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重组腺病毒载体Ad5-Olig1-eGFP的构建与鉴定
1
作者
赵红
王苏平
+1 位作者
张拥波
王得新
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2012年第4期526-529,共4页
目的:转录因子Olig1调控了少突胶质前体细胞的分化和成熟,并参与了脱髓鞘损伤后的修复,是治疗脱髓鞘疾病的候选基因,在缺血性脑血管病的治疗中具有极大的应用价值。本实验旨在构建携带Olig1基因的重组腺病毒载体。方法:pDC315-Olig1为模...
目的:转录因子Olig1调控了少突胶质前体细胞的分化和成熟,并参与了脱髓鞘损伤后的修复,是治疗脱髓鞘疾病的候选基因,在缺血性脑血管病的治疗中具有极大的应用价值。本实验旨在构建携带Olig1基因的重组腺病毒载体。方法:pDC315-Olig1为模板,聚合酶链反应扩增酶切Olig1片段,连接到带有eGFP标记基因的载体质粒pDC315-eGFP上,构建穿梭质粒pDC315-Olig1-eGFP,经PCR,酶切及测序鉴定后,利用AdMax包装系统,通过脂质体2000的介导与骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre共转染HEK293细胞,同源重组后产生复制缺陷型重组腺病毒载体Ad5-Olig1-eGFP,应用PCR对毒种进行鉴定,传代纯化病毒并反复冻融扩增病毒。以50%组织培养感染剂量法(TCID50)测定病毒滴度。结果:经聚合酶链反应,酶切鉴定和测序分析,得到大小700bp(Olig1)目的片段,证实正确构建重组穿梭质粒pDC315-Olig1-eGFP和重组腺病毒Ad5-Olig1-eGFP,测得重组腺病毒颗粒数为2.3×1011v.p./mL。结论:成功构建携带Olig1的重组腺病毒载体Ad5-Olig1-eGFP,为缺血性脑血管病的基因治疗提供基因载体并奠定实验基础。
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关键词
脑血管障碍
腺病毒载体
Olig1
基因重组
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职称材料
氯吡格雷、华法林及他汀类药物治疗缺血性卒中的遗传药理学研究
2
作者
高一鹭
张拥波
李继梅
《中国卒中杂志》
2011年第11期915-921,共7页
抗血小板聚集、抗凝及血脂调控药物是临床治疗与预防缺血性卒中(ischaemic stroke,IS)的重要措施,而氯吡格雷、华法林及他汀类药物是其中常用的治疗药物;然而,遗传因素可导致药物代谢酶、转运体及作用靶点等药物反应相关蛋白活性出现个...
抗血小板聚集、抗凝及血脂调控药物是临床治疗与预防缺血性卒中(ischaemic stroke,IS)的重要措施,而氯吡格雷、华法林及他汀类药物是其中常用的治疗药物;然而,遗传因素可导致药物代谢酶、转运体及作用靶点等药物反应相关蛋白活性出现个体差异,从而影响药物的疗效和毒副作用。本文将探讨氯吡格雷、华法林及他汀类药物治疗IS的遗传药理学,并分析影响药物疗效及毒副作用的基因多态性,以利个体化的IS治疗与预防。
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关键词
脑梗死
遗传药理学
多态现象
遗传
氯吡格雷
华法林
他汀类药物
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职称材料
题名
重组腺病毒载体Ad5-Olig1-eGFP的构建与鉴定
1
作者
赵红
王苏平
张拥波
王得新
机构
辽宁省大连市中心
医院
神经
内科
北京市首都医科大学附属北京友谊医院神经内科
出处
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2012年第4期526-529,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号:30870855)
北京市自然科学基金资助项目(编号:70820280)
文摘
目的:转录因子Olig1调控了少突胶质前体细胞的分化和成熟,并参与了脱髓鞘损伤后的修复,是治疗脱髓鞘疾病的候选基因,在缺血性脑血管病的治疗中具有极大的应用价值。本实验旨在构建携带Olig1基因的重组腺病毒载体。方法:pDC315-Olig1为模板,聚合酶链反应扩增酶切Olig1片段,连接到带有eGFP标记基因的载体质粒pDC315-eGFP上,构建穿梭质粒pDC315-Olig1-eGFP,经PCR,酶切及测序鉴定后,利用AdMax包装系统,通过脂质体2000的介导与骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre共转染HEK293细胞,同源重组后产生复制缺陷型重组腺病毒载体Ad5-Olig1-eGFP,应用PCR对毒种进行鉴定,传代纯化病毒并反复冻融扩增病毒。以50%组织培养感染剂量法(TCID50)测定病毒滴度。结果:经聚合酶链反应,酶切鉴定和测序分析,得到大小700bp(Olig1)目的片段,证实正确构建重组穿梭质粒pDC315-Olig1-eGFP和重组腺病毒Ad5-Olig1-eGFP,测得重组腺病毒颗粒数为2.3×1011v.p./mL。结论:成功构建携带Olig1的重组腺病毒载体Ad5-Olig1-eGFP,为缺血性脑血管病的基因治疗提供基因载体并奠定实验基础。
关键词
脑血管障碍
腺病毒载体
Olig1
基因重组
Keywords
Cerebrovascular disorders
Adenovirus vector
Olig1
Gene cloning
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
氯吡格雷、华法林及他汀类药物治疗缺血性卒中的遗传药理学研究
2
作者
高一鹭
张拥波
李继梅
机构
北京市首都医科大学附属北京友谊医院神经内科
出处
《中国卒中杂志》
2011年第11期915-921,共7页
基金
北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养计划项目(2009-03-07)
文摘
抗血小板聚集、抗凝及血脂调控药物是临床治疗与预防缺血性卒中(ischaemic stroke,IS)的重要措施,而氯吡格雷、华法林及他汀类药物是其中常用的治疗药物;然而,遗传因素可导致药物代谢酶、转运体及作用靶点等药物反应相关蛋白活性出现个体差异,从而影响药物的疗效和毒副作用。本文将探讨氯吡格雷、华法林及他汀类药物治疗IS的遗传药理学,并分析影响药物疗效及毒副作用的基因多态性,以利个体化的IS治疗与预防。
关键词
脑梗死
遗传药理学
多态现象
遗传
氯吡格雷
华法林
他汀类药物
Keywords
Brain infarction
Pharmacogenetics
Polymorphism, genetic
Clopidogrel
Warfarin
Statins
分类号
R743.3 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组腺病毒载体Ad5-Olig1-eGFP的构建与鉴定
赵红
王苏平
张拥波
王得新
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2012
0
在线阅读
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职称材料
2
氯吡格雷、华法林及他汀类药物治疗缺血性卒中的遗传药理学研究
高一鹭
张拥波
李继梅
《中国卒中杂志》
2011
0
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职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
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