沙冬青AmLEA5基因的生物信息学分析及非生物胁迫下的表达模式 被引量：5

1

作者 赵晓鑫 刘美芹 +5 位作者 师静 智冠华 刘胜利 张俊琦 陈玉珍 卢存福 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期492-500,共9页

对用固相扣除杂交方法从低温驯化沙冬青克隆得到的AmLEA5基因进行表达模式分析和生物信息学分析,表明该基因编码一种第5族胚胎发育晚期丰富蛋白(LEA),全长693 bp,含有1个297 bp的开放阅读框,编码98个氨基酸,预测Am-LEA5的分子量为10.6 k... 对用固相扣除杂交方法从低温驯化沙冬青克隆得到的AmLEA5基因进行表达模式分析和生物信息学分析,表明该基因编码一种第5族胚胎发育晚期丰富蛋白(LEA),全长693 bp,含有1个297 bp的开放阅读框,编码98个氨基酸,预测Am-LEA5的分子量为10.6 kDa,是一种亲水性蛋白,有多个磷酸化位点。密码子偏好性分析表明该基因略偏好于用A或T结尾的密码子。系统发生分析表明,AmLEA5蛋白与蒺藜苜蓿LEA(ACJ84182.1)亲缘关系最近。qRT-PCR结果显示AmLEA5的表达量在低温、干旱、盐和热胁迫条件下均有上调,尤其在低温胁迫后期富集量最高。亚细胞定位表明,用YFP标记的AmLEA5位于细胞质和细胞核内。一系列试验结果表明AmLEA5基因在沙冬青抵御非生物胁迫,尤其是在抵御低温胁迫机制中发挥重要作用。 展开更多

关键词 沙冬青 AmLEA5 生物信息学分析 表达模式 亚细胞定位

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秋水仙碱诱导银白杨花粉染色体加倍及其细胞学效应研究 被引量：12

2

作者 李赟 郭倩 +2 位作者 王君 田菊 康向阳 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期749-756,共8页

为推动银白杨倍性育种进展,利用秋水仙碱溶液注射处理,对银白杨花粉染色体加倍技术进行了研究,并通过常规压片及间接免疫荧光技术观察了秋水仙碱处理对小孢子母细胞染色体行为和微管骨架分布的影响。结果表明:(1)施加秋水仙碱处理可诱... 为推动银白杨倍性育种进展,利用秋水仙碱溶液注射处理,对银白杨花粉染色体加倍技术进行了研究,并通过常规压片及间接免疫荧光技术观察了秋水仙碱处理对小孢子母细胞染色体行为和微管骨架分布的影响。结果表明:(1)施加秋水仙碱处理可诱导银白杨花粉染色体加倍,在小孢子母细胞减数分裂细线末期-粗线期施加0.5%秋水仙碱溶液注射处理7次,可获得最高达82.23%的2n花粉。由于注射处理5次与7次诱导效果差异不显著,从节约成本和降低毒害考虑,在实际应用中以0.5%秋水仙碱溶液注射处理5次为宜;(2)秋水仙碱处理导致银白杨小孢子母细胞减数分裂过程染色体行为异常,包括双线期细胞核仁数目增多、微核形成,终变期染色体紧贴核仁,中期I染色体发生极度收缩聚集成团;(3)受秋水仙碱影响,银白杨小孢子母细胞细胞质微管骨架分布发生紊乱。粗线期小孢子母细胞内微管骨架不再呈网状均匀分布于细胞质,而是聚集呈短带状,从而失去对染色体行为的控制。 展开更多

关键词 银白杨 花粉染色体加倍 秋水仙碱 染色体行为 微管骨架

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北方城市绿化常用灌木树种抗旱性评价 被引量：13

3

作者 张皓 丁亚娜 +5 位作者 赵启红 陈永坤 施杨 刘海珍 王玉玲 徐吉臣 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1446-1451,共6页

