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HL-60多药抗性细胞抗HT诱导凋亡机制的研究
被引量:
1
1
作者
程洪艳
李素文
+1 位作者
张鸿卿
薛绍白
《北京师范大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期102-107,共6页
用 1mg·L-1 三尖杉酯碱 (Harringtoning ,HT)处理人早幼粒急性白血病HL 6 0细胞2h ,诱导细胞出现明显的凋亡 (Apoptosis ,Apo)形态学和生化特征 ,包括染色质凝集、Caspase 3(天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白水解酶 3)活化、DNA断裂等 ...
用 1mg·L-1 三尖杉酯碱 (Harringtoning ,HT)处理人早幼粒急性白血病HL 6 0细胞2h ,诱导细胞出现明显的凋亡 (Apoptosis ,Apo)形态学和生化特征 ,包括染色质凝集、Caspase 3(天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白水解酶 3)活化、DNA断裂等 .来自HL 6 0的多药抗性细胞HR2 0和HT9抗HT诱导的凋亡 ,一般认为是P 糖蛋白 (P GP 170 )对药物的外排作用引起细胞对凋亡的抗性 .但用 2mg·L-1 CsA(CysclosporineA)逆转抗性细胞对药物的外排作用 ,1mg·L-1 HT作用 4 8h仍不能诱导HR2 0和HT9细胞凋亡 ,说明HR2 0和HT9多药抗性细胞抗HT诱导凋亡的机制不仅仅在于细胞膜上的P 糖蛋白对药物的外排作用 ,可能还有凋亡相关因子或其他因素参与作用 .Caspase 3是细胞凋亡通路中的一个中心环节 ,HR2 0和HT9抗HT诱导的Caspase 3活化 ,这可能是HR2 0和HT9不能凋亡的一个重要原因 .
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关键词
三尖杉酯碱
多药抗性
天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白水解酶-3
细胞凋亡
P-糖蛋白
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职称材料
中心体异常在咖啡因增强顺铂杀伤人肝癌细胞系中的作用
被引量:
1
2
作者
齐建国
桑建利
+2 位作者
林海燕
陈晓波
王永潮
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期675-680,共6页
为了探讨咖啡因是否影响细胞周期检验点而增强顺铂杀伤肿瘤细胞及其作用机制 ,选取同步化于S期的肝癌细胞系SMMC 772 1,用顺铂和咖啡因进行不同方式的处理 ,包括顺铂处理、咖啡因处理以及先经顺铂 ,再用咖啡因处理 .利用相关方法对不同...
为了探讨咖啡因是否影响细胞周期检验点而增强顺铂杀伤肿瘤细胞及其作用机制 ,选取同步化于S期的肝癌细胞系SMMC 772 1,用顺铂和咖啡因进行不同方式的处理 ,包括顺铂处理、咖啡因处理以及先经顺铂 ,再用咖啡因处理 .利用相关方法对不同处理的细胞进行了分析 ,包括细胞形态 ,细胞生长速率 ,多核细胞的形成与死亡 ,中心体的异常等 .结果显示 ,顺铂与咖啡因联合处理的细胞出现明显的多核化现象 ,多核细胞占总细胞的百分比可以达到 30 %以上 ,高于用顺铂或用咖啡因处理的细胞 .同时观察到多核细胞生存能力较差 ,它们会通过细胞凋亡的形式死亡 .抗中心体人自身免疫血清的免疫荧光结果显示 ,中心体异常与多核细胞的形成直接相关 .在部分多核细胞的核周围有多个不同强度的荧光点 ,在另部分多核细胞中 ,在其中央有一个大的荧光点 ,被多个细胞核围绕 ,荧光较强 .根据结果推测 ,由多个不完整的中心体导致的多极分裂形成多核细胞 ,随后多个中心体聚集到中央形成大的中心体 ,负责间期微管的组装 .结果表明 ,受到顺铂损伤的细胞由于检验点的作用而使细胞周期阻断 ,咖啡因可消除周期的阻断 ,使细胞在中心体未完成正常复制状态下进入有丝分裂 ,产生大量多核细胞 ,这些多核细胞最终发生凋亡 .
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关键词
中心体
顺铂
咖啡因
多核细胞
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职称材料
血浆蛋白质组学在中医证候研究中的应用探讨
被引量:
6
3
作者
李喜悦
黄凌云
+1 位作者
张文生
王永炎
《辽宁中医杂志》
CAS
北大核心
2007年第5期581-582,共2页
证候一直是中医学术研究的核心内容,其整体、动态等特性与血浆蛋白质组学相似,故将后者应用到证候研究中将很可能解决“证”本质的问题,促进中医现代化进程。
关键词
证候
血浆蛋白质组学
探讨
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职称材料
鼠PS1-GFP融合蛋白表达载体的构建研究
4
作者
李佳慧
李铁
桑建利
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2005年第S1期62-63,共2页
Presenilin1(PS1)的突变是早发家族性老年痴呆发生的重要因素之一。目前对于PS1结构和功能的研究表明,PS1作为一种多次跨膜并具有γ-secretase活性的蛋白酶,很可能参与众多的细胞信号传导通路,影响细胞分化和调亡、组织及个体的发育等...
