奠定基础. 展开更多
关键词 CRM197 白喉毒素 大肠杆菌
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PK15细胞的无血清全悬浮驯化研究 被引量:11
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作者 刘天伦 郎洪彬 孔飒 《中国兽药杂志》 2019年第9期12-18,共7页
目前PK15细胞主要用于生产猪圆环病毒2型,传统的培养工艺为滚瓶系统或微载体系统,该两种培养系统都存在各自的劣势。驯化一株全悬浮的PK15细胞可推进工艺的进一步升级,降低成本的同时也简化了培养工艺且更易于产业化。经贴壁降血清培养... 目前PK15细胞主要用于生产猪圆环病毒2型,传统的培养工艺为滚瓶系统或微载体系统,该两种培养系统都存在各自的劣势。驯化一株全悬浮的PK15细胞可推进工艺的进一步升级,降低成本的同时也简化了培养工艺且更易于产业化。经贴壁降血清培养、低血清悬浮优化传代、无血清悬浮传代培养,对一株贴壁的PK15细胞进行了无血清的全悬浮驯化。传代23次后,该株细胞无血清全悬浮培养初始密度为0. 5×106/m L,在72 h密度可增殖到4. 0×106/m L左右,形态良好,倍增时间稳定,且细胞活率达到95%以上,命名为PK15-S,为大规模培养PK15细胞提供了理论依据。 展开更多
关键词 PK15细胞 细胞驯化 无血清 全悬浮
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无血清全悬浮PK15细胞培养猪圆环病毒2型的研究 被引量:1
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作者 刘天伦 《中国兽药杂志》 2022年第1期1-6,共6页
为改进猪圆环病毒2型的培养工艺,驯化了一株可无血清培养的全悬浮PK15细胞用于培养猪圆环病毒2型,并对病毒的敏感性、接毒时间、接毒量、收获方法进行了试验。结果表明,用该细胞培养猪圆环病毒2型,如果采用批次收获,接毒时细胞密度为0.5... 为改进猪圆环病毒2型的培养工艺,驯化了一株可无血清培养的全悬浮PK15细胞用于培养猪圆环病毒2型,并对病毒的敏感性、接毒时间、接毒量、收获方法进行了试验。结果表明,用该细胞培养猪圆环病毒2型,如果采用批次收获,接毒时细胞密度为0.5×10^(6)/mL,接毒量为0.1 MOI,接毒72 h后收毒,病毒滴度能达到10^(6.4)TCID_(50)/mL;如果采用连续收获,接毒和带毒传代时均使细胞密度为0.5×10^(6)/mL,接毒量为0.04 MOI,收毒时间为接毒后72 h,连续收获三次,病毒滴度分别为10^(6.0)TCID_(50)/mL、10^(6.25)TCID_(50)/mL、10^(6.5)TCID_(50)/mL,病毒滴度和收获液体积较为理想,可为大规模培养猪圆环病毒2型提供参考。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 PK15细胞 全悬浮 无血清 连续收获
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