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草鱼肝细胞的分离与原代培养
被引量：
11
1
作者
秦洁
叶元土
+7 位作者
冷向军
蔡春芳
宋亮
许凡
张宝彤
萧培珍
张波
王丽宏
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2012年第3期33-39,95,共8页
目的以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝细胞为实验对象,在不同条件下进行原代培养,以探讨适合草鱼肝细胞生长的最佳条件及培养方法,用于饲料营养与非营养物质对草鱼肝细胞代谢、损伤作用机制的研究。方法采用温胰蛋白酶消化法和红细...
目的以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝细胞为实验对象,在不同条件下进行原代培养,以探讨适合草鱼肝细胞生长的最佳条件及培养方法,用于饲料营养与非营养物质对草鱼肝细胞代谢、损伤作用机制的研究。方法采用温胰蛋白酶消化法和红细胞裂解液分离、纯化肝细胞,MTT法测定细胞增殖率,并测定不同时期培养液上清液中LDH、Alb和BUN的含量,分析肝细胞生长状况。结果采用0.25%浓度的温胰蛋白酶消化法,消化20min,分步收集肝细胞,经台盼蓝染色检测和血球计数板计数,活细胞数≥99%。结论在含10%胎牛血清、10μg/mL胰岛素的M199培养基中,以接种浓度1.7×106cell/mL左右为宜,置于27℃、4.5%CO2浓度的恒温培养箱中,可成功培养草鱼原代肝细胞。
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关键词
草鱼
肝细胞
原代培养
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题名
草鱼肝细胞的分离与原代培养
被引量：
11
1
作者
秦洁
叶元土
冷向军
蔡春芳
宋亮
许凡
张宝彤
萧培珍
张波
王丽宏
机构
上海海洋大学
水产
与生命学院 上海海洋大学省部共建
水产
种质资源发掘与利用教育部重点
实验室
苏州大学基础医学与生物科学学院 江苏省
水产
动物
营养
重点
实验室
北京市营养源研究所系统营养工程技术研究中心-水产动物系统营养研究开放实验室
出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2012年第3期33-39,95,共8页
基金
国家自然基金项目(31172417)
苏州市应用基础(农业)项目(N313401210)
文摘
目的以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝细胞为实验对象,在不同条件下进行原代培养,以探讨适合草鱼肝细胞生长的最佳条件及培养方法,用于饲料营养与非营养物质对草鱼肝细胞代谢、损伤作用机制的研究。方法采用温胰蛋白酶消化法和红细胞裂解液分离、纯化肝细胞,MTT法测定细胞增殖率,并测定不同时期培养液上清液中LDH、Alb和BUN的含量,分析肝细胞生长状况。结果采用0.25%浓度的温胰蛋白酶消化法,消化20min,分步收集肝细胞,经台盼蓝染色检测和血球计数板计数,活细胞数≥99%。结论在含10%胎牛血清、10μg/mL胰岛素的M199培养基中,以接种浓度1.7×106cell/mL左右为宜,置于27℃、4.5%CO2浓度的恒温培养箱中,可成功培养草鱼原代肝细胞。
关键词
草鱼
肝细胞
原代培养
Keywords
Ctenopharyngodon idellus； Hepatocyte； Primary culture；
分类号
Q95-33 [生物学—动物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
草鱼肝细胞的分离与原代培养
秦洁
叶元土
冷向军
蔡春芳
宋亮
许凡
张宝彤
萧培珍
张波
王丽宏
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2012
11
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