灌木树种是城市绿化的重要组成部分。本研究以目前北方城市绿化造林常用的13个灌木树种为材料,测定其生理指标,并对各项生理指标进行主成分和隶属函数分析,评估不同品种的抗旱能力,以期为北方地区造林树种的选择提供重要的依据。结果表... 灌木树种是城市绿化的重要组成部分。本研究以目前北方城市绿化造林常用的13个灌木树种为材料,测定其生理指标,并对各项生理指标进行主成分和隶属函数分析,评估不同品种的抗旱能力,以期为北方地区造林树种的选择提供重要的依据。结果表明,不同物种干旱处理后各项生理指标,如相对水含量、相对电导率、以及可溶性糖、叶绿素和脯氨酸含量等的变化规律均存在明显差异,采用单一生理指标比较物种间抗旱性有一定的偏差。主成分和隶属函数分析表明,13个灌木树种的抗旱性由高到低依次为:金焰绣线菊>紫叶小檗>沙地柏>红宝石海棠>珍珠梅>锦带>胡枝子>黄栌>水蜡>金银木>红瑞木>紫穗槐>连翘,分析结果与实际表现相吻合。 展开更多

关键词 灌木 抗旱 生理指标 主成分分析 综合评价值

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测土配方施肥对金银花产量和质量的影响 被引量：9

4

作者 曾慧杰 王晓明 +4 位作者 乔中全 李永欣 蔡能 刘思思 李云 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2443-2449,共7页

为探讨氮、磷、钾肥对金银花产量和质量的影响,在山东临沂地区开展金银花测土配方施肥试验,设计了3个肥料因素(N、P_2O_5、K_2O),4个施肥水平(0水平:不施肥;1水平:常用施肥量0.5倍;2水平:常用施肥量;3水平:常用施肥量1.5倍),共14种配比... 为探讨氮、磷、钾肥对金银花产量和质量的影响,在山东临沂地区开展金银花测土配方施肥试验,设计了3个肥料因素(N、P_2O_5、K_2O),4个施肥水平(0水平:不施肥;1水平:常用施肥量0.5倍;2水平:常用施肥量;3水平:常用施肥量1.5倍),共14种配比施肥处理。结果表明,施肥处理对金银花产量的影响极显著,处理N_2P_3K_2的产量最高为391.8 g,比不施肥产量增加了37.6%;每施1 g氮、磷、钾肥分别能增加花蕾产量1.98、8.21、4.56 g;拟合了金银花单株产量与氮、磷、钾肥的肥料效应方程,其推荐施肥量为N、P_2O_5、K_2O分别施34.9~47.9、13.1~14.4、18.5~23.8 g,此时单株产量为387.0~430.3 g;氮、磷、钾肥与花蕾长度均呈正相关,其中磷肥效果显著,说明磷肥是影响千蕾重和产量的主要肥力因子,是花蕾生长发育的关键元素;不同施肥处理中,磷肥与绿原酸含量表现为正相关,且影响显著;磷肥和钾肥的协同作用与木犀草苷含量呈正相关。本研究结果为金银花氮、磷、钾合理配方施肥提供了理论参考。 展开更多

