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DNA甲基转移酶基因干扰对HepG2细胞癌-睾丸抗原再表达的影响
1
作者
李宏涛
梁后杰
+1 位作者
李文梅
肖文华
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第12期1434-1438,共5页
目的探讨抑制甲基转移酶(DNMT1、DNMT3a和DNMT3b)对肝细胞癌细胞中癌-睾丸抗原表达的影响及相关机制。方法分别采用针对DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的siRNA(DNMT1+3a+3b),针对DNMT1和DNMT3a的siRNA(DNMT1+3a),针对DNMT1和DNMT3b的siRNA(DNMT1...
目的探讨抑制甲基转移酶(DNMT1、DNMT3a和DNMT3b)对肝细胞癌细胞中癌-睾丸抗原表达的影响及相关机制。方法分别采用针对DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的siRNA(DNMT1+3a+3b),针对DNMT1和DNMT3a的siRNA(DNMT1+3a),针对DNMT1和DNMT3b的siRNA(DNMT1+3b)以及针对DNMT3a和DNMT3b的siRNA(DNMT3a+3b)转染HepG2细胞,并以使用5-杂氮脱氧胞嘧啶(5-Aza-dC)处理的细胞作为阳性对照,采用RT-PCR、实时定量PCR和Western blotting检测细胞中DN-MT及癌-睾丸抗原的表达情况,并采用甲基化特异PCR(MSP)检测部分癌-睾丸抗原基因启动子的甲基化状态。结果经siRNA干扰后,细胞中DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的表达量均明显降低。癌-睾丸抗原CT10和SSX1在转染DNMT1+3a和DNMT1+3b的细胞中出现再表达,而MAGE1及MAGE3在各siRNA转染细胞中均有表达,且无明显差异。CT10的启动子区发生了去甲基化,但MAGE1启动子区处于非甲基化状态。结论在HepG2细胞中,干扰DNMT可使癌-睾丸抗原基因的启动子区发生去甲基化,后者可使由甲基化导致的不能表达的癌-睾丸抗原基因发生再表达。
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关键词
甲基转移酶类
癌-睾丸抗原
癌
肝细胞
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题名
DNA甲基转移酶基因干扰对HepG2细胞癌-睾丸抗原再表达的影响
1
作者
李宏涛
梁后杰
李文梅
肖文华
机构
第三军医大学西南医院
肿瘤
科
北京市肿瘤防治研究所高技术实验室
解放军总医院第一附属医院
肿瘤
科
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第12期1434-1438,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30572144)
文摘
目的探讨抑制甲基转移酶(DNMT1、DNMT3a和DNMT3b)对肝细胞癌细胞中癌-睾丸抗原表达的影响及相关机制。方法分别采用针对DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的siRNA(DNMT1+3a+3b),针对DNMT1和DNMT3a的siRNA(DNMT1+3a),针对DNMT1和DNMT3b的siRNA(DNMT1+3b)以及针对DNMT3a和DNMT3b的siRNA(DNMT3a+3b)转染HepG2细胞,并以使用5-杂氮脱氧胞嘧啶(5-Aza-dC)处理的细胞作为阳性对照,采用RT-PCR、实时定量PCR和Western blotting检测细胞中DN-MT及癌-睾丸抗原的表达情况,并采用甲基化特异PCR(MSP)检测部分癌-睾丸抗原基因启动子的甲基化状态。结果经siRNA干扰后,细胞中DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的表达量均明显降低。癌-睾丸抗原CT10和SSX1在转染DNMT1+3a和DNMT1+3b的细胞中出现再表达,而MAGE1及MAGE3在各siRNA转染细胞中均有表达,且无明显差异。CT10的启动子区发生了去甲基化,但MAGE1启动子区处于非甲基化状态。结论在HepG2细胞中,干扰DNMT可使癌-睾丸抗原基因的启动子区发生去甲基化,后者可使由甲基化导致的不能表达的癌-睾丸抗原基因发生再表达。
关键词
甲基转移酶类
癌-睾丸抗原
癌
肝细胞
Keywords
methyltransferases
cancer-testis antigen
carcinoma
hepatocellular
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
DNA甲基转移酶基因干扰对HepG2细胞癌-睾丸抗原再表达的影响
李宏涛
梁后杰
李文梅
肖文华
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
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