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携带外源基因的rAAV-2在人树突状细胞中的稳定表达
被引量:
1
1
作者
胡贵方
康禹
+4 位作者
俞守义
彭建强
马鑫
吴小兵
侯云德
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第10期728-730,共3页
目的:观察2型重组腺相关病毒(rAAV-2)载体介导外源基因对人外周血单核细胞来源的树突状细胞(DC)的感染效能.方法:采用激光共聚焦显微镜观察FTTC标记的rAAV-2进入DC的过程;用不同的感染复数(MOI)的rAAV-2-Luc和rAAV-2-GFP感染新分离的DC...
目的:观察2型重组腺相关病毒(rAAV-2)载体介导外源基因对人外周血单核细胞来源的树突状细胞(DC)的感染效能.方法:采用激光共聚焦显微镜观察FTTC标记的rAAV-2进入DC的过程;用不同的感染复数(MOI)的rAAV-2-Luc和rAAV-2-GFP感染新分离的DC,荧光素酶(Luc)检测试剂盒检测Iuc的表达和流式细胞术(FACS)检测GFP表达细胞的百分率.结果:加入rAAV-2后80分钟就可见病毒吸附在DC膜上,至90分钟可完全进入细胞内;MOI为1×104vp/cell时就可检测到Luc的表达,并呈现出随着MOI的加大而提高的趋势,自MOI为5×105vp/cell起,再提高MOI值并不能明显增加luc的表达;rAAV-2介导外源基因感染DC48小时后就可检测到表达,从96~240小时表达水平无明显变化;GFP的表达率为5~18%.结论:rAAV-2介导外源基因能有效感染DC,感染的DC可稳定表达外源基因,rAAV-2载体体外遗传修饰的DC可以进一步用于ex vivo途径的免疫治疗研究.
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关键词
重组腺相关病毒2型
载体
树突状细胞
免疫治疗
人
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题名
携带外源基因的rAAV-2在人树突状细胞中的稳定表达
被引量:
1
1
作者
胡贵方
康禹
俞守义
彭建强
马鑫
吴小兵
侯云德
机构
南方医科大学流行病教研室
北京本元正阳基因技术股份有限公司
中国预防医学科学院病毒学研究所
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第10期728-730,共3页
基金
国家863高科技发展计划基因治疗重大关键技术资助项目(863-BH03-05-02)
文摘
目的:观察2型重组腺相关病毒(rAAV-2)载体介导外源基因对人外周血单核细胞来源的树突状细胞(DC)的感染效能.方法:采用激光共聚焦显微镜观察FTTC标记的rAAV-2进入DC的过程;用不同的感染复数(MOI)的rAAV-2-Luc和rAAV-2-GFP感染新分离的DC,荧光素酶(Luc)检测试剂盒检测Iuc的表达和流式细胞术(FACS)检测GFP表达细胞的百分率.结果:加入rAAV-2后80分钟就可见病毒吸附在DC膜上,至90分钟可完全进入细胞内;MOI为1×104vp/cell时就可检测到Luc的表达,并呈现出随着MOI的加大而提高的趋势,自MOI为5×105vp/cell起,再提高MOI值并不能明显增加luc的表达;rAAV-2介导外源基因感染DC48小时后就可检测到表达,从96~240小时表达水平无明显变化;GFP的表达率为5~18%.结论:rAAV-2介导外源基因能有效感染DC,感染的DC可稳定表达外源基因,rAAV-2载体体外遗传修饰的DC可以进一步用于ex vivo途径的免疫治疗研究.
关键词
重组腺相关病毒2型
载体
树突状细胞
免疫治疗
人
Keywords
Recombinant adeno-associated
irus type 2
Vector
Dendritic cell
Immunotherapy
Human
分类号
R392.2 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
携带外源基因的rAAV-2在人树突状细胞中的稳定表达
胡贵方
康禹
俞守义
彭建强
马鑫
吴小兵
侯云德
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
1
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