关键词 金银花 测土配方施肥 产量 质量 肥效方程

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油松端粒长度与树龄相关关系研究 被引量：4

5

作者 胡旭东 撖静宜 +4 位作者 要笑云 李丽红 蒋璐瑶 陆海 刘頔 《广东农业科学》 CAS 2015年第12期61-65,共5页

端粒是位于染色体末端能够保护染色体维持其稳定性的特殊DNA-蛋白复合物,与细胞分裂、细胞衰老及寿命都有着密不可分的联系。结合前人对银杏、狐尾松等木本植物端粒长度与树龄相关关系的研究,选取我国特有常绿木本裸子植物油松作为试验... 端粒是位于染色体末端能够保护染色体维持其稳定性的特殊DNA-蛋白复合物,与细胞分裂、细胞衰老及寿命都有着密不可分的联系。结合前人对银杏、狐尾松等木本植物端粒长度与树龄相关关系的研究,选取我国特有常绿木本裸子植物油松作为试验材料,采集树龄跨度从7年到800年9个年龄段的针叶,采用TRF测定法对油松针叶端粒长度进行了测定。结果表明,随着油松树龄的增加,针叶端粒长度也相应变长。在此基础上,建立了油松端粒长度和树龄相关关系的数学模型,以期利用这一数学模型,可以在不损伤树体的前提下,用更为快捷方便的实验手段对古树树龄进行准确测定。 展开更多

关键词 油松 端粒长度 树龄 数学模型 古树保护

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沙冬青脱水素基因的分子克隆与序列分析 被引量：3

6

作者 许洋 雷晨 +5 位作者 佘露露 王瑾瑜 杨佳慧 陆雅宁 卢存福 陈玉珍 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1317-1324,共8页

脱水素(Dehydrin)是晚期胚胎发生蛋白(LEA)家族中最具特色的一组蛋白,对植物抵抗非生物逆境胁迫起到非常重要的作用。本研究从抗逆性较强的常绿阔叶灌木沙冬青中克隆出4个含有完整ORF的脱水素基因,命名为AmDHN3.2F、AmDHN5.1F、AmDHN6.2... 脱水素(Dehydrin)是晚期胚胎发生蛋白(LEA)家族中最具特色的一组蛋白,对植物抵抗非生物逆境胁迫起到非常重要的作用。本研究从抗逆性较强的常绿阔叶灌木沙冬青中克隆出4个含有完整ORF的脱水素基因,命名为AmDHN3.2F、AmDHN5.1F、AmDHN6.2F和AmDHN7.2,并进行了相关生物信息学分析。使用DNAMAN软件预测结果显示,4个蛋白都含有一个K片段和S片段。理化性质分析表明,4种脱水素蛋白均为亲水性蛋白,其中AmDHN3.2F为碱性蛋白,AmDHN5.1F、AmDHN6.2F和AmDHN7.2为酸性蛋白;理论相对分子质量最大的是AmDHN7.2(21.42kD),最小的是AmDHN3.2F(10.69kD);理论等电点最大的是AmDHN3.2F(9.01),最小的是AmDHN6.2F(6.21)。蛋白二级和三级结构预测结果发现,4种蛋白均由3种结构组成:α-螺旋(7.50%~32.63%)、无规则卷曲(55.79%~73.00%)和延伸链(11.58%~19.50%)。采用邻接法构建系统进化树,并结合同源相似性分析发现,4种脱水素蛋白均与蒺藜苜蓿Mt DHN3和拟南芥At DHN10亲缘关系较近。利用XSTREAM软件分析结果显示,Am DHN5.1F、Am DHN6.2F和Am DHN7.2第3个蛋白序列具有串联重复单元,且主要集中在脱水素的中间部分。通过DOTTER软件生成点阵图发现,在中间区域存在大量的短片段重复,说明脱水素序列的收缩或扩张主要发生在中间部分。这些研究结果为进一步开展沙冬青DHN基因家族的功能分析奠定了基础。 展开更多

关键词 脱水素 沙冬青 基因家族克隆 生物信息学 串联重复

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冬枣大小孢子发生及雌雄配子体发育 被引量：4

7

作者 黄飞逸 豆苏含 +2 位作者 张亚东 庞晓明 李颖岳 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1913-1920,共8页