Presenilin1(PS1)的突变是早发家族性老年痴呆发生的重要因素之一。目前对于PS1结构和功能的研究表明,PS1作为一种多次跨膜并具有γ-secretase活性的蛋白酶,很可能参与众多的细胞信号传导通路,影响细胞分化和调亡、组织及个体的发育等等。但对于PS1的精细结构和功能目前了解甚少,为探讨PS1的精细结构和功能,本研究构建了鼠PS1-GFP融合蛋白表达载体。方法:我们设计了扩增PS1的cDNA全长的引物,以C57BL/6小鼠9天胚的RNA为模板,利用RT-PCR的方法从C57BL/6小鼠9天胚中获得PS1的cDNA,经测序确认后,将其克隆到pMD18-TVector中。设计引物:上游5’-GCCGAATTCTATGACAGAGATACCTGCACC-3’;下游5’-GAAGGATCCGATATAAAACTGATGGAATGC-3’,上游含有EcoRI酶切位点,下游含有BamHI酶切位点。利用高保真DNA聚合酶通过PCR方法将pMD18-T-PS1质粒中的PS1基因亚克隆到pEGFP-C1载体中,获得pEGFP-C1-PS1融合蛋白表达载体,然后利用EcoRI和BamHI从pEGFP-C1-PS1融合蛋白中切下PS1基因,从pMD18-T-PS1质粒中切下载体部分,经过连接,获得中间载体,利用该重组载体中的EcoRI和SalI酶切位点,酶切连接入pEGFP-N2载体中,获得pEGFP-N2-PS1融合蛋白表达载体,经测序鉴定后备用。
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关键词
PS1基因
绿色荧光蛋白
融合蛋白
小鼠
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职称材料
题名
HL-60多药抗性细胞抗HT诱导凋亡机制的研究
被引量:
1
1
作者
程洪艳
李素文
张鸿卿
薛绍白
机构
北京师范大学
生命
科学院
细胞
研究所
出处
《北京师范大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期102-107,共6页
基金
国家自然科学基金重点资助项目 ( 3 973 0 160 )
教育部细胞增殖及调控生物学开放实验室资助项目
文摘
用 1mg·L-1 三尖杉酯碱 (Harringtoning ,HT)处理人早幼粒急性白血病HL 6 0细胞2h ,诱导细胞出现明显的凋亡 (Apoptosis ,Apo)形态学和生化特征 ,包括染色质凝集、Caspase 3(天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白水解酶 3)活化、DNA断裂等 .来自HL 6 0的多药抗性细胞HR2 0和HT9抗HT诱导的凋亡 ,一般认为是P 糖蛋白 (P GP 170 )对药物的外排作用引起细胞对凋亡的抗性 .但用 2mg·L-1 CsA(CysclosporineA)逆转抗性细胞对药物的外排作用 ,1mg·L-1 HT作用 4 8h仍不能诱导HR2 0和HT9细胞凋亡 ,说明HR2 0和HT9多药抗性细胞抗HT诱导凋亡的机制不仅仅在于细胞膜上的P 糖蛋白对药物的外排作用 ,可能还有凋亡相关因子或其他因素参与作用 .Caspase 3是细胞凋亡通路中的一个中心环节 ,HR2 0和HT9抗HT诱导的Caspase 3活化 ,这可能是HR2 0和HT9不能凋亡的一个重要原因 .
关键词
三尖杉酯碱
多药抗性
天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白水解酶-3
细胞凋亡
P-糖蛋白
Keywords
Harringtoning(HT)
multidrug-resistance
Caspase-3
cell apoptosis
P-glycoprotein
分类号
Q279 [生物学—细胞生物学]
Q244 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
中心体异常在咖啡因增强顺铂杀伤人肝癌细胞系中的作用
被引量:
1
2
作者
齐建国
桑建利
林海燕
陈晓波
王永潮
机构
北京师范大学
生命
科学院
细胞
生物学研究所
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期675-680,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目 (No .3 0 2 70 663 )
国家重点基础研究发展规划资助项目 (No.G19990 5 3 90 1)~~
文摘
为了探讨咖啡因是否影响细胞周期检验点而增强顺铂杀伤肿瘤细胞及其作用机制 ,选取同步化于S期的肝癌细胞系SMMC 772 1,用顺铂和咖啡因进行不同方式的处理 ,包括顺铂处理、咖啡因处理以及先经顺铂 ,再用咖啡因处理 .利用相关方法对不同处理的细胞进行了分析 ,包括细胞形态 ,细胞生长速率 ,多核细胞的形成与死亡 ,中心体的异常等 .结果显示 ,顺铂与咖啡因联合处理的细胞出现明显的多核化现象 ,多核细胞占总细胞的百分比可以达到 30 %以上 ,高于用顺铂或用咖啡因处理的细胞 .同时观察到多核细胞生存能力较差 ,它们会通过细胞凋亡的形式死亡 .抗中心体人自身免疫血清的免疫荧光结果显示 ,中心体异常与多核细胞的形成直接相关 .在部分多核细胞的核周围有多个不同强度的荧光点 ,在另部分多核细胞中 ,在其中央有一个大的荧光点 ,被多个细胞核围绕 ,荧光较强 .根据结果推测 ,由多个不完整的中心体导致的多极分裂形成多核细胞 ,随后多个中心体聚集到中央形成大的中心体 ,负责间期微管的组装 .结果表明 ,受到顺铂损伤的细胞由于检验点的作用而使细胞周期阻断 ,咖啡因可消除周期的阻断 ,使细胞在中心体未完成正常复制状态下进入有丝分裂 ,产生大量多核细胞 ,这些多核细胞最终发生凋亡 .