为完善冬枣生殖生物学和枣树遗传改良理论基础,以不同发育时期的冬枣花蕾为材料,采用压片技术和常规石蜡切片技术,对冬枣大小孢子发生及雌雄配子体发育过程进行观察。结果表明,冬枣具五枚花药,花药四室,花药壁由表皮、药室内壁、1~2层... 为完善冬枣生殖生物学和枣树遗传改良理论基础,以不同发育时期的冬枣花蕾为材料,采用压片技术和常规石蜡切片技术,对冬枣大小孢子发生及雌雄配子体发育过程进行观察。结果表明,冬枣具五枚花药,花药四室,花药壁由表皮、药室内壁、1~2层中层和腺质型绒毡层组成,花药壁的发育属于基本型。小孢子母细胞胞质分裂为同时型,四分体的排列多数呈四面体型,成熟花粉具3个萌发孔,3沟,为二细胞型花粉。冬枣为2室子房,倒生胚珠,多胚珠,内外双层珠被,厚珠心;大孢子母细胞经减数分裂形成的四分体沿珠心呈直线排列,靠近合点端的大孢子发育为功能大孢子,经连续三次有丝分裂发育为七细胞八核的成熟胚囊,胚囊发育属于蓼型。冬枣雄蕊发育显著早于雌蕊,小孢子发育过程存在不同步和异常现象,花朵开放时雌、雄蕊发育趋于同步,大小孢子的发育进程与花蕾外部形态具有相关性。本研究揭示了冬枣大小孢子发生和雌雄配子体发育过程中的基本现象和规律,为枣胚胎学的进一步研究以及倍性育种提供了重要参考。 展开更多

关键词 冬枣 石蜡切片 大小孢子 配子体发育

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TaDEP1基因在普通六倍体小麦及其供体种中的保守与分化 被引量：1

8

作者 张锴 李爱丽 +5 位作者 张兰 赵光耀 孔秀英 贾继增 徐吉臣 毛龙 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期957-964,共8页

根据已知小麦正源基因TaDEP1 cDNA序列设计引物,成功克隆了小麦TaDEP1基因组序列,发现该基因包含5个外显子4,个内含子。通过比较该基因在六倍体普通小麦A、B、D基因组中的差异,筛选出可以区分A、B、D基因组的分子标记Ta956。以中国春缺... 根据已知小麦正源基因TaDEP1 cDNA序列设计引物,成功克隆了小麦TaDEP1基因组序列,发现该基因包含5个外显子4,个内含子。通过比较该基因在六倍体普通小麦A、B、D基因组中的差异,筛选出可以区分A、B、D基因组的分子标记Ta956。以中国春缺体-四体系为材料,利用该标记将TaDEP1基因定位于小麦5A、5B和5D。进一步将Ta956扩增的基因组片段在六倍体A、B、D基因组和二倍体小麦以及四倍体小麦的同源基因组间进行比较,发现内含子区域变异较大,特别是六倍体小麦B和D基因组。进一步对TaDEP1编码蛋白分析显示TaDEP1-D的预测功能域明显区别于TaDEP1-A和TaDEP1-B,表明TaDEP1功能可能具有基因组特异性。筛选的区分不同基因组特异分子标记则为今后的品种鉴定提供了依据。 展开更多

关键词 小麦 TaDEP1 染色体定位 序列分析

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植物二酰甘油酰基转移酶及其编码基因研究进展 被引量：1

9

作者 王婷婷 马晓林 +2 位作者 李凤兰 郭惠红 陈发菊 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期127-130,共4页

三酰甘油(TAG)是植物的主要储藏脂类,二酰甘油酰基转移酶(DGATs)催化TAG生物合成的最后一步乙酰化反应,使二酰甘油加上一个脂肪酰基形成TAG。因此,DGATs被认为是TAG生物合成过程中最关键的限速酶。重点介绍了植物DGATs及其编码基因的分... 三酰甘油(TAG)是植物的主要储藏脂类,二酰甘油酰基转移酶(DGATs)催化TAG生物合成的最后一步乙酰化反应,使二酰甘油加上一个脂肪酰基形成TAG。因此,DGATs被认为是TAG生物合成过程中最关键的限速酶。重点介绍了植物DGATs及其编码基因的分类、结构以及在植物油脂合成中的作用及应用的最新研究进展,以期为应用基因工程等技术提高植物油脂(如种子油)含量或改善油脂品质提供参考。 展开更多

关键词 二酰甘油酰基转移酶 编码基因 研究进展

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强酸胁迫下大叶相思幼苗抗性生理机制研究 被引量：4

10

作者 杨舒贻 李俊成 +2 位作者 惠文凯 陈晓阳 马玲 《生态科学》 CSCD 2017年第5期11-17,共7页

为探讨大叶相思幼苗耐强酸胁迫的生理机制,试验采用水培法,设置了pH 3.0、pH 2.0和pH 5.8(CK)酸胁迫梯度和3天、9天两个持续胁迫时间,观测了大叶相思幼苗在不同强度酸胁迫下叶片丙二醛(MDA)含量,脯氨酸(Pro)含量以及抗氧化酶如过氧化物... 为探讨大叶相思幼苗耐强酸胁迫的生理机制,试验采用水培法,设置了pH 3.0、pH 2.0和pH 5.8(CK)酸胁迫梯度和3天、9天两个持续胁迫时间,观测了大叶相思幼苗在不同强度酸胁迫下叶片丙二醛(MDA)含量,脯氨酸(Pro)含量以及抗氧化酶如过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和谷胱甘肽还原酶(GR)等活性的响应特征。结果表明:(1)酸胁迫加重过程中,PSⅡ最大光化学效率(Fv/Fm)表现出下降趋势;(2)与CK比较,在pH 3.0胁迫下,Pro无显著变化,但在pH 2.0持续胁迫下显著上升,表明当pH值低至2.0时,大叶相思幼苗受到严重胁迫;(3)与CK比较,在pH值为3.0和2.0持续3天、9天的胁迫下,MDA含量无显著变化,表明大叶相思幼苗在极强酸胁迫下膜脂过氧化程度并未显著提高;(4)与CK比较,在pH 3.0胁迫下GST和GPX活性显著上升,但在pH 2.0胁迫下无显著变化;与CK比较,在pH 3.0胁迫下GR和POD活性无显著差异,但在pH 2.0胁迫下有所下降,表明大叶相思幼苗体内不同抗氧化酶在应对不同程度强酸胁迫时表现不同,其中GST对强酸胁迫响应最为敏感。综合分析各指标在不同梯度酸胁迫下的变化,认为大叶相思幼苗耐强酸胁迫的生理调节阈值可能在pH 3.0左右. 展开更多

关键词 大叶相思 酸胁迫 抗氧化酶

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毛白杨木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶PtoXTH35原核可溶性表达方法研究 被引量：1

11

作者 李钰华 李爽 盖颖 《江苏农业科学》 2019年第8期33-36,共4页

从毛白杨中克隆得到木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶PtoXTH35基因,根据SignalIP在线软件预测蛋白信号肽,并分别构建至pET28a、pET32a、pGEX-4t-1、pMAL-c5e、pET 43.1a等5种原核表达载体,经双酶切和测序验证后转化至BL21(DE3)感受态,使用终... 从毛白杨中克隆得到木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶PtoXTH35基因,根据SignalIP在线软件预测蛋白信号肽,并分别构建至pET28a、pET32a、pGEX-4t-1、pMAL-c5e、pET 43.1a等5种原核表达载体,经双酶切和测序验证后转化至BL21(DE3)感受态,使用终浓度为0.4 mmol/L的异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导其表达目的蛋白。经SDS-PAGE检测,结果表明5种载体均可表达目的蛋白,pET28a、pET32a、pGEX-4t-1等3种载体所表达蛋白均以包涵体的形式存在,而pMAL-c5e和pET 43.1a载体携带蛋白表达量高并且所表达蛋白50%为可溶性蛋白,实现了毛白杨PtoXTH35在原核表达系统中的高效可溶性表达,该试验为后续进一步研究毛白杨PtoXTH35的体外功能奠定了基础。 展开更多

关键词 毛白杨 木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶 原核表达 包涵体 可溶性蛋白

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