关键词
中心体
顺铂
咖啡因
多核细胞
Keywords
centrosome, CDDP(cis-dichloro-diammine platinum (Ⅱ)), caffeine, multinuclear cell
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
Q25 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
血浆蛋白质组学在中医证候研究中的应用探讨
被引量:
6
3
作者
李喜悦
黄凌云
张文生
王永炎
机构
北京师范大学
资源药物与中药资源研究所
北京师范大学生命科学院细胞所
出处
《辽宁中医杂志》
CAS
北大核心
2007年第5期581-582,共2页
基金
国家重点基础发展规划-973项目(2003CB517105)
北京市教委新医药学科群项目(XK100270569)
文摘
证候一直是中医学术研究的核心内容,其整体、动态等特性与血浆蛋白质组学相似,故将后者应用到证候研究中将很可能解决“证”本质的问题,促进中医现代化进程。
关键词
证候
血浆蛋白质组学
探讨
分类号
R2-03 [医药卫生—中医学]
在线阅读
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职称材料
题名
鼠PS1-GFP融合蛋白表达载体的构建研究
4
作者
李佳慧
李铁
桑建利
机构
中国医学
科学院
中国协和医科
大学
实验动物研究所
北京师范大学
生命
科学院
细胞
生物学研究所
出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2005年第S1期62-63,共2页
文摘
Presenilin1(PS1)的突变是早发家族性老年痴呆发生的重要因素之一。目前对于PS1结构和功能的研究表明,PS1作为一种多次跨膜并具有γ-secretase活性的蛋白酶,很可能参与众多的细胞信号传导通路,影响细胞分化和调亡、组织及个体的发育等等。但对于PS1的精细结构和功能目前了解甚少,为探讨PS1的精细结构和功能,本研究构建了鼠PS1-GFP融合蛋白表达载体。方法:我们设计了扩增PS1的cDNA全长的引物,以C57BL/6小鼠9天胚的RNA为模板,利用RT-PCR的方法从C57BL/6小鼠9天胚中获得PS1的cDNA,经测序确认后,将其克隆到pMD18-TVector中。设计引物:上游5’-GCCGAATTCTATGACAGAGATACCTGCACC-3’;下游5’-GAAGGATCCGATATAAAACTGATGGAATGC-3’,上游含有EcoRI酶切位点,下游含有BamHI酶切位点。利用高保真DNA聚合酶通过PCR方法将pMD18-T-PS1质粒中的PS1基因亚克隆到pEGFP-C1载体中,获得pEGFP-C1-PS1融合蛋白表达载体,然后利用EcoRI和BamHI从pEGFP-C1-PS1融合蛋白中切下PS1基因,从pMD18-T-PS1质粒中切下载体部分,经过连接,获得中间载体,利用该重组载体中的EcoRI和SalI酶切位点,酶切连接入pEGFP-N2载体中,获得pEGFP-N2-PS1融合蛋白表达载体,经测序鉴定后备用。
关键词
PS1基因
绿色荧光蛋白
融合蛋白
小鼠
Keywords
presenilin1
GFP
fusing protein
mouse
分类号
Q95 [生物学—动物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HL-60多药抗性细胞抗HT诱导凋亡机制的研究
程洪艳
李素文
张鸿卿
薛绍白
《北京师范大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
中心体异常在咖啡因增强顺铂杀伤人肝癌细胞系中的作用
齐建国
桑建利
林海燕
陈晓波
王永潮
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
血浆蛋白质组学在中医证候研究中的应用探讨
李喜悦
黄凌云
张文生
王永炎
《辽宁中医杂志》
CAS
北大核心
2007
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
鼠PS1-GFP融合蛋白表达载体的构建研究
李佳慧
李铁
桑建利
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2005
0
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职称材料
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